响应面优化金枪鱼骨胶原肽提取工艺

为提高金枪鱼加工副产物鱼骨的附加值,采用酶解法制备鱼骨胶原肽。以水解度为主要优化指标,筛选最佳用酶,并通过单因素和响应面试验优化酶添加量、酶解时间、料液比、温度及pH值工艺条件。结果表明,当金枪鱼骨胶原肽的酶解条件为酶添加量2.5%、酶解时间8h、料液比0.09∶1（g/mL）、温度53℃、pH7.0时,实际测定水解度为65.43%。     

虾肽对MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的:从红虾副产物中提取虾肽,研究其促MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化及矿化的活性。方法:用MTT法检测不同浓度虾肽对MC3T3-E1成骨细胞存活率的影响;诱导成骨细胞分化,在3 d和7 d时,测定其碱性磷酸酶(ALP)活性,在7 d和14 d时,测定其细胞骨钙素(OCN)及I型胶原蛋白(COL-I)含量,21 d时茜素红染色测定细胞诱导培养矿化程度;采用qPCR和Western blot方法检测虾肽对OPG/RANKL/RANK信号通路中骨形成关键基因和蛋白OPG、RANKL以及RUNX2表达的影响。结果:虾肽质量浓度为0.02,0.05,0.1 mg/mL时,显著促进MC3T3-E1细胞的增殖;ALP、OCN及COL-I的含量相较于对照组均增加,矿化结节面积显著增大(P < 0.05);此外,虾肽上调了ALP、OCN、COL-I基因的表达,促进OPG和RUNX2基因及蛋白表达的水平,抑制RANKL基因及蛋白表达的水平。结论:虾肽能促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化与矿化,激活OPG/RANKL/RANK信号通路,从而促进成骨细胞的分化及骨形成。     

4-HR与抗坏血酸对中华管鞭虾多酚氧化酶的抑制动力学模拟分析

研究无硫复合抑制剂主要作用成分4-己基间苯二酚（4-hexylresorcinol,4-HR）、抗坏血酸对中华管鞭虾多酚氧化酶（polyphenoloxidase,PPO）活性的抑制作用,并从抑制剂化学结构及动力学模型出发分析推断其抑制机理。结果表明,4-HR、抗坏血酸均能抑制PPO活力,且对酶促反应有延滞作用,两者半抑制浓度分别为0.072、2.02?mmol/L,对中华管鞭虾PPO的抑制作用都表现为竞争性抑制;化学动力学模拟分析显示4-HR、抗坏血酸均可与PPO双铜活性中心结合,其中4-HR可生成一种高稳定的多酚氧化酶络合物,持续有效地消耗PPO。4-HR、抗坏血酸均能有效抑制中华管鞭虾PPO酶促反应,其中4-HR抑制效果更显著。本实验为无硫复合抑制剂在海水虾捕捞与加工过程中的应用推广提供理论依据。     

双重LAMP技术快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法学研究

建立环介导等温扩增技术(LAMP)同时快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法。针对副溶血性弧菌tox R和霍乱弧菌omp W基因设计特异性引物,优化反应条件,建立水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检测方法,并同时应用双重LAMP技术和PCR技术对实验菌株进行副溶血性弧菌和霍乱弧菌检测,比较两种方法的特异性和灵敏度。LAMP的最佳反应温度为61℃,在此条件下,双重LAMP检测技术检测副溶血性弧菌和霍乱弧菌DNA的敏感度可达3.12 fg,且与其他常见的细菌株无交叉反应,特异性为100%;对模拟食品样品进行直接检测时检测限为50 cfu/m L;对60份水产样品进行检测时,6份样品出现LAMP及PCR阳性,而传统培养方法检测出4份阳性。实验结果表明所建立的双重LAMP技术在检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌时灵敏度、特异性高,时间成本低,适合于水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的快速检测。     

一种克服复杂载体上天线方向图畸变的新思路

：随着空间攻防技术的不断发展，宇航飞行器的外形更为多种复杂且趋于小型化，由此带来的问题是：天线边 界条件受到具有复杂结构外形的武器系统影响，方向图特性发生畸变。本文针对某小型武器型号的异形复杂壳体安装 状态下天线方向图的畸变情况进行机理分析，并提出了一种解决方向图畸变、适应小型武器系统的天线设计方法。     

鲣鱼鱼卵成分分析及其活性糖蛋白提取工艺优化

摘 要: 目的 分析鲣鱼鱼卵营养成分组成，优化鲣鱼鱼卵糖蛋白(Katsuwonus pelamis roe glycoprotein, TGP)制备工艺，并考察其对MC3T3-E1成骨细胞增殖活性的影响。方法 采用食品安全国家标准方法测定鲣鱼鱼卵基本营养成分及其氨基酸、脂肪酸和胆固醇含量；以糖蛋白得率为评价指标，采用单因素实验结合响应面法研究优化TGP制备工艺；应用细胞毒性检测试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)检测TGP对MC3T3-E1细胞增殖活性的影响。结果 鲣鱼鱼卵中水分含量(72.79±0.33) g/100 g，蛋白质含量(21.09±0.03) g/100 g，脂肪含量(3.91±0.06) g/100 g，灰分含量(1.5±0.01) g/100 g，总糖含量(0.50±0.01) g/100 g。鱼卵中氨基酸总量(727.38±8.77) mg/g，其中必需氨基酸占39.42%，鲜味氨基酸占30.68%，且谷氨酸含量最高(84.61±0.98) mg/g。鱼卵中含有17种脂肪酸，其中二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)和二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)含量合计占脂肪酸总量的41.63%；胆固醇含量(119.50±0.50) mg/100 g。优化后TGP制备条件为：NaCl 0.5 mol/L、料液比1:15 (g:mL)、提取时间5 h、超声时间42 min，该工艺下TGP得率为71.26 mg/g。TGP具有较好的促MC3T3-E1成骨细胞增殖活性。结论 本研究测定了鲣鱼鱼卵主要营养组成，优化了具有促成骨细胞增殖活性的鱼卵糖蛋白制备工艺，为鲣鱼加工副产物的综合开发利用提供了较好的理论支撑。