基于适配体拉曼光谱技术快速检测肠炎沙门氏菌方法

目的:应用SELEX技术筛选高亲和力、高特异性适配体,利用该适配体结合拉曼光谱技术建立肠炎沙门氏菌快速检测方法。方法:采用全细菌指数富集的配体系统进化技术(whole-bacteria systematic evolution of ligands by exponential enrichment,whole-bacteria-SELEX)筛选肠炎沙门氏菌特异性核酸适配体,并采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)与SERS技术对筛选出的适配体亲和力及特异性进行评价,建立肠炎沙门氏菌检测方法。结果:本研究通过对肠炎沙门氏菌进行十五轮SELEX筛选,并通过ELISA对其亲和力进行评价,筛选出Aptamer₄、Aptamer₁₀、Aptamer₁₂三条候选适配体,并通过SERS技术确认Aptamer₄为亲和力最佳适配体;将Aptamer₄与肠炎沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌等5种混合菌结合,结果表明,通过SERS技术可特异的检测出肠炎沙门氏菌,且该方法重复性较好,其最低检测限的细菌浓度为102 CFU/mL。且在猪肉样品的检测中,肠炎沙门氏菌的回收率为93.37%~100.18%。结论:应用SELEX方法成功筛选出与肠炎沙门氏菌高特异性、高亲和力适配体,并建立基于表面增强拉曼光谱技术快速检测肠炎沙门氏菌的方法,该方法特异性强、灵敏度高、成本低、快速简便,可应用于食品加工过程中肠炎沙门氏菌的快速检测。     

长白山榛仁(Corylus heterophylla Fisch.)蛋白酶解物对小鼠免疫功能的影响

本文研究不同水解度的长白山榛仁蛋白酶解物对小鼠免疫功能的影响。按水解时间不同制备六种水解度榛仁蛋白酶解物(DH分别为24.16、29.69、33.22、36.33、38.08和39.57%),给受试组小鼠经口按1.00 g/kg·bw剂量灌胃,灌胃第10、20、30 d后,以小鼠免疫脏器指数,脾淋巴细胞增殖能力,巨噬细胞吞噬活性,血清细胞因子水平(IFN-γ和IL-4),血清碱性磷酸酶活力为指标,研究榛仁蛋白酶解物对小鼠的免疫调节功能。结果表明:水解度33.22%的榛仁蛋白酶解物只显著增加了小鼠胸腺指数(p0.05);水解度为36.33、38.08和39.57%的榛仁蛋白酶解物均能显著或极显著地增加小鼠免疫脏器指数、血清IFN-γ和AKP水平,增强脾淋巴细胞增殖活性和巨噬细胞吞噬活性(p0.05或p0.01)。结论,水解度为36.33、38.08和39.57%的榛仁蛋白酶解物具有增强小鼠免疫功能的作用。本研究为榛仁蛋白开发具有免疫活性的肽类产品提供了实验依据。     

地膜覆盖机常见故障及排除方法

一、横向皱纹故障原因:这是由于地膜纵向拉力小于横向拉力,前进速度不均匀等原因所致。解决办法:一是减小左右两压膜轮的压力;二是增加膜卷的卡紧力;三是机组前进速度要均匀一致。二、纵向皱纹故障原因:这是由于地膜的纵向拉力大于横向拉力等原因所致。     

溴酸钾的毒理学研究

目的：通过探讨溴酸钾对小鼠骨髓嗜多染红细胞、骨髓细胞染色体和精子的致突变性，阐明溴酸钾的毒性。方法：选用50只昆明小鼠随机分成5组，雌雄各半，设溴酸钾1/2LD50、1/4LD50、1／8LD50三个剂量组，阴性对照组给予等体积蒸馏水，阳性对照组腹腔注射40mg／kgbw环磷酰胺，连续灌胃4d，观察溴酸钾对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的影响；选用40只昆明小鼠随机分5组，雌雄各半，设溴酸钾1/2LD50、1/4LD50、1/8LD50三个剂量组，阴性对照组给予等体积蒸馏水，阳性对照组腹腔注射40mg／kgbw环磷酰胺，连续灌胃2d，观察溴酸钾对小鼠骨髓细胞染色体的畸变情况；选用40只昆明种雄性小鼠随机分5组，设溴酸钾1/2LD50、1/4LD50、1／8LD50三个剂量组，阴性对照组给予等体积蒸馏水，阳性对照组腹腔注射40mg／kgbw环磷酰胺，连续灌胃5d，观察溴酸钾对小鼠精子的影响。结果：溴酸钾的各个剂量组小鼠骨髓细胞微核率、骨髓细胞染色体畸变率及小鼠精子畸形率，与阴性对照组相比，有极显著差异（p〈0．01）。结论：溴酸钾可产生明显的致突变作用，并是染色体断裂剂以及可引起精子畸形。实验结果提示溴酸钾具有潜在遗传毒性。     

