酶解荠蓝籽蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

为制备荠蓝籽抗氧化肽,以荠蓝籽分离蛋白为原料,碱性蛋白酶Alcalase2.4L为水解酶,综合研究了酶解pH、温度、加酶量、底物浓度和时间等因素对荠蓝蛋白的水解度及产物还原能力的影响,并采用二次通用旋转组合设计实验优化水解条件。结果表明,制备荠蓝籽抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.44,温度48.95℃,加酶量1198.96U/g蛋白,底物浓度1∶20,时间3.5h。该条件下的酶解产物具有较强的还原能力,酶解液浓度为2.997mg/mL,其还原能力与0.326mg/mL的Vc相当。      

孜然精油成分分析及超临界萃取联合分子蒸馏纯化效果研究

利用超临界联合分子蒸馏技术提取纯化孜然精油,采用GC-MS 和双柱复检法对孜然精油的挥发性成分进行定性分析,通过质谱库检索联合保留指数法分析,DB-5 柱上共鉴定出44 种组分,INNO-WAX 柱上共鉴定出39种组分,其中20 种组分在两只柱子上共同存在。以正十二烷为内标物建立了用毛细管气相色谱法同时测定孜然油中主要呈香物质(β- 蒎烯、对伞花烃、γ- 萜品烯、枯茗醛)的方法。结果表明,在所选择的色谱条件下,4 种芳香物质的峰面积与其质量浓度呈良好的线性关系,R2 均大于0.9996。经过分子蒸馏纯化后,孜然精油主要成分枯茗醛的含量由纯化前的11.48% 提高到30.30%,纯化效果理想。     

京津两地蔬菜防腐剂、保鲜剂和添加剂使用情况的调查研究

目的：了解北京和天津地区夏季蔬菜产、储、运环节中三剂（防腐剂、保鲜剂和添加剂）的使用情况。方法：2012年夏季（7、8月份）对京津两地主要蔬菜生产基地的种植户和蔬菜批发市场的销售商进行现场问询调查并随机购买蔬菜,7月份取样蔬菜有10种,8月份有17种,取样后带回实验室进行检测,分析三剂的使用情况。结果：问卷调查结果显示,京津两地蔬菜生产基地和批发市场所抽查的蔬菜没有使用三剂对蔬菜进行贮藏保鲜的情况,但分析检测发现,7、8月份使用甲醛对蔬菜进行防腐保鲜的比例分别为93．3％、89．2％,而且在蔬菜批发市场还发现有使用硫磺对胡萝卜、生姜、蒜熏色处理的现象以及使用含有仲丁胺的冰块对蔬菜贮藏保鲜,此外某些蔬菜多茵灵、哒螨灵、霜酶威残留超标较严重。结论：北京、天津两地主要蔬菜批发市场以及蔬菜生产基地存在添加使用防腐剂、保鲜剂和添加剂的情况,应引起种植者、销售者和有关部门的重视。     

平菇基因组DNA提取方法的研究

以实验室自行培育的平菇为实验材料,分别使用CTAB法、SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取平菇基因组DNA,并通过紫外分光光度计、限制性酶切及PCR检测来衡量基因组质量。结果表明,使用CTAB法很难得到高质量的基因组DNA,OD260/280仅为1.5左右,而且伴有较多的杂质,电泳条带拖尾严重;使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析,效率较低,同时PCR检测不能得到有效扩增;而使用优化后的SDS-CTAB法及高盐酶解法提取平菇DNA,能够获得质量高、纯度好的基因组DNA,OD260/280基本保持在1.8～2.0之间,电泳条带较为清晰均一,使用EcoRI限制性酶对其进行酶切分析,酶切效果较好,并且DNA质量能够满足PCR检测的模板要求。说明SDS-CTAB法以及高盐酶解法提取的平菇DNA能够满足分子水平操作的要求,两者相比,前者成本较低,后者产率较高。      

玫瑰果营养成分分析

对从荷兰引种的玫瑰果的营养成分进行分析并对红(R.rugosa Rubra)、白(R.rugosa Alba)2个品种玫瑰果的营养成分进行比较。结果表明,红玫瑰果的营养价值高于白玫瑰果,其中,红玫瑰果肉中VC的含量高达711.9 mg/100 g;矿物元素含量丰富,特别是含有营养价值较高的硒;黄酮类物质和β-胡萝卜素含量也较高,分别为690.5 mg/100 g和19.86 mg/100 g。果籽中脂肪酸以不饱和脂肪酸为主,其中亚油酸和亚麻酸含量高达50.10%和29.77%。因此,玫瑰果具有较高的营养价值和保健作用,具有较大的开发潜力。     

