空肠弯曲菌中规律成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)的检测与结构分析

规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)是近年在原核生物中发现的针对噬菌体等外源遗传物质的干扰而进化出的获得性和可遗传性生物免疫系统。因其序列的高度多态性及携带遗传信息的可追溯性,成为分子分型方法的理想位点。本研究对江苏地区分离的86株空肠弯曲菌基因组进行CRISPR结构的检测和分析。结果表明:36%的菌株基因组含有CRISPR结构,32株含有确定CRISPR结构的菌株均只含有1个CRISPR结构,CRISPR序列长度范围为92～366 bp;重复序列与数据库中出现频率最高的重复序列一致;识别到的间隔序列共111条,共分为17种类型,有10种类型的间隔序列与CRISPR DB数据库中公布的一致,有7种间隔序列为新报道的间隔序列,共55条,占总间隔序列的49.5%。通过同源性比对发现,间隔序列除与来自同属同种的质粒或噬菌体具有同源性外,有些还与其他致病菌的质粒或噬菌体具有同源性,这种现象说明空肠弯曲菌与其他致病菌可能存在基因的水平转移等信息交流方式。另外,通过CRISPR结构间隔序列的多样性,可以将38株空肠弯曲菌野生菌株分为5种不同的谱型。研究结果为空肠弯曲菌利用CRISPR结构进行分型和溯源提供数据基础。     

食品包装用塑料内垫中五种邻苯二甲酸酯的检测

采用四氢呋喃溶解塑料内垫,加入甲醇使高分子化合物沉淀,过滤,乙腈-异丙醇(1 1)稀释后用反相高效液相色谱-DAD检测器进行定量分析.方法最低检测限:BBP、DBP为21μg/mL,DEHP为1μg/mL,DINP、DIDP为5μg/mL,相对标准偏差为0.68%～5.06%,回收率为82.4%～109.3%,该方法简便、快速,稳定可靠.     

出口小麦淀粉品质指标结果情况分析

对出口小麦淀粉企业实验室检测结果进行质量控制,防止在检验过程中产生质量隐患。对2005年1～4月份间出口的小麦淀粉抽取水分、灰分、二氧化硫等项目的实验室数据进行统计分析,绘制质量控制图。发现第18组水分数据失控,发现灰分数据从第10组起连续5个数据有位移的倾向。对于实施过程检验的企业,检验检疫部门应加强对生产过程控制的同时,更要对实验室进行质量控制,从而真正有效地保证检验工作质量。     

粮油食品中呕吐毒素危害及风险分析

该文分析呕吐毒素性质,在自然界和粮油食品中存在情况,及对人类和动物危害,并进行风险评估,同时提出预防呕吐毒素危害建议。     

表面增强拉曼光谱快速鉴别无乳链球菌的研究

研究了表面增强拉曼光谱(SERS)快速鉴别以无乳链球菌为代表的链球菌属食源性致病菌的方法.通过柠檬酸三钠还原法制备金溶胶,与链球菌属混合,收集其SERS信号.首先确定了无乳链球菌的活化、预培养的组合方式和菌落预处理方式;然后比对了链球菌属和其他常见革兰氏阳性菌的SERS图谱,并应用聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)有效地将链球菌属区分出来,同时也可区分不同的链球菌;并且人工接种无乳链球菌到市售的全脂灭菌乳中,可在接种6h后检测到其SERS特征峰,有效提高了检测速度,为快速鉴别食品中链球菌提供了基础数据.     

食品中百草枯3种检测方法的比较

通过对粮食作物中的百草枯残留检测方法进行比较研究,得到各种方法的优劣.结果:HPLC的最低检测限为12 mg/L,加标回收率为42%～52%,相对标准偏差(RSD)为4.43%;ELISA的最低检测限为0.005 mg/L,加标回收率为70%～80%,相对标准偏差(RSD)为8.15%;GICA的最低检测限为50 mg/L,通过一个标准的颜色反应系列,可以非常简便、快速的对样品进行现场检测,是快速检测发展的一个方向.     

