黑果枸杞中一种花色苷类物质的分离纯化及抗氧化活性

以黑果枸杞为原料,利用?KTA?Purifier蛋白纯化系统分离纯化得到1种纯度97%以上的花色苷物质。通过质谱和核磁共振分析,鉴定该花色苷物质为矮牵牛素3-O-芸香糖(反式-香豆酰基)-5-O-葡萄糖苷(petunidin3-O-[rhamnopyranosyl-(trans-p-coumaroyl)]-5-O-(β-D-glucopyranoside))。体外抗氧化活性分析表明该花色苷物质具有显著的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力。     

工蜂采集蜂胶的行为观察及胶源植物的研究

蜂胶中大约50%成分来自植物树脂,不同地区的蜂胶具有不同的植物来源。本实验通过对工蜂采集蜂胶的行为进行观察,并运用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对加拿大杨树芽的树脂(简称加杨芽脂)、采胶工蜂后足上的树脂和蜂箱中蜂胶的多酚类成分进行分析。结果表明:加杨芽脂、工蜂后足上的树脂和蜂胶不仅在物理状态上非常接近,而且在化学成分及其相对含量上也很相似。因此,中国蜂胶的胶源植物是黑杨派中欧洲黑杨以及它的杂交品种——加拿大杨。     

鲍氏层孔菌菌丝体多糖对小鼠肝脏氧化应激损伤的保护作用

为了进一步开发和利用鲍氏层孔菌多糖资源,采用D-半乳糖所致的动物亚急性衰老损伤模型方法对鲍氏层孔菌多糖的护肝活性进行研究。结果表明,鲍氏层孔菌多糖显著提高小鼠肝脏中SOD活性、CAT活性、GSH-Px活性以及TAOC水平,显著降低肝脏中MDA含量,且呈现明显的剂量依赖关系,对小鼠肝氧化应激损伤具有保护作用,可作为保护氧化应激肝损伤的食品或药物的潜在资源。     

枸杞粉及其多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠免疫及肠道菌群的调节作用

枸杞是我国传统的药食两用资源,其鲜果喷雾干燥粉作为食品或功能食品原料被广泛应用,但其功效作用研究较少。本研究以环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）诱导免疫低下的小鼠为模型,探究枸杞粉（Lycium barbarum L. powder,LB）、枸杞多糖（Lycium barbarum L. polysaccharides,LBP）及复配物（LB＋LBP）对小鼠免疫力及肠道菌群稳态的影响。结果表明,LB、LBP及LB＋LBP均可不同程度地恢复免疫抑制小鼠的体质量和采食量,改善小鼠的脾脏、胸腺和结肠组织损伤,有效促进免疫抑制小鼠肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）和免疫球蛋白A（immunoglobulin A,IgA）的分泌,调节结肠中免疫相关基因的表达,促进短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFAs）生成,显著调节Muribaculaceae_unclassified、Muribaculum、Mucispirillum、Helicobacter、Bilophila、Clostridiales等相对丰度（P＜0.05）,逆转CTX诱导的小鼠肠道菌群代谢功能异常,并使其趋于正常。相较于LBP,LB、LB＋LBP还可降低Clostridiales相对丰度,增加有益菌Duncaniella的相对丰度,LB＋LBP还可降低厌氧菌Anaerotruncus的相对丰度。本研究结果将为枸杞精深加工产业中功效针对性健康产品研发和多元化产品开发提供理论依据。     

牛免疫球蛋白G的体外人源唾液酸化及Fc片段的制备

建立将牛免疫球蛋白G（bovine immunoglobulin G,bIgG）糖链末端N-羟乙酰神经氨酸酶切并连接人源N-乙酰神经氨酸（N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac）的方法,在实现bIgG转化为人源IgG（human IgG,hIgG）的基础上,研究hIgG可结晶（Fc）片段的制备。结果表明：以170 U/mL神经氨酸酶酶切bIgG（4.0 mg/mL）后,通过β-1,4-半乳糖基转移酶和α-2,6-唾液酸转移酶分别转移半乳糖（galactose,Gal）和Neu5Ac残基,可制备增加8.4 个Gal残基和42 个Neu5Ac残基的hIgG分子。此外,在10.0 mg/mL hIgG、m（木瓜蛋白酶）∶m（hIgG）＝0.05、10.0 mmol/L半胱氨酸激活剂、2.0 mmol/L EDTA溶液、pH 7.0条件下,酶解3 h可制得hIgG的较高纯度Fc片段,最终hIgG得率为71.7%,Fc片段得率为20.8%。本研究为bIgG的产品开发和营养价值评价提供科学依据。     

