不同发酵条件下红曲霉产Monacolin K的沙棘籽粕发酵菌质的特征性成分研究

以Monacolin K含量和菌丝的生长速度为指标,以红曲霉为发酵菌种,以沙棘籽粕为基质,探究不同固体发酵条件对菌丝生长速度、Monacolin K含量以及对发酵菌质中水溶性和醇溶性活性成分含量的影响。结果表明:燕麦米为所考察范围内的最优辅料;随着燕麦米所占比例的增大,Monacolin K的含量呈上升趋势,由最初的(32.77±12.83)μg/g DW升高至(2 972.18±15.66)μg/g DW,生长速度有先上升后降低的趋势;最优含水量为60%,生长速度最高,为(0.42±0.04)cm/d,Monacolin K的积累量也达到最高,为(1 836.88±17.73)μg/g DW;随着发酵时间的延长,Monacolin K的含量逐渐升高,并于第5天开始迅速积累,在第17天达到最高,为(2 418.53±86.20)μg/g DW;不同发酵条件下,发酵菌质中活性成分的含量与微生物的生长状态紧密相关。极端环境下,微生物的生长受到限制,使基质中的活性成分得以保留,但同时也因微生物对基质的分解作用微弱而不易被提取和检测;适宜环境下,微生物的生长状态良好,基质中的活性成分被分解消耗,但同时也因微生物本身数量的增加使最终发酵菌质中的活性成分含量升高。     

葛根水提液及葛根发酵液的体外抗氧化及抗衰老功效评价

本实验以葛根为研究对象,通过水提取法及微生物发酵法得到葛根水提液(pueraria water extracts,PWE)及葛根发酵液(pueraria fermentation broth,PFB),对其进行有效成分的提取、化学水平清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力测定以及细胞水平过氧化氢酶(catalase,CAT)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)活力、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)酶活力和I型胶原(Collagen I,COL I)含量分析。结果表明,葛根水提液、葛根发酵液中主要的活性成分为黄酮类物质,葛根水提液黄酮含量为(3.47±0.23) mg/mL,葛根发酵液黄酮含量为(4.80±0.32) mg/mL;二者均具有较为明显的DPPH自由基清除能力,葛根发酵液清除率DPPH自由基的IC_(50)为2.98 mg/mL,葛根水提液清除率DPPH自由基的IC_(50)为3.51 mg/mL,在质量浓度在2.67～4.44 mg/mL间,相同质量浓度下葛根发酵液清除DPPH的作用更为显著(p0.05);葛根水提液、葛根发酵液在0.05～5.00 mg/mL范围内,对人皮肤成纤维细胞均未表现出强烈的细胞毒性,细胞活力均在85%以上;两种样品刺激细胞后,细胞中过氧化氢酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活力显著(p0.05)增高,其中葛根水提液比葛根发酵液作用效果更为显著(p0.05),两种样品刺激细胞后,均能降低细胞内MMP-1的含量,增加细胞中I型胶原的含量,而葛根发酵液相较于葛根水提液,降低MMP-1含量及增加I型胶原含量的作用更为显著(p0.05)。综上,葛根发酵液的抗氧化性及抗衰老功效强于葛根水提液。     

沙棘粕提取物对H2O2诱导的B16F10细胞氧化损伤的保护及修复

研究了沙棘粕提取物(SBSE)对B16F10细胞氧化应激损伤的保护及修复作用。首先建立了过氧化氢(H_2O_2)诱导的B16F10细胞氧化损伤模型,完成了流式细胞术对损伤模型的评价;其次,研究了SBSE预处理对细胞防御H_2O_2诱导的氧化损伤细胞活力的影响,以及对损伤模型的修复作用;再次,比较了各SBSE处理组与模型组细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)水平。结果:H_2O_2的诱导条件为300μg/mL处理4 h,流式细胞术检测发现,H_2O_2处理4 h后活细胞百分比由(91.61±1.14)%降至(49.77±2.74)%(P0.01),早期凋亡细胞由(1.97±0.34)%升至(17.91±3.55)%(P0.01),晚期凋亡率升至(21.24±2.61)%,并且H_2O_2处理6 h的晚期凋亡细胞显著上升,晚期凋亡率在60%以上。利用H_2O_2刺激SBSE预处理后的B16F10细胞,结果发现0.10 mg/mL SBSE处理后的细胞活力显著高于模型组(P0.05),抗氧化酶活力显著提升,细胞内MDA的积累显著降低;不同浓度SBSE处理损伤模型,0.10mg/mL SBSE具有一定的修复作用(P0.05),其GSH-Px、CAT和SOD活力显著高于模型组(P0.05,P0.01,P0.01),MDA水平显著降低(P0.05)。由此可见,SBSE通过提高细胞GSH-Px、CAT和SOD的活性,降低过氧化产物MDA的含量来保护和修复H_2O_2诱导的B16F10细胞氧化损伤。     

