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目的获得高纯度的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白。方法以Vif/VR1012质粒为模板,PCR扩增出Vif-ΔN28基因并插入pRSETB质粒。将构建的原核表达载体Vif-ΔN28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,产物经Ni-NTA离子纯化柱纯化、复性。结果所表达的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白约占各自菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度均可达90%以上。结论已成功构建了Vif-ΔN28原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性的纯化的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白。 相似文献
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中药对冬虫夏草发酵的影响 总被引：7，自引：1，他引：7
研究了5味中药对冬虫夏草发酵的影响。在培养基中加入中药(焦三仙、黄芪、当归、海马、柴胡)提取液,使中药提取液总量分别占液体培养基的0、10%、15%、20%、25%、30%(v/v)。发酵后,测定冬虫夏草菌丝体的浓度;在此提取液浓度下,用正交试验法调节这些中药用量的配比,对菌丝体中的甘露醇及发酵液中的多糖含量进行测定。结果发现在中药提取液浓度为10%时,菌丝体浓度最大,是未加中药的2.6倍;不同中药用量配比的发酵液中多糖含量有很大不同,同时各味中药用量比为1∶1∶1∶1∶1时菌丝体中主要有效成分甘露醇含量最高,较对照组提高了5.92倍。因此中药对冬虫夏草的发酵有明显的作用。 相似文献
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目的 获得高纯度的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白.方法 以Vif/VR1o12质粒为模板,PCR扩增出Vif-△N28基因并插入pRSETB质粒.将构建的原核表达载体Vif-△N28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB质粒分别转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,产物经Ni-NTA离子纯化柱纯化、复性.结果 所表达的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白约占各自菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度均可达90%以上.结论 已成功构建了Vif-△N28原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性的纯化的Vif-△N28和Cullin5-N138蛋白. 相似文献
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