呋喃唑酮代谢物抗体的制备与筛查

利用呋喃唑酮的4种代谢物合成免疫原以及包被原,用4种免疫原各免疫两只新西兰大白兔,得到8份抗血清,再纯化抗血清。采用间接ELISA方法,筛选出OD值明显高于阴性样本的血清用于以后的实验,同时对抗体的效价进行测定。实验检测结果表明,当用包被原A和包被原B包被酶标板时,7号和8号抗血清对该包被抗原有很好的亲和性,呋喃唑酮代谢物衍生物对抗体有很好的抑制。通过效价检测,7号和8号抗血清均具有高效价、高特异性的特点,其中8号抗血清的效价更高,亲和力更强。再通过进一步对两种包被原和两份抗血清进行筛查,选择B包被原和8号兔子的抗体清用于ELISA法的建立。     

沙丁胺醇药物残留酶联免疫检测法的建立及优化

本试验通过优化ELISA工作条件,建立间接竞争ELISA检测沙丁胺醇(SAL)的方法。采用方阵滴定法确定包被抗原、抗体、酶标二抗的工作浓度;以上述试验条件为基础,以系列稀释的SAL标准溶液作为检测对象,绘制标准曲线,并最终确定优化的试验方案。方阵滴定法确定包被抗原工作浓度为1:2000,抗体工作浓度为1:4000,酶标二抗工作浓度为1:6000;从标准曲线可知,线性检测范围为0.5～20 ng/mL,IC50为2.33 ng/mL;最终优化的试验方案中酶标板为深圳金灿华有限公司的产品,包被液为0.05 mol/LpH 9.6的碳酸盐缓冲液,封闭液为1%BSA+PBST,标准品用复溶液配制,抗体稀释液为1号,酶标二抗稀释液为3号,显色时间为15 min。本研究建立了一种灵敏、特异、操作简单、适于大批量样品筛选的SAL检测方法,对其他药物残留免疫学快速检测产品的研制及应用也有一定的借鉴意义。     

呋喃唑酮代谢物人工抗原的制备及鉴定

在催化剂条件下,以碳酸二甲酯和乙醇肼为原料,四氢呋喃为溶剂,合成了高收率的呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)。实验结果表明,得到的AOZ收率可达到82.7%,此时的最佳反应条件如下:催化剂用量12%,反应温度75℃,反应时间3h。随后对AOZ进行结构改造,得到AOZ半抗原衍生物,同时采用戊二醛法将AOZ及其半抗原衍生物与活化的卵血清蛋白(cOVA)和牛血清白蛋白(cBSA)交联,成功制备了免疫原和包被原;通过气相质谱联用仪(GC-MS)、元素分析、紫外分光光度计等手段对半抗原和完全抗原进行鉴定。GC-MS结果证明了AOZ的成功合成;元素分析数据表明,半抗原顺利合成;紫外扫描数据显示,半抗原与cOVA、cBSA偶联成功,免疫原I、免疫原Ⅱ的偶联比分别为16.74和24.05。     

荧光免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速检测单增李斯特菌

为建立单增李斯特菌简单快速、灵敏度高和特异性强的检测方法,本研究以抗单增李斯特菌单克隆抗体偶联磁珠制备免疫磁珠;以羧基荧光微球标记的抗单增李斯特菌多克隆抗体及鼠IgG为标记抗体,抗单增李斯特菌多克隆抗体和羊抗鼠二抗分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离与荧光免疫层析法相结合应用于单增李斯特菌的现场快速检测中。结果表明:荧光免疫层析试纸条对纯培养单增李斯特菌的检测限为4×105CFU/mL,联合检测方法10倍、100倍浓缩时,检测限分别为4×104CFU/mL和1×104CFU/mL。联合检测体系特异性较好,与实验室保存的10株细菌无交叉反应。人工污染样本检测限为1×104CFU/mL,同纯培养物相比检测灵敏度并没有降低。本方法的建立对于食品中单增李斯特菌的现场快速检测具有重要意义。     

海口市道路交通的病理及治理

本文分析了海口市道路交通存在的一些问题，提出了治理改进的具体措施。     

大肠杆菌表达包涵体蛋白体外复性研究进展

包涵体形成是大肠杆菌表达重组蛋白常见的问题.因此,为获得大量的活性蛋白而对其包涵体进行复性的研究引起了人们极大兴趣.本文综述了近年来发展起来的低分子量添加物、反胶团、分子伴侣、层析复性等新的复性方法、复性检测方法和体外复性机制.     

氦氖激光针灸治疗肾脏疾病30例临床观察

肾脏疾病是严重影响人们身体健康的常见病、多发病。对于该病,以往主要是依靠药物,配合血液透析,腹膜透析进行治疗。我室从今年开始在临床上采用氦氖激光针灸治疗肾脏疾病,收到较好的效果,现报告如下:     

沙丁胺醇多克隆抗体的制备与鉴定

为了对沙丁胺醇进行酶联免疫吸附法(ELISA)测定,通过四种方法制备沙丁胺醇衍生物,分别将其与牛血清蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,制备人工完全抗原,采用紫外分光光度法测定蛋白质浓度并计算偶联比,用所制备的四种免疫原免疫新西兰白兔获得抗沙丁胺醇(SAL)抗体,每一种抗体都用四种包被抗原进行配对筛选,据此得到最佳的抗体-包被抗原的组合,对筛选出的抗体用正辛酸-硫酸铵法进行纯化,采用间接ELISA法测定多克隆抗体(pAb)的效价并进行特异性鉴定。结果表明:成功偶联了完全抗原,四种免疫原的偶联比分别为9:1、6:1、6:1、12:1,得到最佳的抗体-包被抗原的组合,筛选出的抗体效价达到1:64000,此抗体对克伦特罗和特布他林的交叉反应率分别为144%和169%,对其他类似物几乎没有交叉反应。本研究为沙丁胺醇、克伦特罗和特布他林多残留酶联免疫检测法的建立奠定了基础。     

常用阻垢剂的耐硬度及耐碱度性能

研究了高硬度、高碱度极限水质条件下,常用阻垢对硬度、碱度的耐受性能。通过固定钙离子浓度,不断提高循环水中碱的浓度,测定阻垢剂的耐碱度;同样固定碳酸氢根的浓度,提高水质的硬度,测定阻垢剂的耐硬度性能。测试结果可以有效指导企业生产中药剂的选择和用量的控制。     

西门子1.5T磁共振成像仪故障分析及排查

本文通过分析检修siemens symphony磁共振Coil file error线圈故障,为相关西门子系列磁共振提供相关维修经验。滤波板上的D15-1出现故障,对地电阻由无穷大变为对地短接对接,线圈信号通过RFCI母板经滤波板上的D15-1到扫描床上的线圈插座1,如果D15有问题,线圈插座测试不成功,开机的过程中自检无法通过,从而报coil file error,更换D15-1后系统恢复正常。通过本次维修,可以为西门子其他磁共振出现类似情况时提供维修经验。