大鲵尾部鱼油的酶法提取工艺

以人工养殖大鲵鱼尾为原料,使用碱性蛋白酶水解法提取大鲵油.在加酶量、酶解时间、pH值、温度4个单因素实验的基础上,利用正交试验法优化了提取大鲵油的工艺条件.结果表明,较佳酶法水解条件为温度50℃,时间1h,加酶量1.5％,pH值为6.所得粗大鲵油符合国家二级粗鱼油标准.粗大鲵油中共检测到16种脂肪酸,其中饱和脂肪酸占2...     

沙棘粕醇提取物对秀丽隐杆线虫的抗衰老功效及其机制

以沙棘粕为研究对象,经乙醇提取、大孔吸附树脂纯化获得沙棘粕醇提取物(sea buckthorn seed extracts,SBSE)。以秀丽隐杆线虫为模式生物,研究SBSE的抗衰老作用及其可能机制。本研究考察了不同质量浓度范围内SBSE对秀丽隐杆线虫生命周期、生殖能力和应激抵御能力的影响,探索了SBSE对线虫抗氧化酶活力以及衰老相关基因表达水平的作用,从基因水平探索SBSE的抗衰老可能机制。结果:SBSE可以显著延长秀丽隐杆线虫的存活时间(P0.05),减轻脂褐素水平的积累;0.05 mg/mL SBSE处理后秀丽隐杆线虫子代数量为(246.40±21.11)个,显著高于空白对照组的(205.80±20.42)个(P0.05);对热应激和氧化应激有显著的防御效果(P0.05);此外,SBSE提高了秀丽隐杆线虫体内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活力,降低了秀丽隐杆线虫促衰老基因age-1、daf-2的表达水平,提高了抗衰老基因sir-2.1的表达。该结果表明SBSE或许通过提高抗氧化酶活力以及改变衰老相关基因的表达水平来发挥抗衰老的功效。     

纤溶豆豉的制备及其对小鼠溶栓效果的评价

利用动物血栓模型,饲喂纤溶豆豉来研究其在动物体内的溶栓作用。通过小鼠腰背部皮下注射10mg/mL角叉菜胶溶液诱发小鼠尾静脉形成血栓,实验组A饲喂豆豉纤溶豆豉并自由饮用纤溶豆豉提取液,对照组B(模型小鼠)、对照组C(正常小鼠)分别饲喂全价营养鼠粮,并自由饮水。结果表明:各组小鼠生长情况良好;饲喂纤溶豆豉的实验组A小鼠体质量先降低后增高,饲喂5d以后尾部形成的血栓长度逐渐变短,10d时凝血酶原时间、凝血酶时间稍有延长,但差异不显著,15d后凝血酶原时间、凝血酶时间均明显延长(P<0.05),血浆中纤维蛋白原(FIB)含量相应降低,D-二聚体在饲喂10d后呈阳性;而饲喂全价营养鼠粮的对照组B及注射生理盐水的对照组C,其P T、T T差异均不显著。因此食用纤溶豆豉能激活机体纤溶系统,抑制凝血系统作用,有助于预防和辅助治疗血栓性疾病。     

响应面法优化燕麦麸蛋白的挤压提取工艺

利用响应面法优化燕麦麸蛋白的挤压提取工艺条件.在单因素试验基础上,选择挤压温度、螺杆转速、水分含量和柠檬酸含量为自变量,以燕麦麸蛋白提取率为响应值,采用Box-Behnken试验设计方法,研究各自变量及其交互作用对燕麦麸蛋白提取率的影响.利用响应面分析确定挤压提取燕麦麸蛋白的最优工艺参数为,挤压温度199℃、螺杆转速7 r/min、水分含量59％、柠檬酸含量1.3％,在此条件下,蛋白提取率为13.51 mg/g.验证实验表明,所得模型方程能较好地预测实验结果.     

