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探讨黄皮果果核挥发油(essential oil of kernel,EOK)对诱导小鼠黑色素瘤细胞B16-F10增殖和凋亡的影响。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测不同浓度的EOK处理B16-F10细胞24、48、72 h后的细胞存活率,并用不同浓度EOK处理B16-F10细胞24 h,荧光法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的变化、磷脂酰丝氨酸蛋白抗体/碘化丙啶(Annexin V-FITC/propidiun iodide,Annexin V-FITC/PI)染色检测细胞凋亡、蛋白免疫印迹法检测核转录因子-кB(nuclear factor-кB,NF-кB P65)及其磷酸化的蛋白(phosphorylate nuclear factor-кB,NF-кB P-P65)、Cleavedcaspase 3、Bax及Bcl-2蛋白表达的水平。结果显示,EOK各处理组均能明显抑制B16-F10细胞的增殖(P 0.05或P 0.01),其趋势呈浓度和时间依赖性。Annexin V-FITC/PI检测发现EOK可诱导B16-F10细胞凋亡,免疫印迹法也显示EOK可使B16-F10细胞NF-кB P65及其磷酸化的蛋白表达量明显降低,Cleaved-caspase 3的蛋白表达量增加,Bax/Bcl-2比值增大。结果表明,EOK可诱导B16-F10细胞凋亡,其机制与抑制胞内NF-кB P65蛋白表达,降低其磷酸化水平,激活Bcl-2/Bax/caspase 3信号通路有关。 相似文献
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以纯果胶得率为评价指标,在超声(功率为250 W)预处理30 min后,分别考察提取溶剂、初始pH值、料液比、提取温度及时间等因素对纯果胶得率的影响。在此基础上,采用正交试验优化黄皮果胶的制备工艺,并分析以黄皮果胶理化性质。结果表明,制备黄皮果胶的最佳工艺条件为以盐酸(0.01 mol/L)为提取溶剂,提取温度90 ℃、液料比为20∶1(mL∶g)、初始pH值为2.0,提取时间120 min。该优化提取工艺条件下,黄皮果胶得率为6.84%,半乳糖醛酸含量为76.51%,且各项理化指标均达到国家标准GB 25533—2010《食品添加剂果胶》要求。 相似文献
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