基于纳米金/硫堇修饰金电极的脱落酸安培免疫传感器的研制

提出了一种基于纳米金/硫堇修饰金电极的ABA安培免疫传感器。该传感器基于H2O2-HRP-硫堇催化波体系构建,其中硫堇为传感介质。当HRP存在时,通过加入H2O2,硫堇的还原电流大幅增加,并且电流的增加依赖于HRP活性。HRP活性又由ABA与HRP酶标抗体结合物调控,产生一个减小的催化波。用BSA封闭硫堇单分子层修饰后可能存在的活性位点以避免非特异性吸附。优化了测定条件,包括酶标抗体和硫堇的最佳比例、培育时间、缓冲液的pH值和H2O2浓度。此传感器的还原电流在ABA浓度0.5~1000ng/mL范围内呈线性下降,回归方程为y=0.0209x 17.071,相关系数为0.9922,检测限为0.2ng/mL。     

基于水利建设砌石工程施工工艺探讨

在承担水利建设砌石工程中,首先要按工程规模备好石料和碎石、砂料,砌体石料必须质地坚硬、新鲜,不得有剥落或裂纹,规格尺寸、重量符合技术要求。对其施工顺序工艺作了阐述。     

双基因敲除减毒单增李斯特菌(ΔactA/ΔinlB)的构建及其生物学初步鉴定

减毒单增李斯特菌具有成为疫苗活载体的潜力,可同时引起MHCⅠ和MHCⅡ类抗原递呈系统,具有强烈激发CD8+和CD4+细胞免疫的能力。构建毒力基因缺失菌株进而评估其生物活性对于其作为疫苗活载体的开发尤为重要。本文采用同源重组技术构建单缺失菌株Lm-△act A和双缺失菌株Lm-△act A△/inl B,从生长状态、毒力基因表达和对Hep G2细胞侵袭能力方面探讨减毒菌株生物学特性。生长活性测定显示两种减毒菌株和野生型Lm(EGD-e)三者生长状况无差异;实时定量PCR结果显示act A基因缺失后,inl A基因表达水平上升两倍;act A和inl B基因双缺失后,plc B和hly基因的表达水平都有较大幅度的上升;侵袭Hep G2细胞结果显示act A基因缺失后侵袭能力增强、act A和inl B基因共同缺失后侵袭能力减弱。因此,减毒菌株的构建及其生物特性研究不仅对食源性致病菌Lm致病机理具有重要意义,也为构建预防人类和动物疫病的疫苗载体奠定了基础。     

实验室中食品微生物检验质量控制的探讨

食品质量关乎着国计民生,影响着人民的生活质量和身体健康。为了保证食品安全,必须要对食品进行安全质量的检查,并且在检查中要尤其注重对食品微生物的检验。因为食品中含有的微生物种类多、成分复杂、结构多样,并且微生物检验涉及到各个环节和程序,因此对食品微生物的检验是保证食品安全的关键环节。     

HACCP在湖南卤肉制品生产中的应用

针对湖南卤肉制品生产中工艺步骤,采用HACCP体系进行管理,确立关键控制点、关键限值以及有效监测方法.实施HACCP体系管理后,卤肉制品产品合格率显著性提高.此体系以期为相关卤肉制品企业的安全生产提供示范.     

实时荧光等温扩增法检测4种常见食源性致病菌

目的建立实时荧光等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌4种常见食源性致病菌的分析方法。方法根据4种致病菌特异性基因合成LAMP引物,在反应前加入荧光染料,在63℃条件下反应45 min;反应结果可以根据扩增曲线变化直接判断。并通过在实际样品中添加标准菌株菌液,测定了其在增菌0、6、24 h的检测灵敏度。结果金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌等基因组DNA的LAMP检测灵敏度为1 pg,副溶血性弧菌的检测灵敏度为10 pg;在样品加标实验中,其灵敏度在6 h分别可达到101、100、100、102 CFU/mL。结论该方法用于食源性致病菌的快速检测,具有可实时监控反应过程、反应快速,灵敏度和特异性高等优点,适合于基层食品安全监管领域现场快速检测。     

液相色谱—串联质谱同时检测肉类中11种鼠药残留

目的：建立同时测定肉类中11种鼠药残留的液相色谱—串联质谱法。方法：样品经乙腈提取,QuEChERs萃取盐包净化,采用液相色谱—串联质谱仪对肉类中11种鼠药残留进行定性定量分析。流动相为甲醇—0.05 mol/L乙酸铵水溶液,采用电喷雾电离,正离子扫描及多反应监测（MRM）模式,采用外标法进行定量分析。结果：标准溶液在0.2~100.0 μg/L范围内呈线性关系,相关系数＞0.99,方法定量限为0.1 μg/kg,回收率为60.2%~119.3%,相对标准偏差＜20%。结论：该方法适用于肉及肉制品中鼠药残留的检测。     

液相色谱—串联质谱法测定蜂蜜中4种喹诺酮类药物残留量的不确定度评定

目的：对液相色谱—串联质谱法测定蜂蜜中4种喹诺酮类药物残留量进行不确定度评定。方法：根据GB 31657.2—2021规定的方法建立数学模型,分析不确定度来源,并评定各标准不确定度的分量。结果：蜂蜜中恩诺沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、环丙沙星残留量测量结果不确定度分别为（4.97±0.81）,（10.13±1.58）,（7.67±1.23）,（14.97±2.25） μg/kg（P=95%,k=2）。结论：试验测量不确定度的主要来源为标准溶液配制与稀释过程和标准曲线拟合,在实际工作中应加以控制。     

高效液相色谱法检测糖浆剂药品中爱德万甜不确定度评定

目的:对高效液相色谱法测定糖浆剂药品中添加人工合成甜味剂爱德万甜含量的不确定度进行评定。方法:样品经溶剂稀释,用高效液相色谱法测定样品中爱德万甜含量,全面分析对照品溶液制备、曲线拟合、样品称量、样品定容、仪器精密度等不确定度影响因素,合成不确定度各分量,并计算扩展不确定度。结果:扩展不确定度为1.8 μg/mL,从大到小各影响因素为样品重复测定、标准曲线拟合、标准溶液配制、样品溶液配制。结论:试验建立的不确定度评定方法准确、可靠,真实反映了不确定度的来源和大小。     

高效液相色谱法检测药品糖浆剂中4种人工合成甜味剂

目的：建立高效液相色谱法同时测定糖浆剂药品中安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜、爱德万甜4种人工合成甜味剂。方法：以乙腈为流动相A,以0.02 mol/L磷酸二氢铵(用三乙胺调节pH值至5.5)为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为35 ℃,检测波长为214 nm,进样量为10 μL,色谱柱为Shiseido AQ-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm);用建立的方法测定21家生产企业共45批次小儿止咳糖浆样品。结果：4种甜味剂在2~100 mg/L 范围内线性关系良好,安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜、爱德万甜平均回收率分别为98.65%,104.09%,100.96%,102.30%,RSD均小于2%(n=9);实际样品检测结果显示3批次样品被检出爱德万甜,2批次样品被检出阿斯巴甜和爱德万甜。结论：所建立的方法专属性强,简单可靠,可用于糖浆剂药品非法添加人工合成甜味剂的监测。