海刺参组织蛋白酶L基因的克隆、重组表达及活性鉴定

通过RT-PCR和RACE PCR技术,从海刺参(Stichopus japonicus)肠中克隆得到编码组织蛋白酶L(SjCL)基因,其中全长cDNA 1 287 bp,5′非编码区(UTR)202 bp,3′UTR 87 bp,开放阅读框(ORF)999 bp,编码332个氨基酸(aa),包括组织蛋白酶L成熟肽316 aa和信号肽16 aa,分子质量预测为35.3 ku。用SjCL序列与相似物种海胆、海葵等进行对比,可知SjCL具有组织蛋白酶L所特有的氨基酸保守区域ERFNIN和GNFD,以及由Cys 139,His 278和Asn 299残基组成的保守活性位点。将编码SjCL基因克隆进原核表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-SjCL,转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞,再进行诱导表达、亲和纯化和透析复性,得到了纯化且具有活性的重组SjCL。酶活力检测结果表明,重组SjCL对组织蛋白酶L特异性底物Z-Phe-Arg-Nmec具有较高活性,而对组织蛋白酶B特异性底物Z-Arg-Arg-Nmec无活性。本实验对SjCL的cDNA序列进行了生物信息学分析并通过基因工程...     

扇贝柱质构分析的测试条件

研究了扇贝柱质构分析(TPA)的测定方法.考察了TPA测定时扇贝柱适宜的预处理方法,比较了压缩程度、压缩速率对扇贝柱TPA特性参数硬度、弹性、凝聚性、咀嚼性和回复性的影响.研究结果表明,压缩程度对扇贝柱咀嚼性之外的TPA特性参数影响显著,压缩速率对其影响不显著.最终确定扇贝柱的适宜预处理条件为温度70℃,时间12 mi...     

酶法制备鲍鱼脏器呈味肽及呈味氨基酸

研究了酶法制备鲍鱼脏器呈味肽及呈味氨基酸的最佳条件.鲍鱼脏器分别经中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解,中性蛋白酶酶解产物的水解度和肽得率最大,鲜味氨基酸含量最高且口味最好.以中性蛋白酶为工具酶,通过单因素试验和响应面分析确定了酶解的最佳条件:酶加量3 000 U/g,温度46℃,pH 7.8,时间3 h,底物质量分数...     

海参肠自溶水解物抗氧化活性的研究

为了提高海参肠的利用率,利用海参自溶技术制备海参肠自溶水解物.分析了自溶水解物的分子质量分布范围和氨基酸组成,并通过体外化学模拟体系测定其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除能力、Fe2+螯合能力和还原能力.结果表明,海参肠自溶水解物主要由分子质量小于3 ku的组分组成,含有17种氨基酸,其具有一定的DPP...     

牡蛎糖原的提取、纯化及补体活性研究

采用酶解结合醇沉法从新鲜牡蛎中提取制备牡蛎糖原(oyster glycogen,OG),经阴离子交换柱DEAE-52、葡聚糖凝胶柱SephadexG-100分离纯化,得到纯度较高的牡蛎糖原组分OG11.其蛋白质量分数为0.33％,糖质量分数为97.77％.用气相色谱法对OG11进行单糖组成鉴定,结果表明其中只含有葡萄糖...     

胰蛋白酶酶解法制备海参肽的工艺条件

以海参肽得率为指标,分别考察了酶解加酶量、时间、pH、温度、底物浓度对胰蛋白酶酶解海参蛋白质反应的影响。通过正交实验确定了胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳工艺条件:酶加量6 000 U/g,水解反应时间3 h,温度55℃,pH 8.0,底物浓度1.0%,在此条件下,海参肽得率可达32.93%。     

L.paraplantiumⅡ32发酵条件的初步研究

从4种培养基中筛选出MRS培养基为L.paraplantiumⅡ32的最适生长培养基。并运用点滴法,通过单因子筛选法,最终确定该菌生长、最大抑菌活性产生的最佳碳源为麦芽糖;氮源为酵母粉,浓度为2.0%;最适的初始pH值范围为5.5~6.5;温度范围为29~31℃。     

水解松仁蛋白用酶的最佳工艺条件

为了充分利用松仁中的蛋白质，将其酶解制备活性多肽，分别对7种蛋白酶进行水解实验。用pH-stat法控制水解度，用福林-酚法测定吸光度，计算氮溶指数。通过正交实验得出如下结果：最佳用酶是Asl．398中性蛋白酶。最佳水解条件为：温度50℃，pH=7．0，底物浓度1．2％，酶与底物比4000U／g蛋白。     

食品添加剂对提高越桔色素稳定性的研究

将越桔天然色素纯化后测定其光谱特性,研究了温度、光照、pH值对越桔色素稳定性的影响及色素的耐氧化还原性。着重研究了食品添加剂对提高越桔色素稳定性的作用,通过正交实验确定其中4种有较强提高稳定性作用的食品添加剂,其最佳组合浓度为丁二酸0.09%、阿魏酸0.03%、对羟基苯甲酸0.08%、柚皮苷0.01%。     

美国地锦色素提取剂的选择及其稳定性影响因素的研究

通过实验确定美国地锦色素的提取剂的选择，并测定各种因素对该色素稳定性的影响。结果表明：30％酸性乙醇是美国地锦色素的较好提取剂。实验数据显示：光照、温度、酸碱、氧化还原剂、食品添加剂以及金属离子对该色素的稳定性影响都不大。该色素是稳定性好的食品添加剂。