黑龙江、吉林地区松茸ITS序列遗传多样性分析

提取黑龙江省5个不同产地和吉林省汪清地区不同产地松茸子实体的基因组DNA,利用ITS序列分析技术研究其遗传多样性。测序后通过和GenBank中序列比对,采用最大简约法(Maximum Parsimony,MP)、最小进化法(Minimum Evolution,ML)和邻位相接法(Neighbor Joining,NJ)构建系统发育树。结果表明,6个样品的ITS序列被分成了两大组,鸡东,汪清,东京城,东宁由于序列比较相似被分为一组,穆棱和海林被分为另一组。每组的ITS序列变化较小,相似度较高。同时,多个位点存在着差异,有转换、颠换和缺失。     

细胞凋亡检测剂125,131I-Annexin Ⅴ的制备和初步评价

利用国内基因工程制备的Annexin Ⅴ,采用Iodo-Gen标记方法,研究了125,131I-Annexin Ⅴ的标记条件.在每管加入50 μg Iodo-Gen、pH=6～7.8、Annexin Ⅴ的质量浓度大于25 μg/mL的条件下,反应10 min,标记物的标记率大于80%.经PD-10色谱柱纯化后,标记物的放化纯度大于95%,室温下,标记物能稳定40 h.在正常小鼠体内的生物分布实验表明,碘标记的Annexin Ⅴ主要浓聚于肝、脾、肾,在体内清除很快.凋亡细胞结合分析表明,碘标记的Annexin Ⅴ保持了较好的生物活性,对PS的解离常数K为8.53 nmol/L,结合容量RT为1.23×106结合位点数/个细胞.所制备的细胞凋亡检测剂125,131I-Annexin Ⅴ可以用于进一步的动物模型或人体实验.     

人高血压相关基因(HRG-1)编码蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

为了研究一个新的人高血压相关基因HRG－1的编码蛋白在大肠杆菌中的表达及生物学活性,使用PCR的方法扩增人HRG－1基因ORF的编码序列,构建了原核表达质粒,并在大肠杆菌中诱导表达及进行体外活性鉴定,实验结果证明得到了具有生物学活性的人HRG－1原核表达蛋白,且人HRG－1原核表达蛋白具有真核表达蛋白一致的生物学活性。     

细胞凋亡检测蛋白Annexin V的制备纯化和初步评价

文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组Annexin V,建立了批量获得Annexin V工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序.通过SDS-PAGE分析和得到的Annexin V标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的凋亡进行有效检测的实验表明经过离子层析纯化后得到了高纯度、有生物活性的人重组Annexin V纯品.细胞结合分析的结果显示Annexin V的KD值为8.53 nmol/L,RT为8.79 nmol/L.     

人重组血管生成素在大肠杆菌的表达与鉴定

利用ＰＣＲ技术从人肝细胞文库中扩增出血管生成素的ｃＤＮＡ，将其连入大肠杆菌表达载体后，在大肠杆菌成功地表达出人重组的Ａｎｓ融合蛋白和Ａｎｇ非融合蛋白，表达量占体蛋白的２５％，有明显的促进新生血管生成作用和ＲＮＡ酶及Ｌ９２９细胞粘附活性。     

凋亡相关新基因TFAR19的cDNA克隆、表达和功能研究

利用RDA技术从人白血病细胞TF-1中克隆成功一个与凋亡相关的新基因TFA R19.序列分析表明,TFAR19 cDNA全长559bp,其中25-399bp编码125个氨基酸的蛋白质.mRNA斑点杂交分析表明TFAR19在50种组织中均有不同程度的表达.在大肠杆菌中表达并纯化了重组TFAR19蛋白质,制备了多克隆抗体,Western Blot发现TFAR19蛋白在凋亡的TF-1细胞中高表达.瞬时转染TFAR19正义基因后,TF-1细胞去细胞因子后凋亡速度增加.研究表明它能抑制胃癌细胞株803细胞和Hela细胞的生长,促进它们的去血清所致的凋亡.     

放射性Annexin V活体检测细胞凋亡的研究进展

概述了放射性Annexin V活体检测细胞凋亡的研究状况，介绍了这类显像剂在医学临床研究上的优越性，并对放射性标记Annexin V显像剂的研究方法和进展进行了评述。