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1.
目的:为实现人源溶血磷脂酶D(LysoPLD)的原核异源可溶性表达。方法:通过NCBI检索,确定人源LysoPLD基因序列(GenBank: L46720.1)。采用密码子优化后的序列,克隆至pET-28a表达载体中,采用共表达麦芽糖结合蛋白融合标签(MBP)和共表达促蛋白正确折叠分子伴侣触发因子Trigger factor(tig)两种方式提高LysoPLD蛋白在大肠杆菌中的异源可溶性表达,建立对应蛋白的纯化工艺包括离子柱纯化,硫酸铵盐析,疏水柱纯化,淀粉树脂柱(Amylose Resin)纯化,分离纯化获得的重组酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定蛋白纯度,以对羟基棕榈酸酯为底物对比两种蛋白的酶学性质。结果:成功构建载体pET28a-MBP-LysoPLD和pET28a-pTF16-LysoPLD,并获得工程菌BL21(DE3)-pET28a-MBP-LysoPLD和BL21(DE3)-pET28a-pTf16-LysoPLD。BL21(DE3)-pET28a-MBP-LysoPLD经0.6 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导过夜可获得上清表达的MBP-LysoPLD蛋白;BL21(DE3)-pET28a-pTf16-LysoPLD在含有0.5 μg/mL L-Arabinose的LB培养基中培养,经0.1 mmol/L IPTG低温诱导表达,可获得可溶性表达的LysoPLD蛋白,经纯化,酶纯度可大于80%。以对羟基棕榈酸酯为底物,对比两种方法得到的蛋白的酶学性质,发现二者催化反应的最适温度、最适pH、最适Ca2+浓度、比酶活基本一致。结论:两种基因共表达方式都可实现人源LysoPLD的在大肠杆菌中的可溶性表达,且酶学性质基本相同。 相似文献
2.
3.
以糖精废水中的铁为铁源,采用水热合成技术,利用硫酸镍与之反应合成纳米NiFe_2O_4,实现了糖精废水中铁的回收利用。以磁性纳米材料中NiFe_2O_4的含量为评价标准,采用响应面法探究了共沉淀pH、水热合成时间、反应温度和原料物质的量比[n(Fe~(3+))/n(Ni~(2+))]对产品中NiFe_2O_4含量的影响,得出最优合成条件:共沉淀pH=9;水热合成时间为12 h;水热合成温度为150℃,n(Fe~(3+))/n(Ni~(2+))=2∶1。在最优条件下合成的产品NiFe_2O_4质量分数为98%,糖精废水中铁资源回收率为95%。采用XRD、SEM和VSM等手段表征了NiFe_2O_4的结构与性能。该方法在高效回收了糖精废水中的铁资源的同时,又制备得到了具有吸附和催化潜力的NiFe_2O_4纳米材料,具有良好的经济效益和社会效益。 相似文献
4.
在被控对象表现出大滞后、干扰频繁的控制系统中,为了使控制及时,且衡量控制效果的性能指标理想,控制系统中通常引入"补偿控制器"。本文在补偿控制的基本概念的基础上,结合前馈控制系统和反馈控制系统的基本原理,系统分析了前馈-反馈控制系统的实现原理及其所具备的优势。通过MATLAB/Simulink仿真,深化了对前馈-反馈控制系统的理解,并基于MATLAB/Simulink完成了PID控制器参数的工程整定,使控制系统的设计变得简单、易行。 相似文献
5.
针对传统数据关联挖掘过程只适用于单段数据集,导致内存负担重、挖掘频繁项集效率不高等问题,提出一种多段支持度数据频繁模式关联规则挖掘方法.运用多支持度算法对数据集逐步搜索,数据集按照数据项的MIS大小有序排列,采用最小值作为最小支持度,确保该算法的地推性.构建FP_ tree树,利用FP_tree算法对待选项实施剪枝,从而准确挖掘出频繁模式的关联规则.仿真结果证明,多段支持度数据频繁模式关联规则挖掘具有较好的性能,有效提高了关联规则的挖掘效率. 相似文献
6.
7.
8.
锁相放大技术(LIA)是提取微弱信号的重要方法之一,广泛应用于近红外光谱测量领域。基于光谱吸收原理设计的甲烷检测系统,利用移相技术,实现了通过调节偏置电压的大小控制测量信号与参考信号之间的相位差,通过平衡调制解调器AD630实现了相敏滤波功能,有效地抑制了干扰,提高了系统的性能。结果表明:LIA相关器输出电压与甲烷气体体积分数呈线性关系,其线性度拟合系数为0.998 5,灵敏度为0.045 7 V/%。 相似文献
9.
用恒电位阶跃法研究了低温下AB5型储氢合金中的氢扩散行为。研究表明,低温下放电深度为50%的AB5储氢合金中,氢扩散系数受阶跃幅值的影响不大,且随着温度的降低而减小,其数量级约为10-8,这是AB5储氢合金低温高倍率放电性能差的原因之一。 相似文献
10.
本文提出了饮用天然苏打水的概念、界限值指标重碳酸钠、钠离子、重碳酸根离子、pI{值的数值范围及其依据。 相似文献