多铜氧化酶在大肠杆菌中的分泌表达

生物胺是存在于发酵食品中的一类有机物，过量摄入会危害人体健康。多铜氧化酶中的某些酶具有降解多种生物胺的活性，在减控发酵食品中的氨(胺)类危害物方面具有良好的应用前景。研究多铜氧化酶的分泌表达，对酶的特性改造和工业化生产与应用具有重要意义。本研究通过在解淀粉芽孢杆菌来源的多铜氧化酶N端融合信号肽PhoA实现了多铜氧化酶在大肠杆菌中的分泌表达，胞外酶活为69.8 U/L。通过优化诱导条件和酶的分泌确定了多铜氧化酶最优发酵条件为诱导温度25℃、IPTG浓度0.05 mmol/L、诱导时菌体OD600=1.0、诱导6 h后添加150 mmol/L甘氨酸；发酵40 h时胞外多铜氧化酶酶活达到238.1 U/L，是优化前的3.4倍。     

一种基于密度和约束的数据流聚类算法

文章在传统聚类算法的基础上,提出了一种基于密度和约束的数据流聚类算法——C-DBDStream(Constraint and Density Based Clustering of Data Stream)。该算法使用数据流聚类在线和离线两阶段框架。在线聚类阶段使用衰减窗口模型,对数据流中的数据对象进行初步的聚类,应用约束条件生成微簇,并将实例级的约束扩展到了微簇级,并将结果以快照的形式保存下来为下一阶段做准备;离线聚类阶段则利用微簇级约束规则聚类,采用DBSCAN算法中的密度可达寻找密度连通区域以产生最终结果。经实验证明,与Clu Stream算法的对比中,C-DBDStream算法提高了聚类效果。     

荚膜红细菌来源的酪氨酸酚裂解酶的酶学性质

L-酪氨酸作为人体非必需氨基酸之一,是合成苯丙素类化合物等多种高价值化学产品的重要前体物质。因其可作为营养补充剂,以及多肽类激素、抗生素、L-多巴、黑色素、对羟基肉桂酸等产品的原料,被广泛应用于食品、化工、饲料和医药等行业。为了促进L-酪氨酸的高效生产,在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达来源于荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus)的酪氨酸酚裂解酶(Tyrosine phenol lyase,TPL),并进行了诱导条件优化、酶活测定和酶学性质分析。结果表明,来源于荚膜红细菌的TPL最适pH为8.5;最适温度为40℃;酶活和比酶活分别为0.29 U/m L和0.29 U/mg;体外全细胞催化的酶活为0.41 U/g;反应10 h生成L-酪氨酸产量为0.30 g/L。结果表明,来源于R.capsulatus的TPL在大肠杆菌中成功表达,为后续提高表达量及分子改造提高催化性能的研究奠定基础。     

人造肉生产技术相关专利分析

对近年来国内外关于人造肉生产技术相关的专利申请状况进行了分析,通过对历年专利申请趋势、主要申请人和发明人、专利布局情况的统计和对重点专利技术内容的解析,力求能全面系统地反映包括植物蛋白肉和细胞培养肉生产技术、人造肉商品化技术、人造肉重塑成型技术领域专利技术的发展及现状,寻找相关专利技术在发展中还存在的问题,并针对这些问题提出了下一步的研究方向,以期对尽早实现我国人造肉的规模化生产提供参考。     

产5-氨基乙酰丙酸酿酒酵母工程菌株的构建

5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)是一种天然存在的非蛋白质类氨基酸,在医学和农业领域应用广泛。为构建生产ALA的酿酒酵母细胞工厂,作者首先在酿酒酵母中分别表达了来源于酿酒酵母和类球红细菌中编码ALA生物合成C4途径ALA合酶的hem1和hemA基因,同时又表达了来源于大肠杆菌编码C5途径关键酶谷氨酰-tRNA还原酶和谷氨醛氨基转移酶的基因hemA和hemL。结果表明,表达酿酒酵母自身来源的hem1基因更利于ALA的合成,ALA产量为327.6 mg/L。在此基础上将C4和C5途径的基因hem1、hemA和hemL在酿酒酵母中过量表达,在添加前体物质甘氨酸和琥珀酸的条件下,ALA产量为525.8 mg/L,实现了在酿酒酵母中合成ALA。     

不同植物乳杆菌发酵液抑菌活性及其主要有机酸组成比较

对分离自云南传统发酵食品的18 株植物乳杆菌代谢产物的主要有机酸成分及对病原菌抑菌活性进行分析。采用Spot-on-lawn及琼脂扩散法研究不同植物乳杆菌代谢产物抑菌活性；通过高效液相色谱法分析主要有机酸的种类和产量；选取其中3 株植物乳杆菌对其进行包括生长曲线、pH值、抑菌活性在内的动态监测。结果表明，抑菌活性取决于不同的植物乳杆菌菌株、病原菌及发酵碳源。当大肠杆菌O157:H7作为病原菌、葡萄糖作为碳源时，植物乳杆菌YmL-4-5具有最高的抑菌活性；当沙门氏菌ATCC 6538作为病原菌、果糖作为碳源时，植物乳杆菌S5抑菌作用最强。数据证明植物乳杆菌发酵液的抑菌活性受上清液低pH值的影响，且主要抑菌物质为有机酸。有机酸的主要成分是乳酸（930.9～3 008.7 μg/mL），其次为苹果酸和乙酸。其中乳酸和乙酸的产量与其对大肠杆菌O157:H7的抑菌活性呈正相关（r分别为0.474、0.488，P＜0.05）。本研究为研发新的生物防腐剂提供了理论依据。     

昙花一现——宋辽金时期的花塔建筑

正中国古塔是中国古代建筑文化的重要组成部分,按形制分类可分为楼阁式塔、密檐式塔、亭阁式塔、覆钵式塔、金刚宝座式塔、花塔等类型。塔作为佛教文化的重要载体,不仅将佛教弘扬传播,同时也结合了中华民族的自身特点不断进行演化,形成造型各异的佛塔类型。花塔是我国佛塔建筑中一种独特的形制。相比其它类型的佛塔,花塔现存的实例凤毛麟角,绝大部分分布于华北地区。     

新型轻钢龙骨多层结构体系分析

介绍了新型轻钢龙骨结构多层建筑的结构体系和使用性能,并通过对齐齐哈尔市备建的一幢六层新型轻钢龙骨结构教学楼的力学试验结果和ANSYS建模计算结果的比较,对其安全性能做出了分析,最后针对这种结构体系的应用提出了发展的前景和所存在的问题。     

Websteel梁柱节点的改进方案试验研究

基于加拿大Websteel轻钢龙骨结构体系在我国进行推广和应用,对其原梁柱节点性能做出了分析,并指出其原节点在使用中出现的不足,借鉴其他结构中梁柱节点的处理措施,提出了Websteel梁柱节点的改进方案.通过试验和理论研究,证实改进后的梁柱节点能够满足使用要求.     

对堤防稳定渗流形成条件的探讨

堤防稳定渗流计算是堤防工程设计的重要组成部分,依据《堤防工程设计规范》条文说明8.1.2、8.1.3“大江大湖堤防,汛期挡水时间长,能形成稳定渗流浸润线,海堤及有些江湖堤防挡水时间短,在汛期往往未能形成稳定渗流,因此,应根据实际情况按稳定渗流或不稳定渗流计算浸润线及渗流稳