枸杞原浆品质分析与评价标准构建

本文对市售的46个枸杞原浆产品的主要成分、色泽、风味等指标进行测定,对比分析枸杞原浆产品品质,初步构建评价标准。结果表明:枸杞原浆样品总体表现出较好的枸杞营养和风味特征,但不同产品品质差异较大,pH在4.04～4.62之间,粘度在6.63～116.60 cP之间,可溶性固形物在12.77%～30.63%之间,总糖含量在93.19～220.26 mg/g之间,黄酮含量在23.43～87.27 μg/g之间,总类胡萝卜素含量在3.23～1579.47 μg/g之间,色泽总体均表现为明亮的橙红色,各样品在鲜味、酸味、涩味、咸味等八种风味特征均有响应,气味分析中差异较大的几类化合物为烷烃类、醇类和挥发性硫化物。基于主成分分析得到了各指标与主成分的相关程度和贡献程度,确立了枸杞原浆的品质评价指标,采用概率分级建立了枸杞原浆品质评价指标分级标准,利用层次分析构建枸杞原浆品质评价标准,获得各枸杞原浆样品的综合得分,为枸杞原浆品质评价及质量标准制定提供数据参考。     

产谷氨酸脱羧酶金银花内生菌的鉴定及其转化特性研究

从金银花植株茎中分离到了1株具有谷氨酸脱羧酶活性的内生细菌，1g菌体（DW）24h可将241．224μmol LGlu转化生成GABA。通过引物设计，利用PCR扩增出该菌株的16SrDNA序列，大小为1459bp。通过形态特征、生理生化特征和16SrDNA序列分析鉴定EJH-7为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）。同时基于16SrDNA构建了系统进化树，并对EJH．7进行了系统发育分析。Bacillus megaterium EJH-7细胞转化谷氨酸生成GABA的最适反应温度和pH分别为30℃和5．5；表面活性剂Tween20和Tween80对转化反应活性有抑制作用，而Triton100影响不显著；Ca^2＋、Cu^2＋和Co^2＋对转化反应活性有促进作用，分别提高了20．36％、46．61％和6．77％，而K^＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Mg^2＋和Mn^2＋有不同程度的抑制作用。     

水产蛋白酶解制备鲜味肽

以3种不同类别的水产蛋白为原料,制备具有风味提升的短肽。通过比较酶解产物的感官特点,确定m鲢鱼:m对虾:m扇贝为1:1:1;采用风味蛋白酶与复合蛋白酶双酶水解,添加两酶质量比为1:1。采用Box-Behnken设计和响应面法(RSM)优化酶解水产蛋白的工艺,以水解度和感官评分为指标,探讨酶与底物比([E]/[S])、酶解温度和酶解时间对鲜味肽的感官影响。结果表明:水产蛋白制备鲜味肽的最佳工艺为[E]/[S]7.5‰、底物质量浓度30g/100mL、自然pH值、酶解温度56℃、酶解时间5.9h。验证实验表明,该条件下水产蛋白的水解度和鲜味肽的感官评分分别为56.32%和6.8,与模型的预测值(55.17%和6.9)基本符合。酶解液超滤分离出4种组分的鲜味肽,将其分别进行Maillard反应。表明分子质量2.5～5kD鲜味肽Maillard反应后鲜味浓郁,无腥苦味。     

草莓、黑莓、蓝莓中多酚类物质及其抗氧化活性研究

研究草莓、黑莓、蓝莓3种小浆果的总酚、总黄酮、原花青素含量及其总抗氧化能力。结果表明:蓝莓全果的总酚、总黄酮、原花青素含量在所测3种浆果全果中最高,分别为9.44mg没食子酸/g干质量、36.08mg芦丁/g干质量、24.38mg儿茶素/g干质量;其总抗氧化能力也最强,达14.98mmol Trolox/100g干质量。草莓的总酚、总黄酮、原花青素含量则最低,抗氧化能力也最弱。此外,3种浆果果渣中的总酚、总黄酮、原花青素含量以及总抗氧化能力均高于全果和果汁,即果渣>全果>果汁。总酚含量、总黄酮含量以及原花青素含量与总抗氧化能力之间的相关性分析表明,总酚含量与总抗氧化能力之间存在显著线性相关,相关系数r达到0.9704,表明酚类物质是其抗氧化作用的主要物质基础。     

胰蛋白酶制备鹰嘴豆抗氧化肽的条件优化

以碱溶酸沉法制备的鹰嘴豆分离蛋白为酶解底物,以超氧阴离子自由基清除率为响应值,采用响应面法优化胰蛋白酶制备鹰嘴豆抗氧化活性肽的条件。结果表明:在整个酶解过程中,所制备的鹰嘴豆抗氧化肽具有显著的抗氧化活性,胰蛋白酶制备鹰嘴豆抗氧化肽的最佳酶解条件为:底物质量分数2%、加酶量([E]/[S])1 800 U/g、温度32℃、p H 7.0、时间35 min。此条件下所制备的鹰嘴豆抗氧化肽的超氧阴离子自由基清除率为67.59%。鹰嘴豆分离蛋白水解液经超滤膜系统纯化获得了截留相对分子质量1 k D以下的水解液,并通过液相色谱-质谱联用分析,发现了一种相对分子质量为668.40、序列为RQLPR的亲水性五肽。