抗甲胎蛋白聚苯乙烯磁珠的制备

在磁流体存在下,进行苯乙烯-丙烯酸-马来酸酐-二乙烯基苯的共聚合,合成出粒径介于500～625nm、表面光滑、单分散的球形聚苯乙烯磁珠;磁珠耐酸碱,在浓度为1mol/L盐酸或氢氧化钠及氯化钠溶液中不凝集;控制丙烯酸用量可使磁珠表面羧基量达4 5mg/g。物理吸附法致敏磁珠的最佳条件为:包被用甲胎蛋白(AFP)抗体最适稀释度为:V(AFP抗体)∶V(磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液)=1∶200,最适pH=7 0,温度37℃,作用时间1h。     

磁性导向柔红霉素白蛋白微球的研究

:采用乳化交联技术将磁性超微粒子及柔红霉素包埋于白蛋白内 ,化学交联固化后制得柔红霉素磁性白蛋白微球。该微球呈球形 ,平均粒径为 2 32 μm ,大小分布均匀 ,在 0 0 5T磁场中具强磁响应性 ,在水中分散性好。磁性微球载药量为 11 2 6 % (mg/mg) ,包封率为 75 0 % ;临界相对湿度CRH =81 6 %。含药微球在体外 12h释放完全 ,具一定的缓释作用。体内外磁定位实验表明 ,DNR磁性白蛋白微球制剂可浓集于靶区。稳定性考察表明所制微球稳定性良好。     

磁性琼脂糖复合微球固定化纤维素酶的研究

以磁性琼脂糖复合微球为载体,采用物理吸附法,制备出磁性固定化纤维素酶。确定了固定化工艺条件：ｐＨ２－２,吸附时间８ ｈ,酶用量为１５０ ｍｇ／ｇ 微球,在最佳固定化条件下,磁性固定化酶的活力为１９１－７ Ｕ／ｇ 微球,蛋白载量为１００ ｍｇ／ｇ 微球,比活为１－９ Ｕ／ｍｇ 蛋白,活性回收率为７３－１ ％ 。并对磁性固定化酶的理化性质进行了研究：磁性固定化酶的最适温度（５５ ℃） 与天然酶相同,最适ｐＨ（５－０）较天然酶提高１－０ 个单位,磁性固定化酶Ｋｍ 值（４－１×１０ －３ｇ／Ｌ）较天然酶Ｋｍ值（７－８×１０－３ ｇ／Ｌ） 小,热稳定性较天然酶有所提高,磁性固定化酶重复使用１０ 次,其相对活性保持在６０ ％ 。     

磁性靶向顺铂白蛋白微球的研究

将顺铂和磁性氧化铁共包于白蛋白中而制成了磁性靶向顺铂白蛋白微球。按正交设计筛选最佳合成工艺为：顺铂用量为４０ｍｇ,白蛋白用量为２５０ｍｇ,ＦｅＣｌ２用量为２８２．８ｍｇ,ｐＨ＝１０。并以微球进行了质量考察：微球平均粒径为２．８９±０．５１μｍ,磁性靶向顺铂微球的载药量为１３．６４％（ｍｇ／ｍｇ）,包裹率为８５．２４％;含药微球在体外１２ｈ释放完全,具一定的缓释作用;稳定性考察表明所制微球稳定性良好。     

靶向性药物载体-磁性淀粉微球的制备及性质

采用乳化复合技术制备出粒径为（50－375）mm、分散系数为0．2736、Fe3O4质量分数为38％的具有磁核的淀粉复合微球。微球呈蛛形,表面光滑,在水中可形成稳定的分散液,在0．05T弱磁场中具有强磁响应性。制备微球的最佳条件是：淀粉用量为（95．7－178．5）g/l,氯化亚铁用量为（17．79－88．96）g/l,pH＞9．7。     

绿豆胚超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

采用盐析、有机溶剂沉淀及ＤＥＡＥ－ ５２ 柱层析的方法,提纯了绿豆胚超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 。纯酶总活力８００６ Ｕ,总蛋白量为７－３ ｍｇ,比活力为１０９６－８ Ｕ／ｍｇ 蛋白,纯化６４５－２ 倍,活性回收率为４４－２％ 。对其理化性质分析表明：该酶的最大紫外吸收峰为２６０ ｎｍ ,为Ｃｕ、Ｚｎ ＳＯＤ,由２ 个亚基组成,亚基相对分子质量为１５０００。     