适配体结合量子点技术同时检测金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7方法

目的：基于适配体结合量子点技术,建立一种同时针对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌O157:H7两种食源性致病菌快速高效、灵敏的检测方法。方法：利用表面增强拉曼光谱技术筛选出与目标菌结合特异性较好的2?种适配体;利用免疫磁珠与适配体偶联技术特异性捕获2?种目标菌;选取不同发光原理的2?种量子点,并结合量子点荧光标记技术构建“磁珠＋目标菌＋量子点”的“三明治结构”,通过对结构条件优化确定2?种目标菌的检出限,并应用到市售无菌牛乳实际样品中进行加标回收率实验。结果：本研究证明所选取的2?条适配体与目标菌的结合具有高特异性,可实现对2?种目标菌的同时检测。对“三明治结构”优化结果表明：2?种目标菌的最佳捕获条件为免疫捕获时间45?min、磁分离时间2?min;适配体最适浓度为400?nmol/L;金黄色葡萄球菌检出限为101?CFU/mL,线性方程为Y=28.51X＋126.67（R2=0.973）;大肠埃希氏菌O157:H7检出限均为102?CFU/mL,线性方程为Y=92.86X－64.67（R2=0.987）,其中,Y为荧光强度,X为细菌菌落数的对数值,拟合度良好。且在牛乳样品中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌O157:H7回收率分别为94.6%～102.8%和93.4%～100.4%。结论：本研究所建立的方法能够实现同时对2?种食源性致病菌快速、高效检测,该方法易操作且灵敏度高,在食品加工生产安全检测方面具有良好的应用前景。     

野生茗葱提取物抑菌作用研究

目的:探究茗葱不同溶剂提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及蜡样芽孢杆菌的抑菌作用。方法:分别取茗葱鳞茎和叶子2部分,采用水煎法制备水提物,超声波辅助乙醇浸泡法制备醇提物,滤纸片法观察2种提取物对4种细菌的抑制效果,比较茗葱不同部位及不同提取物的抑菌作用。结果和结论:茗葱水提物及醇提物均对蜡状芽孢杆菌和沙门氏菌产生较好的抑制作用,从抑菌效果看醇提物优于水提物,且叶子优于鳞茎;对大肠杆菌无作用;对金黄色葡萄球菌只有醇提物起作用。茗葱可被开发成为一种天然的抑菌剂。     

Coprinopsis cinerea 漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

 本文通过RT-PCR从Coprinopsis cinerea okayama7#130中克隆得到laccase1,应用SignalP3.0Server软件分析其氨基酸序列后设计不含信号肽序列的新引物扩增得到不含信号肽的漆酶基因1（lac1）,并构建重组酵母表达载体pPIC9K-lac1,电击转化毕赤酵母GS1115并用甲醇诱导表达,之后研究重组酶的酶学性质。克隆得到的laccase1全长为1593bp,编码530个氨基酸,其中信号肽包含18个氨基酸。SDS-PAGE显示重组蛋白大小约为65KDa。酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为45℃,最适pH为4.3。重组漆酶在45℃保存3h后活性基本保持不变,在pH4.0～10.0的范围内稳定性较好。成功分泌表达的漆酶活力达到1.108U/mL。     

引物间隔臂修饰对液相芯片食源性致病菌检测的影响

建立液相芯片同时检测鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、志贺氏菌(Shigella)方法,并对引物进行间隔臂(Spacer C3)修饰,验证C3修饰对食源性致病菌检测的影响。对引物C3修饰组和未修饰组两种食源性致病菌进行条件优化和对比。试验表明所建立的食源性致病菌检测体系方法学评价良好,多批次结果显示稳定性较好,反应体系退火温度和杂交温度分别确定为56℃和38℃。结果表明,引物使用C3修饰对检测结果的阳性荧光值强度中值(median fluorescence intensity,MFI)有良好信号放大作用,为食源性致病菌液相芯片检测提供了参考。     

辅助拉深凸模和凹模在汽车侧围外板拉深模中的应用

简述了车身造型曲率的变化对冲压制造带来的影响,为了优化侧围外板后风窗区域成形不足的问题,描述了常规优化方法的局限性,论证新增辅助拉深凸、凹模优化成形的原理和实施流程,经过实践验证,证明了该方案的有效性。     

电能谐波问题浅谈

近年来．随着社会现代化程度不断提高．各类电力电子设备在能源系统、工业领域、建筑供配电领域等方面得到了大量应用．由此产生的电力谐波及其影响也越来越为人们所重视。本文从电网谐波的产生、危害及治理方面进行了介绍和探讨。谐波（Harmonic）；即对周期性的交流量进行傅立叶分解．得到频率大于1的整数倍基波频率的分量。