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目的克隆人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段并构建其原核表达系统。方法用PCR法从人巨细胞病毒AD169株基因组DNA中扩增gB/AD-1片段并克隆至pGEM-T载体,酶切后,亚克隆至表达载体pET-15b,构建重组表达质粒pET-15b/gB/AD-1,并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达。表达产物经金属螯合层析一步纯化,并用Westernblot鉴定。结果gB/AD-1蛋白表达量达到35%。表达产物经纯化后,纯度大于95%。经Westernblot检测,表达产物与CMV阳性人血清发生特异性反应。结论已成功构建重组表达载体pET-15b/gB/AD-1,并在大肠杆菌中高水平表达gB/AD-1。 相似文献
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引起柴油机曲轴烧蚀的原因是多方面的，如何根据烧曲轴的现象、特征进行分析，从而找出烧曲轴的真正原因。文中根据多年实践，概述了烧曲轴的原因以及相应的现象、特征。 相似文献
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目的建立重组复杂蛋白快速表达体系。方法利用定点整合技术建立定点整合宿主细胞库,分别以X-Fc融合蛋白和人凝血因子Ⅷ(FⅧ)为研究对象进行定点整合转染和表达分析。结果通过定点整合转染建立了高表达的宿主细胞库;X-Fc融合蛋白和人FⅧ均在宿主细胞中获得了高表达,X-Fc融合蛋白的表达量为220 mg/L,人FⅧ在有血清培养条件下的酶活性为2 IU/ml,且细胞株表达稳定,易于扩大培养。结论已成功建立了基于CHO细胞定点整合的重组复杂蛋白快速表达体系,该体系在克隆效率和时间上具有很大优势,可实现蛋白的有效快速表达。 相似文献
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目的建立高表达抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体的工程细胞株。方法将构建的抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体基因真核表达载体转染CHO细胞,并采用DHFR/MTX基因扩增策略,经反复加压和克隆筛选,提高抗体的表达量。用ELISA、Westernblot和体外中和试验分析比较抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体与鼠亲本单抗的特性。结果获得的表达抗人TNF-α嵌合抗体的转染细胞系2F5,在静止培养4d后工程抗体的表达量约80mg/L。所表达的工程抗体优于鼠亲本单抗F7/2,并具有良好的特异性和中和活性,其相对亲和力约为2.1×10-10mol/L。结论已成功建立了高表达的嵌合抗体工程细胞株,其抗体具有潜在的临床应用前景。 相似文献
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1 增压柴油机所用涡轮增压器如何将柴油机的废气热能转变成动能? ·44·内燃机 2000年第3期 答:涡轮增压器主要由压气机和涡轮两部分组成,见图1。1.涡轮组合件 2.涡壳 3.堵盖 4.涨圈5.卡簧 6.浮动轴承 7.石棉垫 8.中间体 9.螺栓 10.锁片 11.压板 12.端盖13.压气机壳 14.胶圈 15.弹簧片 16.止推板17.止推套筒 18.压气机 19.自锁螺母20.涨圈 21.定位销 22.石棉垫 23.螺栓24.锁片 25.压板图1 涡轮增压器结构示意图压气机部分:主要包括单级离心式压气机叶轮、扩压器(端盖)和压气机壳。涡轮部分:主要包括涡轮壳、单级… 相似文献
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b.通过怠速运转 3～ 5 min,可仔细观察涡轮增压器各项参数是否正常。其中主要包括 :增压柴油机机油压力是否正常 ,润滑油路是否畅通 ,进入涡轮的燃气温度是否在规定的范围之内 ,涡轮增压器有无不正常的声音和振动 ,并注意检查有无碰擦迹象 ,机油以及空气是否渗漏。否则 ,增压柴油机启动后 ,马上加大负荷 ,提高转速 ,极易出现异常故障 ,损坏涡轮增压器零件。8.为什么增压柴油机 (汽车 )在长时间满负荷运转或下坡行驶时 ,不允许突然关机停车或关机滑行 ?答 :由于增压器转速很高 ,在柴油机突然关机停车后 (汽车下坡关机滑行后 ) ,因惯性力作用 … 相似文献
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长期以来，我国制造细菌诊断血清的吸收菌采用较高浓度的甲醛溶液杀菌。由于甲醛能使蛋白质变性，降低血清效价及稳定性，故吸收菌在使用前须经3次离心洗脱甲醛，不仅耗费人力物力，生产周期长，而且吸收菌易自凝。我们根据文献资料和自己的经验，设计试验了适用于沙门氏菌、志贺氏菌、病原性大肠艾希氏菌诊断血清吸收菌的杀菌剂，即0．1％碘化汞与0．1％福尔马林的混合液，并与传统的福尔马林杀菌法作了比较。本试验共用21株菌种，包括沙门氏菌10株，志贺氏菌7株及病原性大肠艾希氏菌4株。试验了3种碘化汞杀菌剂浓度，即0．1％碘化汞与0．3… 相似文献
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