多重PCR方法检测食品中转基因成分

根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 3 5S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列 ,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 (FDCP) ,分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分 3 5S启动子和NOS终止子的方法 .并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测 ,发现 1 3份样品中有 6份检出3 5S启动子、NOS终止子 ,其余 7份样品的检测结果为阴性 .表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出 3 5S和NOS成分 ,其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点 ,多重荧光PCR法则更为简便、快速、准确     

PCR方法检测食品中的转基因成分35S和NOS的研究

根据转基因农作物中最常用的花椰菜叶病毒启动子（CaMV358）和根癌农杆菌终止子（NOS）的序列，设计并合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针（FDCP），分别建立了常规PCR、应用FDCP的新型实时荧光PCR检测转基因成分35S启动子和NOS终止子的方法。利用该套方法对冷冻马铃薯条、大豆、冷冻玉米棒、甜椒、番茄等实物样品进行了检测，发现11份样品中有5份检出35S启动子、NOS终止子，6份样品结果为阴性。结果表明我们建立的两种PCR方法均能有效检测出35S和NOS片段，其中常规PCR方法具有灵敏度高、特性异好的特点；应用FDCP的新型实时荧光PCR方法则更为简便、快速、准确，有很好的应用前景和研究价值。     

应用PCR-ELISA技术检测转基因产品的研究

建立并优化了转基因大豆与玉米的DNA提取,CaMV35S启动子和T－NOS终止子的序列特点设计特异性引物与探针，应用PCR－ELISA检测技术，建立了转基因大豆与玉米中常用外源基因的快速检测体系，并应用于进出境产品的转基因检测实际工作中。结果表明，建立的PCR－ELISA法具有操作简便，灵敏特异，结果准确的，可对转基因大豆，玉米及其它转基因产品进行定性和定量检测。     

转基因产品的PCR-ELISA液相杂交检测条件的研究

确定杂交液成分,选择探针浓度,将5’端标记生物素的PCR扩增产物与5’端标记地高辛的探针呈液相混合,在PCR管中按优化后的条件(92℃,5 min;55℃,5 min)进行液相杂交.杂交产物通过链霉亲和素被固定在微孔表面,同时在含高浓度二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的杂交液中将非特异结合的探针解离,然后对被固定的特异杂交产物进行ELISA检测.PCR-ELISA液相杂交检测方法操作简便,特异性高,避免了繁琐的杂交程序和对人体有害的溴化乙锭,适用于转基因产品及其加工食品的快速检测.