皂苷鼠李糖苷酶RhaG和RhaD的酶反应特性研究

[目的]研究皂苷鼠李糖苷酶RhaG 和RhaD 的酶反应特性.[方法]对微生物Absidia sp.G3g 菌产的人参皂苷糖苷酶(RhaG)和Absidia sp.DOd菌产的薯蓣皂苷糖苷酶(RhaD)分别进行分离纯化,并对2种提纯酶的分子量和酶性质进行了研究.[结果]RhaG 和RhaD 的酶蛋白分子质量分别为61、56 kDa.RhaG的酶反应最适pH为5.0,pH 稳定范围为3.0-7.0;最适温度为40℃,30～60℃温度稳定性较好;米式常数Km为9.523 mmol/L.RhaD的酶反应最适pH为5.0,pH稳定范围为3.0～7.0;最适温度为40℃,30～50℃温度稳定性较好;米式常数Km为8.834 mmol/L.[结论]该研究为进一步探明2 种酶间的差别奠定了基础.     

用中国北方大麦制备麦芽的工艺及其酶系

研究了用黑龙江产的大麦制备优质麦芽的工艺和制麦过程中的酶系变化。结果表明，用中国北方大麦可以制备符合国家标准一级的啤酒酿造用麦芽。本文介绍了制麦工艺及其酶系。     

黄酮类活性成分的分离提纯

研究了酶转化芦丁产物异槲皮甙的分离提纯。酶反应产物用硅胶柱层析法提取，可以得到高纯度的异槲皮甙。通过高效液相色谱检测纯度，结果表明异槲皮甙转化率为70％，纯度为90％以上。通过核磁共振测定，确定此酶反应产物是异槲皮甙。     

提取麦冬皂苷用酶的微生物筛选及其产酶条件

为提高麦冬总皂苷提取率,采用生物酶法提取麦冬总皂苷,筛选得到产酶微生物Absidiasp.O8s菌株.通过实验确定了该菌产酶的最适条件:诱导物为豆粕,诱导物浸出液在培养基中的体积分数为15%,发酵温度30℃,培养时间为5 d.     

大豆异黄酮生理功能的研究进展

大豆异黄酮因具有明显的生物学活性已越来越引起社会和学术界的普遍关注,是近年来科学家研究的热点。研究表明,大豆异黄酮与人类健康密切相关,具有许多生理功能,如抗肿瘤作用、对血管的防护作用、抗氧化活性、类似女性雌激素作用以及抗激素作用等。文中阐述了大豆异黄酮生理功能的研究进展。     

不同种类人参及其各部位中皂苷组成和比例的研究

研究了不同种类人参中皂苷含量 ,以及人参不同部位中的皂苷成分及比例。总皂苷含量测定结果为 ,三七参根中含 14 .2 % ,西洋参须中含 10 .1% ,人参根中含 4.4% ,人参头中含 8.6% ,人参皮中含 6.7% ,人参叶中含 7.7% ,人参须中含 9.9%。对西洋参须、三七参根及吉林产的人参头、人参皮、人参叶、人参根、人参须中的总皂苷作TLC检测及薄层扫描表明 ,三七参根中Rg1含量最高 ,西洋参须中Rb1含量最高 ,人参根中Rd的含量可以忽略 ,人参叶中含有特征皂苷F2 ;它们的Rb1/Rg1值分别为 ,西洋参须中 2 2 .2 ,三七参根中 0 .6,人参头中 4.3 ,人参皮中 6.7,人参叶中 0 .2 ,人参根中 2 .4,人参须中 11.9。     

芦丁的酶法转化及其产物异槲皮苷的分离

利用微生物Absidiasp.R9g产的芦丁-α-鼠李糖苷酶(RhaR)转化芦丁制备异槲皮苷,采用硅胶柱层析法对酶解产物进行分离纯化。结果表明,24.0g芦丁的酶解产物,经分离可得到较纯的异槲皮苷单体13.1g,其得率为49.4%。通过高效液相色谱检测其纯度达到98.3%。     

白头翁皂苷的分离提纯

酒精溶剂浸提得到较粗的白头翁总皂苷,脱脂后,经大孔树脂层析得到高产、高纯的白头翁总皂苷,得率为9.4%。总皂苷经硅胶柱层析得到无色的、纯度较高的单体皂苷,得率为22.8%。通过薄层层析把纯化的单体皂苷与标准品白头翁皂苷Ⅲ进行对照,分离纯化的单体皂苷与标准品相同,是3 O [α L 鼠李糖基(1→2) α L 阿拉伯糖苷] 3β,23 羟基 Δ20(29) 羽扇豆烯 28 O [α L 鼠李糖基(1→4) β D 葡萄糖基(1→6)] β D 葡萄糖酯苷。     

人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因的亚克隆及表达

将人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因。结果显示,重组酵母菌在甲醇体积分数为0.5%,72 h培养后,所提取的酶蛋白经酶活性检测,发现具有人参皂苷-α-鼠李糖苷酶的活性,经SDS-PAGE分析,确定其分子质量为52 ku,与理论值基本相符,表明该基因得到了表达。