高效液相色谱-串联质谱法测定杂粮豆类中11种真菌毒素

利用高效液相色谱-串联质谱建立杂粮豆类中11种真菌毒素（包括黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、赭曲霉毒素A、T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、伏马毒素B1、B2和B3、玉米赤霉烯酮）同时检测的方法。实验对提取溶剂、提取时间和净化方式等进行优化,建立双体系联合提取方法,首先采用甲醇-水（70∶30,V/V）体系提取,再以乙腈-水（84∶16,V/V）体系二次提取,提取时间3 min,在此基础上采用C18吸附剂进行净化处理。结果表明,11种毒素的线性范围良好,相关系数大于0.999,添加回收率为70.0%～108%,相对标准偏差为1.3%～8.6%。所建方法简单、快速、灵敏度高、重复性好,可满足杂粮豆类中11 种真菌毒素的同时检测需要。     

转基因玉米的多重PCR－毛细管电泳紫外检测技术研究

建立了转基因玉米Ly038、Mon863和Mon810的品系特异性基因多重PCR产物的毛细管电泳-紫外检测方法。根据三种转基因玉米的基因序列设计多重PCR引物,优化PCR扩增体系和条件,以8.0g/L羟乙基纤维素为筛分介质,用毛细管电泳-紫外检测法同时检测出三种玉米的品系特异性基因,11.195min内即可完成检测。用Origin软件对电泳结果进行分析并得出不同范围的DNA曲线方程,样品出峰时间的相对误差在1.03%～5.02%之间。并对纯化前后的样品进行了毛细管电泳分离的对照,发现PCR产物纯化后更适于紫外检测的毛细管电泳。多重PCR具有节约模板、节省试剂和缩短检测时间的优点,毛细管相对于传统的琼脂糖凝胶电泳,具有高效、快速、灵敏且经济环保的优点,所以此方法可广泛地应用于食品安全检测和临床检验等领域中。     

孜然油树脂及其主要成分的体外抗氧化活性比较及动力学分析

采用β-胡萝卜素—亚油酸法对孜然油树脂及其主要成分的体外抗氧化活性进行测定,通过IC50值（各物质抗氧化活性达到50%的浓度值）及动力学反应速率对其抗氧化能力进行综合评价,并与2,6-二叔丁基对甲酚（BHT）进行了比较。结果表明,孜然油树脂、β-蒎烯、p-对伞花烃、γ-萜品烯、枯茗醛等都表现出不同程度的抗氧化能力,但对β-胡萝卜素的氧化抑制作用小于BHT;抗氧化活性排序为γ-萜品烯〉孜然油树脂〉枯茗醛〉β-蒎烯〉p-对伞花烃,说明γ-萜品烯是孜然油树脂中的最有效的抗氧化活性组分之一,其IC50值为（0.73±0.07）mg/mL,动力学反应速率Rγ=-0.0168。     

SDS-PAGE-薄层扫描联用法测定3种不同来源的乳铁蛋白

目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离乳清蛋白,薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化,电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/mL、分离电压100V、上样量5μL、染色3h、脱色2h;薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式,Y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果:可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白;乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%,同板精密度RSD值为3.1003%和1.8151%,在100～2000μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9988和0.9990。结论:此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。     

酶解荠蓝籽蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

为制备荠蓝籽抗氧化肽,以荠蓝籽分离蛋白为原料,碱性蛋白酶Alealase 2.4L为水解酶,综合研究了酶解pH、温度、加酶量、底物浓度和时问等因素对荠蓝蛋白的水解度及产物还原能力的影响,并采用二次通用旋转组合设计实验优化水解条件.结果表明,制备荠蓝籽抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.44,温度48.95℃,加酶量1198.96U/g蛋白,底物浓度1:20,时间3.5h.该务件下的酶解产物具有较强的还原能力,酶解液浓度为2.997mg/mL,其还原能力与0.326mg/mL的Vc相当.