出入境动物源性食品中单增李斯特菌的多位点序列分型分析

对出入境动物源性食品中分离的单增李斯特菌进行多位点序列分型(mutilocus sequence typing,MLST)分析,了解其序列型分布特点及不同菌株之间的亲缘关系。提取单增李斯特菌基因组DNA,选择其7个管家基因进行聚合酶链式反应扩增并测序。将测序结果截成标准序列的长度后上传到MLST数据库进行比对分析,获得7个管家基因的等位基因谱和序列分型编码,并将结果采用不加权算术平均组对(unweighted pair group method using arithmetic averages,UPGMA)法进行聚类分析。89株单增李斯特菌共获得51个STs,其中26个为新获得的STs(STnew1~STnew26);数量最多的5个STs为ST8(9.0%),ST121(9.0%)、ST7(5.6%)、ST87(5.6%)及新发现的STnew3(7.8%);其中ST456、ST34、ST343、ST19、ST517、ST201、ST98、ST330和ST73为在国内首次获得。采用UPGMA算法得到的进化树可将89株菌株分为3大类群,分类的结果与单增李斯特菌血清学家系分类结果一致。MLST结果对了解出入境动物源性食品中分离的单增李斯特菌的亲缘关系及流行病学溯源有重要意义。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)直接竞争ELISA方法的建立

利用前期制备得到的DON酶标抗原(辣根过氧化物酶标记)以及抗DON抗体,建立检测食品中DON含量的直接竞争ELISA方法。该方法的检测范围1～100ng/mL,灵敏度达0.56ng/mL,半数抑制浓度IC50为10ng/mL;与DON类似物T-2毒素的交叉反应率为12%;玉米淀粉样品回收率在80.2%～91.1%之间,平均批间变异<15%,平均批内变异<3%。     

潜在食源性致病菌弓形菌在食品中的分布及检测研究进展

弓形菌(Arcobacter spp.)是一类重要的食源性致病菌,因其与弯曲菌(Campylobacter spp.)形态相似且亲缘关系很近,最初被称为"氧气耐受的弯曲菌"。弓形菌属内能够引起人致病的主要是布氏弓形菌、嗜低温弓形菌和斯氏弓形菌,感染致病性的弓形菌可以引起人类的肠炎、严重腹泻、败血症和菌血症等。弓形菌广泛存在于畜禽、畜禽产品和环境中,畜禽产品生产设备和水源的污染是造成其高感染率的主要途径。由于弓形菌的生理特征与弯曲菌相近,分离培养时通常较难与弯曲菌区分,分子生物学方法是弓形菌实验室诊断的主要手段。近年来,作为新型潜在的食源性致病菌,弓形菌逐渐引起研究者的关注。然而,相较于其他食源性致病菌,对弓形菌的研究尚处于起步阶段,国内的报道也相对较少。本文对弓形菌在食品中的污染现状、流行病学特点及弓形菌的实验室检测等相关研究进展进行综述,以期为广大研究者提供有价值的信息。     

压电免疫传感技术快速筛检花生中过敏原

目的采用压电免疫传感技术快速筛检花生过敏原。方法对花生主要过敏蛋白进行分离纯化,免疫新西兰大白兔获得花生抗体,对其的效价,半数抑制浓度等值进行测定。运用自组装的压电免疫传感器包被花生抗体,制作标准曲线,确定灵敏度,回收率及重现性。结果分离纯化花生过敏原蛋白纯度为90.7%,最适的花生包被抗原浓度为0.1μg/mL,自组装的压电传感器检测花生过敏原浓度在1~316μg/mL范围内具有较好的线性关系,灵敏度为0.1μg/mL,回收率介于92.3%～113.4%之间,重现性变异系数为6.04%。结论本项目建立的压电免疫传感技术检测花生过敏原与目前较多的光学分析相比灵敏度更高,实现了快速、在线检测,成本低,仪器简单,具有广阔的应用空间。