重组L-乳酸脱氢酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性研究

乳酸脱氢酶是生物法转化苯丙酮酸为苯乳酸的一种有效的酶。实验克隆到一种新型L-乳酸脱氢酶基因ldhL,来源于Lactobacillus plantarumSK-2(植物乳杆菌SK-2),GenBank接受号为FJ392647。以pET-22b(+)为载体质粒,E.coliBL21(DE3)为宿主细胞,构建了基因重组菌,IPTG可诱导目的蛋白的过量表达;经亲和层析纯化的重组蛋白样品进行SDS-PAGE电泳分析,约在37ku处出现显著的特征蛋白条带;重组LDH的比酶活为0.06U/mg。     

4-羟基苯乳酸的HPLC检测研究

建立了高效液相色谱法测定发酵液中4-羟基苯乳酸含量的方法,同时研究了Lactobacillus sp.SK007发酵过程中4-羟基苯乳酸的定量分析与生产进程。该方法可用来进行产4-羟基苯乳酸微生物的快速筛选及发酵液中4-羟基苯乳酸的快速检测,具有准确度高、重现性好、操作简单等优点。     

4-羟基苯乳酸的HPLC检测研究

建立了高效液相色谱法测定发酵液中4-羟基苯乳酸含量的方法,同时研究了Lactobacillus sp.SK007发酵过程中4-羟基苯乳酸的定量分析与生产进程。该方法可用来进行产4-羟基苯乳酸微生物的快速筛选及发酵液中4-羟基苯乳酸的快速检测,具有准确度高、重现性好、操作简单等优点。