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HPLC在研究微杆菌D-97胞内酶合成海藻糖机制中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
微杆菌D 97胞内酶对麦芽糖的水解微弱 ,并且合成海藻糖的酶反应对磷酸盐无依赖性。采用氨基键合柱HPLC对酶作用的初始底物麦芽寡糖混合物 (Ⅰ )、酶作用 2 4h后未糖化的底物 (Ⅱ )及其糖化水解后的底物 (Ⅲ )分别进行检测对照 ,底物Ⅰ麦芽五糖占34 1 5 % ,底物Ⅱ海藻糖、三糖和五糖分别占 1 7 68%、37 63 %和 3 0 8% ,底物Ⅲ的 2种主要产物葡萄糖和海藻糖各占 77 57%、2 0 2 0 %。通过上述 3种底物二糖至六糖浓度变化的比较 ,发现 DP 值 >4的麦芽寡糖为微杆菌D - 97胞内酶合成海藻糖的较适底物 ,并推断麦芽五糖生成海藻糖的基本方式为 :麦芽五糖→麦芽三糖 +海藻糖。以麦芽五糖为底物的酶反应研究进一步证实了上述作用方式。对于筛选得到的野生菌酶 ,HPLC对照检测从 1个角度为其酶合成海藻糖基本机制研究提供 1种方法。 相似文献
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高基质浓度酒精发酵过程中副产物的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用GC-MS研究了一株酿酒酵母在高基质浓度酒精发酵过程中副产物的种类,同时对温度和初始pH值对副产物生成的影响进行了初步研究,研究发现随着温度的升高,乙酸、丙酸和异戊醇含量均增加,而丁酸的含量在20~35℃之间基本不变,当温度继续升高时,出现了异常的增大;随着初始pH值的升高,乙酸含量逐渐增大,并在pH4~7的范围内呈现一种稳定的状态;丁酸在pH2时达到最大值,而后一直呈现下降的趋势;丙酸含量在pH5~8的范围内基本保持稳定的状态;异戊醇的含量出现了两次高峰,分别在pH4和pH8时出现。 相似文献
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白细胞介素-2在人体免疫应答中具有重要作用,常用于治疗肿瘤、肝炎和免疫缺陷性疾病等多种疾病,但因其体内半衰期短而限制了其临床应用。文中构建了含有融合蛋白基因HSA-IL-2的p MH3质粒,并通过电转染的方法转入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO细胞)中,利用p MH3质粒所携带的neo基因进行筛选,经96孔板培养并筛选得到稳定表达目的蛋白质的重组细胞,融合蛋白HSA-IL-2表达量达到2.26 mg/L。利用反转录PCR和Western blot对重组细胞鉴定后发现,融合蛋白编码基因整合入重组CHO细胞基因组中,而且融合蛋白同时具有HSA和IL-2双重免疫原性。利用对IL-2具有依赖性的CTLL-2细胞进行活性分析后发现,筛选得到的表达细胞分泌得到的融合蛋白具有较高的生物活性,表明成功构建具有表达IL-2生物活性能力的CHO细胞。 相似文献
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研究了谷氨酸菌体中核酸提取的工艺条件 ,获得了较好效果 .在 12 0℃ ,pH 9,菌体质量浓度 10 g/dL的条件下 ,提取 2h ,蛋白质的分离率为 90 % ,核酸的提取率高达 90 %以上 . 相似文献
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无溶剂体系合成1,3-甘油二酯用脂肪酶的筛选及其酯化性质 总被引:4,自引:0,他引:4
对不同来源的脂肪酶进行了系统的筛选,并根据位置专一性的差别将脂肪酶分为1,3-特异的、1,3-选择性和非选择性的3类.采用Lipozyme RM^IM在无溶剂系统中催化甘油、脂肪酸合成1,3-sn-甘油二酯.研究表明脂肪酸、底物醇种类、温度、水分活度对Lipozyme RM^IM的活力有明显的影响. 相似文献
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通过实验获得了米曲霉3.800固态发酵产腺苷酸(AMP)脱氨酶的适宜培养基,麸皮为主原料,成分质量分数为蔗糖2%,鱼粉2%,(NH4)2SO40.1%,吐温-800.1%,含水量50%,最佳的培养条件为:250ml的三角瓶装20g培养基,在28-30℃培养60h,发酵结束称取一定量的麸曲加10倍质量的蒸馏水,调节PH6.0,在35℃条件振荡水浴2h,酶的浸提液经盐析、透析、DEAE柱层析分离后,可收集到较单一的活性峰酶。 相似文献