重组凝乳酶原在大肠杆菌中的表达及活性研究

为了提高干酪生产中起重要凝乳作用的凝乳酶的原核表达效率,分析了Genbank中牛、羊和骆驼凝乳酶原(prochymosin,pCHY)的保守序列及大肠杆菌密码子的偏爱性,合成了凝乳酶原序列,并将其克隆至大肠杆菌原核表达载体上。经IPTG的诱导得到高效表达的凝乳酶原;Western blotting检测证明了其具有免疫原性;经pH值2到6活化后成功自剪切,得到大小约36 ku的有凝乳活性的凝乳酶。研究获得较高表达水平具有凝乳活性的重组凝乳酶。     

牛凝乳酶原基因在毕赤酵母中的表达及其酶学特性的研究

凝乳酶是制造干酪的关键酶。为获得高活性的牛凝乳酶(chymosin,B-chy),用电脉冲法将线性化的pGAPZαA-B-pchy重组表达载体转化到毕赤酵母GS115中。该菌株在以葡萄糖为碳源的YPD培养基中可分泌表达牛凝乳酶原。SDS-PAGE分析表明所表达的牛凝乳酶,分子量约为37ku,符合预期大小。发酵培养96h后,酶活力达到96SU/mL。酶学特性分析表明,其最适凝乳温度为60℃,在pH2~6、小于50℃的温度范围内稳定。Ca2+浓度为40mmol/L时,钙促酶反应活性达到最高,此后随着Ca2+浓度的增加酶活力逐渐降低。金属离子Al3+、Mn2+、Fe2+、Mg2+和K+对酶活力具有显著的促进作用,而Co2+、Zn2+、Cu2+、Ni2+对酶活力具有显著的抑制作用。本研究优化了凝乳酶的表达条件,为凝乳酶工业化生产提供了理论基础。     

新疆奶酪现状及前景探讨

分别对新疆传统奶酪的种类、生产方法、酶凝奶酪和酸凝奶酪的凝乳机理、凝乳酶特性及其在新疆奶酪中的应用现状等问题进行了详细介绍,进而探讨了新疆奶酪产业的发展前景。     

浅析住宅建筑节能设计

建筑规划与设计是住宅建筑全生命周期最前沿阶段,设计的合理性直接影响了建筑节能战略的推进,因此,研究和设计舒适健康的节能住宅是时代赋予中国建筑师的使命。     

浓缩葡萄汁在红花籽油贮藏中的抗氧化效果

通过测定木纳格、无核白、美国红提、玫瑰香四种浓缩葡萄汁的清除DPPH·能力,评价了四种葡萄汁的抗氧化能力。同时研究了四种浓缩葡萄汁在红花籽油贮藏中的抗氧化效果。结果表明:四种浓缩葡萄汁的抗氧化能力强弱顺序为:美国红提>玫瑰香>无核白>木纳格。四种浓缩葡萄汁对红花籽油在贮藏中具有明显的抗氧化作用,当其添加量分别为0.05%,0.10%,0.05%,0.10%时达到最强的抗氧化效果。     

六氢β-酸环糊精包合物的抑菌活性及其稳定性

以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为供试菌,测试了六氢β-酸环糊精包合物抑菌活性及其稳定性。采用滤纸片法测定7种环糊精包合物的抑菌活性,采用2倍稀释法测定了六氢β-酸-2,6-二甲基-β-CD、六氢β-酸-2-甲基-β-CD和六氢β-酸-羟丙基-β-CD包合物的最低抑菌质量浓度,并考察了温度、p H、紫外线对上述3种包合物抑菌稳定性的影响。结果表明:7种环糊精包合物均有不同程度的抑菌活性,其中,六氢β-酸-2,6-二甲基-β-CD、六氢β-酸-2-甲基-β-CD和六氢β-酸-羟丙基-β-CD包合物抑菌效果最好,最低抑菌质量浓度均为8 mg/L。在p H6条件下,3种包合物的抑菌活性增强,在p H6条件下,其抑菌活性减弱;温度(20~120℃)和紫外线(辐照180min以内)对3种包合物抑菌活性无影响。     

哈萨克族酸奶疙瘩中两种乳杆菌的分离与鉴定

从新疆伊犁、阿勒泰和乌鲁木齐南山地区哈萨克族制作的酸奶疙瘩中,分离发酵菌种并进行了种属鉴定。共获得6株菌株A1,A2,T1,T2,H1,H2。镜检和生理生化等分析,初步确定为乳酸菌。利用16S rDNA进行的分子鉴定结果表明:A1,T1,T2,H1,H2为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),A2为香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminis)。这两种乳杆菌的分离与种类确定,对于深入研究新疆哈萨克民族传统干酪的风味、提高干酪的品质和促进干奶酪的生产奠定了理论基础。     

4种葡萄抗氧化活性比较(英文)

通过测定总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除羟自由基(.OH)能力及清除超氧阴离子自由基(O2-.)的能力,评价4种葡萄3种提取物的体外抗氧化能力。通过动物实验评价玫瑰香葡萄水提物体内抗氧化活性,同时定性、定量分析玫瑰香葡萄水提物的活性成分。结果表明:4种葡萄的同一种提取物的体外抗氧化能力显著差异。综合分析玫瑰香葡萄水提物体外抗氧化能力最强。剂量800mg/(kg.d)玫瑰香葡萄水提物能显著提高小鼠血清及肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)酶活力,降低肝脏组织中丙二醛(MDA)含量。玫瑰香葡萄水提物中含有多糖、有机酸、黄酮类、酚类等抗氧化活性物质,其中总酚含量为0.456mg/mL、总黄酮含量为4.37mg/mL。     

原核表达重组牛凝乳酶原及重组牛凝乳酶酶学特性

凝乳酶能够专一性裂解κ-酪蛋白,是制造干酪的关键酶。运用大肠杆菌表达系统对牛凝乳酶原进行了原核表达和初步纯化,活化重组凝乳酶原及测定凝乳活性,对重组凝乳酶的酶学特性进行分析。结果表明:大肠杆菌表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的66.3%,每升培养液可纯化约200 mg的重组凝乳酶原,活化后的凝乳酶活力可达600 000 SU/g。经测定凝乳酶最适作用温度为57⁶2℃,并在pH 262℃,并在pH 2⁷、低于40℃的温度范围内稳定。金属离子中Al3+,Fe3+和Cu2+能显著增强酶活;胃蛋白酶抑制剂pepstatin A对酶有明显的抑制作用。