盐酸哈尔酚骆驼蓬碱对人肝癌细胞生长的影响与自噬诱导作用的研究

目的探讨低剂量盐酸哈尔酚骆驼蓬碱(harmol hydrochloride dihydrate,HHD)对肝癌细胞株HepG2生长的影响及其自噬诱导作用。方法用不同浓度的HHD作用于肝癌细胞株HepG2 24 h后四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法检测细胞活力,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用蛋白质印迹(western blotting, WB)的方法检测LC-3Ⅱ表达水平。结果 MTT检测结果显示不同浓度的HHD作用于HepG2细胞24h后,细胞活力随HHD浓度升高而降低,差异均有统计学意义(P0.05)。0、0.005、0.01 mg/mL HHD作用于HepG2细胞24 h后,细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P0.05)。0.01 mg/mL的HHD处理HepG2细胞24 h后,凋亡小体的形成明显增多(P0.05)。Western blotting法检测发现0.01 mg/mL HHD作用细胞24 h后自噬标记蛋白LC-3Ⅱ表达显著升高。结论 HHD抑制肝癌细胞株HepG2在体外生长,其诱导细胞自噬可能是抑制作用机制之一。     

基于分时的LEO卫星网络非对称路由算法

提出了一种基于分时的LEO卫星网络非对称路由算法A-DTRA（asymmetric discrete time based routing algorithm）。针对网络节点在各时间片内的链路连接状态,该算法通过中心节点两次广播来获取一跳邻节点信
　　息及其邻节点的邻居节点信息,从而完成了链路检测,得到每个时间片内的有向虚拟拓扑图。通过使用备份路由和路由表压缩机制实现了非对称链路上分组转发的可靠性,失效节点处理的及时性以及星上节点开销的低耗性。通过仿真分析可知,该算法具有较好的数据包转发率和端到端时延性能。此外,利用非对称链路可提高网络的连通性能,该算法适用于存在非对称链路的LEO卫星网络。     

骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性研究

目的探讨骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性。方法用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导NRK细胞自噬,用激光共聚焦显微镜观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)建立体外细胞炎症模型;在骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳浓度和时间下进行干预,以CCK-8试验检测细胞活性,用Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用ELISA试剂盒检测炎症因子IL-1β和IL-6的分泌量。结果骆驼蓬多糖对NRK细胞诱导自噬的最佳时间为12 h,浓度范围为50～100μg/mL。骆驼蓬多糖干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型后,对细胞活力均无明显影响,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,细胞培养液中IL-6和IL-1β分泌量降低,与模型组有显著差异(P(27)0.05)。结论骆驼蓬多糖能抑制LPS刺激诱导的炎症因子的释放,诱导细胞自噬和凋亡,在50～100μg/mL范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。     

薯蓣皂苷元对鱼藤酮损伤PC-12细胞的保护作用研究

目的研究薯蓣皂苷元对PC-12细胞生长的影响及其自噬诱导作用。方法用薯蓣皂苷元(diosgenin,DG)干预PC-12细胞,四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法和平板克隆形成实验检测DG对PC-12细胞的保护作用。DG处理PC-12细胞, Western Blot方法检测P62、LC3-Ⅱ蛋白的相对表达量。DG处理经过鱼藤酮诱导损伤的PC-12细胞,激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧的变化, Mito Tracker Red方法观察线粒体变化。结果 MTT法和平板克隆形成实验结果表明,薯蓣皂苷元在15μg/mL时对PC-12细胞有保护作用。DG干预PC-12细胞12 h后, P62蛋白表达减少(P<0.05), LC3-Ⅱ蛋白水平升高(P<0.05)。DG干预鱼藤酮损伤的PC-12细胞24 h后,细胞内活性氧降低(P<0.001),线粒体损伤减弱。结论薯蓣皂苷元可以通过诱导细胞自噬对鱼藤酮诱导的PC-12细胞损伤发挥保护作用。     

骆驼蓬多糖以自噬途径免疫调节炎症细胞模型

目的：以骆驼蓬多糖干预小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型,探讨骆驼蓬多糖调节炎症反应的生物活性及意义。方法：利用稳定表达GFP-LC3的NRK细胞,用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导细胞自噬,用激光共聚焦显微镜进行观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖构建炎症反应细胞模型;参照骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳浓度和时间进行干预,以CCK-8试验检测细胞活性,选择Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用ELISA试剂检测炎症因子IL-1β和TNF-α的分泌量。结果：骆驼蓬多糖对NRK细胞诱导自噬的最佳时间为12h,浓度为50μg/mL-100μg/mL范围。骆驼蓬多糖干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型后,抑制细胞增殖活性,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,细胞培养液中,TNF-a和IL-1β分泌量降低,与模型组有显著差异(p<0.05)。结论：骆驼蓬多糖能抑制LPS刺激诱导的巨噬细胞增殖,诱导细胞自噬和凋亡,能抑制LPS诱导的炎症因子。     

补偿收缩混凝土在天津芥园道水厂的应用

本文介绍了补偿收缩混凝土在天津市芥园道水厂的工程应用,工程实践证明补偿收缩混凝土可以减轻或消除有害裂缝的产生,达到结构自防水的目的。