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1.
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曲霉属丝状真菌,尤其是黑曲霉(Aspergillus niger)和米曲霉(Aspergillus oryzae),常被作为宿主菌表达生产各类蛋白并在工业上得以广泛使用。工业生产中,为了提高蛋白产量,获取更大的经济效益,需要对影响蛋白表达的各种因素进行改进,使用高效的启动子便是其中策略之一,强启动子的使用能够从转录水平上提高同源或是异源蛋白在曲霉中的表达产量。该文介绍了曲霉蛋白表达过程中常见启动子的使用情况,重点阐述了国内外改进启动子活性构建高效启动子的几种策略,对新型启动子在曲霉蛋白表达中的应用做出了展望。 相似文献
3.
毛细管气相色谱法测定小麦和玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇 总被引:2,自引:0,他引:2
本文采用毛细管气相色谱法测定了小麦和玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的含量,小麦、玉米样品分别用乙腈-水(84:16,V/V)提取,小麦样品提取液用硅镁型吸附剂净化,玉米样品提取液用硅镁型吸附剂和活性炭二步净化,采用N-七氟丁酰咪唑(HFBI)为衍生剂,带电子捕获检测器的GC进行检测。DON加标量为0.5~1.5mg/kg时,5次重复实验的平均回收率:小麦样品为82.2%~98.5%,玉米样品为86.0%~103.4%,相对标准偏差(RSD)分别为6.2%~7.6%和6.4%~8.0%,该法DON的最低检出限为0.01mg/kg,线性范围为0.075~15mg/k8。用该法对21个小麦样品与20个玉米样品中DON的含量进行检测,其中小麦样品中DON含量为0.153~4.618mg/kg,污染率为47.6%,超标率为9.5%;而玉米样品中DON含量为0.116~3.004mg/kg,污染率为85%,超标率为20%。 相似文献
4.
利用噬菌体肽库淘选玉米赤霉烯酮的模拟表位 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:利用噬菌体肽库淘选玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)模拟表位。方法:以抗ZEN单克隆抗体为配体,利用噬菌体七肽库淘选ZEN的模拟表位,采用了逐轮减少抗体包被浓度,交换使用封阻液中蛋白质种类的方法,经三轮淘选后,随机挑取20个克隆测序并以ELISA方法及竞争ELISA实验,以确定阳性克隆。结果:获得10种序列,ELISA显示其中两种序列为阳性克隆,抑制率达90%以上,其氨基酸序列分别为DAVILLM,HHCHWWH。结论:噬菌体展示技术可淘选到ZEN的模拟表位,淘选到的噬菌体粒子可作为毒素的替代品建立免疫学检测方法。 相似文献
5.
由真菌产生的聚酮化合物是一类庞大的次级代谢产物,具有结构和功能的多样性.聚酮合酶是介导聚酮化合物合成的关键酶.大多数真菌聚酮合酶属于重复Ⅰ型PKS,其编码基因通常与聚酮化合物合成的其它相关基因成簇存在.作者论述了真菌聚酮合酶的特性及其基因克隆方法的进展,并对其在后基因组时代的研究进行了展望. 相似文献
6.
7.
为了建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法,选用Ultimate XB-C18柱(2.1 m×100 mm,3 μm),以V(甲醇):V(乙腈)∶V(2.5 mmol/L乙酸铵)=45∶50∶5的溶液为流动相,样品用沉淀蛋白法处理后进样,流速为0.3 mL/min。选用Finnigan TSQ Quantum Access液质联用(LC-MS/MS)分析仪的选择反应监测(SRM)扫描方式进行监测,选择电喷雾离子源ESI,正离子方式。辛伐他汀的线性范围为0.1~20 μg/L,定量下线为0.1 μg/L。准确度与精密度结果显示,方法日间、日内相对标准偏差(RSD)小于15%,方法提取回收率为71.96%~78.44%。稳定性试验中,血浆中辛伐他汀在各种储存条件下均较稳定。试验表明,该方法快速、灵敏,专属性强、重现性好,可用于人血浆中辛伐他汀浓度的测定和药代动力学研究。 相似文献
8.
检测赭曲霉毒素A(OTA)的酶联免疫吸附法(ELISA)体系的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
本文分别以自制抗-OTA兔血清抗体(IgG)及鸡卵黄抗体(IgY)就影响检测OTA的ELISA(酶联免疫吸附法)体系因素进行了探讨,建立了检测OTA的ELISA方法。鸡卵黄抗体的最佳ELISA操作参数为:包被抗原浓度为7.5μg/ml,封阻剂浓度为2.5%,抗体稀释倍数为1000,酶标二抗稀释倍数为14000;兔血清抗体的最佳ELISA操作参数为:包被抗原浓度为2.5μg/ml,封阻剂浓度为2.5%,抗体稀释倍数为8000,酶标二抗稀释倍数为10000。IgG和IgY的检测灵敏度分别为10ng/ml和1ng/ml。 相似文献
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