沙棘粕醇提取物对小鼠氧化应激损伤的保护作用及机制

研究沙棘粕醇提取物(SBSE)对小鼠氧化应激损伤的保护作用。首先建立D-半乳糖诱导的小鼠氧化应激损伤模型。用不同浓度SBSE灌胃小鼠模型,42 d后,比较各组小鼠肝脏、脑组织中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)和脂褐素(LP)水平,测定小鼠血清中白介素-2(IL-2)和白介素-6(IL-6)含量,并探究SBSE对肝脏组织抗氧化相关基因表达水平的影响,从基因水平探索SBSE对氧化应激损伤的保护机制。结果:与模型组相比,灌胃一定剂量SBSE可以提高小鼠肝脏和脑组织中GSH-Px、SOD和CAT活力;低剂量组(SBSE-L组)小鼠肝脏、脑组织中的TAOC水平显著高于模型组(P0.01,P0.05);3种灌胃剂量小鼠的肝脏和脑组织LP和MDA含量均显著低于模型组(P0.05);中剂量组(SBSE-M组)小鼠血清IL-2和IL-6水平显著高于模型组(P0.05);对抗氧化相关基因mRNA表达情况进行分析,SBSE可能与Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)-核因子相关因子(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路密切相关,SBSE可以下调Keap1,上调Nrf2的表达,使下游抗氧化基因HO-1和HQO1的表达量上升。     

玫瑰花及花渣中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性研究

以玫瑰花为对照,以提取精油后的玫瑰花渣为原料,对其中的黄酮类物质进行乙醇提取,同时在单因素实验的基础上通过正交实验得到最优提取工艺,并对粗提物冻干粉进行抗氧化活性分析。实验结果:玫瑰花和花渣中黄酮最优提取工艺均为乙醇浓度为45%、液料比(g/g)为60∶1、提取温度30℃、提取时间30min,提取率分别为(4.71±0.07)mg/g和(2.31±0.08)mg/g。将所得黄酮冻干粉分别进行羟自由基、ABTS+自由基和DPPH自由基清除实验,分析得到IC50,结果发现玫瑰花黄酮和玫瑰花渣黄酮冻干粉对三种自由基均具有清除能力,三种自由基清除能力的排列顺序为羟自由基ABTS+自由基DPPH自由基。     

细胞水平评价沙棘粕醇提物的抗衰老功效

本实验以沙棘粕为研究对象,提取得到沙棘粕醇提物(sea buckthorn seed extracts,SBSE),对SBSE进行极性部位划分,得到乙酸乙酯层和萃余水层;对划分部分及SBSE(下称"粗提物")进行活性成分分析、化学水平自由基清除能力测定以及细胞水平过氧化氢酶活力、活性氧含量、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)含量和Ⅰ型胶原含量分析。结果表明,粗提物、乙酸乙酯层和萃余水层主要活性成分均为黄酮类、原花青素类和总酚,三者均具有较为显著的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力,乙酸乙酯层和萃余水层对羟自由基(·OH)的清除能力显著,粗提物未表现出对·OH的清除效果;3种样品在0.05~5.00 mg/mL范围内,对人皮肤成纤维细胞均未表现出强烈的细胞毒性,细胞活力均在80%以上;3种样品刺激细胞后,其过氧化氢酶活力显著升高,除0.5 mg/mL萃余水层外,其余样品作用后细胞中活性氧水平高度显著降低(P0.001),其中,粗提物比乙酸乙酯层和萃余水层具有更为优越的促进过氧化氢酶活性和抑制活性氧产生的能力;并且,3种样品特别是粗提物可以显著降低人皮肤成纤维细胞中MMP-1的含量(P0.05),其细胞中Ⅰ型胶原含量也最高。由结果可知,SBSE具有潜在的抗衰老功效。