单分散性大粒径磁性复合微球的制备和表征

把聚乙二醇(PEG)和十二烷基磺酸钠(SDS)包裹的自制纳米Fe3O4磁流体加入到分散聚合体系,制备出粒径300～500μm的聚(苯乙烯-二乙烯基苯-甲基丙烯酸)磁性高分子微球并用光学显微镜、红外光谱(FT-IR)、X射线粉末衍射仪(XRD)、振动样品磁强计(VSM)以及热重分析仪(TG)等对其表征。结果表明,其粒径分布均匀,表面光滑且含有羧基,室温比饱和磁化强度达到3.63A·m2/kg,磁流体的包裹率随磁流体用量的增加而增加,最高达到17.07%。     

磁性淀粉微球固定化乙酰乳酸脱羧酶及应用

采用复合技术制备出粒径为 １００～３００ｎｍ的磁性淀粉复合微球。以此为载体采用溴化氰共价结合法、戌二醛交联法、物理吸附法固定化ａ一乙酰乳酸脱羧酶。以戌二醛交联法制备的磁性酶为最佳，其活力为１１３８．８Ｕ／ｇ微球，蛋白载量为８９．７ｍｇ／ｇ微球，比活为１２．６Ｕ／ｍｇ蛋白，活性回收率为５９．６％。并对其理化性质进行了研究：磁性酶最适温度３０℃，最适ｐＨ为５．０，热稳定性及酸碱稳定性均有所提高，磁性酶重复使用１０次，其相对活性仍保持在７７．２％。将磁性固定化ＡＬＤＣ用于啤酒发酵，磁性酶用量为 ８０Ｕ／Ｌ麦芽汁，主发酵温度为 １３℃，保持 １０ｄ，发酵后双乙酰含量降到 ０．１３×１０－６以下。     

SMA基PVDF微孔膜生物相容性研究

以超临界CO2(SCCO2)为分散介质,在聚偏氟乙烯(PVDF)微孔膜上进行马来酸酐和苯乙烯的接枝共聚,合成出超高相对分子质量(Mw=8.4×106)的苯乙烯/马来酸酐交替共聚物(SMA)基微孔PVDF膜。吸附实验表明,接枝率增大,接枝膜对蛋白吸附减少,抗污染性增强;细胞迁移实验中,接枝膜上细胞迁移范围及数量远高于原膜,生物相容性好;细胞粘附实验说明,接枝膜有助于细胞的粘附生长;细胞活性实验显示,细胞在接枝膜表面经3d培养后的乳酸脱氢酶活力低于4.5U/mL,说明接枝膜无细胞毒性;接枝膜动物急性实验中,未出现小白鼠死亡、瘫痪和呼吸困难等中毒现象。因此,接枝膜作为血液透析膜材料具有潜在应用前景。     

肝癌血清甲胎蛋白免疫磁珠酶联免疫法的建立

采用戊二醛两步交联法将辣根过氧化物酶(HRP)结合于甲胎蛋白(AFP)抗体上制成酶标AFP抗体,质量鉴定结果表明其比活性为200 U/mg,抗体效价为1∶256,满足酶联免疫吸附测定法(ELISA)要求;通过滴定法确定酶标AFP抗体的最适工作稀释度为V(酶标抗体)∶V(磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液)=1∶160;血清用量及孵育时间的影响实验表明:血清100μL、孵育时间2 h为最佳测定条件。建立了肝癌患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的规范化检测程序。初步应用实验显示:免疫磁珠ELISA法测定受试健康组血清AFP值平均为3.9 ng/mL,肝癌组血清AFP值平均为316.7 ng/mL,对肝癌诊断阳性率为72.0%。批内及批间CV值分别为5.05%和8.20%。该项技术有较高的灵敏度和很好的特异性,操作简便、分离快速,适用于肝癌的初期快速诊断。