重组大肠杆菌表达17β-羟基类固醇脱氢酶全细胞催化合成宝丹酮的研究

宝丹酮作为一种重要的蛋白同化雄性激素类固醇，具有提升肌肉质量和耐力的功能。宝丹酮的传统合成方法是以1,4-雄烯二酮（ADD）为底物通过化学法合成，但过程复杂、污染严重。17β-羟基类固醇脱氢酶（17β-HSD）可催化甾体化合物C-17位点的氧化还原反应，实现ADD和宝丹酮的相互转化。本研究通过基因序列同源性分析，筛选到6种不同来源的17β-HSD基因并对其在大肠杆菌中进行异源表达。利用不同重组菌转化ADD合成宝丹酮，结果表明重组菌BL21/pET28a-HSDPy的ADD转化率最高，因此选择BL21/pET28a-HSDPy进行进一步研究。鉴定了重组菌的酶学性质并优化其全细胞转化条件。结果表明在生物量为36 g·L^-1、底物浓度为5.40 g·L^-1条件下，经过两次补料，获得了3.66 g·L^-1宝丹酮，比优化前提高了4.1倍。而且在生物转化过程中未检测到副产物。为生物合成宝丹酮提供了可能。     

重组酿酒酵母生物合成菜油甾醇

菜油甾醇作为甾体药物（孕酮、雄烯二酮、氢化可的松等）的重要合成前体已受到国内外研究学者的广泛关注。首先通过生物信息学分析,筛选了10种不同来源的7-脱氢胆固醇还原酶DHCR7,并采用CRISPR/Cas9基因编辑技术将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）内源的ERG5基因替换成不同来源的DHCR7基因,构建了菜油甾醇合成菌株。结果发现整合来源于Pangasianodon hypophthalmus DHCR7的菌株Zw507表现出最高的菜油甾醇的产量216.93 mg/L。进一步筛选了10种酵母内源启动强度较强的启动子来与PhDHCR7基因进行组合,结果显示以TEF1p为启动子时菜油甾醇的产量最高可达253.35 mg/L。为了进一步提高菜油甾醇产量,增加了DHCR7表达盒在酵母基因组上的拷贝数。当拷贝数为3个时,菜油甾醇的产量达到最高302.27 mg/L。最终,通过5 L发酵罐进行补料分批发酵,实现了916.88 mg/L菜油甾醇产量。该菌株可作为后续甾体药物生物合成的优良底盘细胞。     

网络时代大学生法制教育长效机制的构建

正在网络时代,加强对大学生的法制教育,是减少大学生违法行为,维护校园安全与稳定的需要,也是大学生综合素质提升和发展的内在要求,更是构建和谐校园的迫切任务。虽然各高校法制教育已取得显著效果,然而,大学生犯罪现象仍令人十分担忧。为此,构建长期有效的网络时代大学生法制教育机制已迫在眉睫。一、当前大学生法制教育存在的主要问题(一)法制教育处于边缘化状态目前,高校法制教育还缺乏领导组织机构,缺乏长远规划和近期具体目标、计划安排,"说起来重要,做起来次要,忙起来不要"的现象仍然存在。法制课尚未作为一门专门必修课正式列入大学生的教学大纲,只是把法律基础知识教学     

用单片机实现的异步机节电控制器

工作在轻载或空载下的异步电动机．适当调节定子端电压的幅值．可以降低损耗．提高功率因数．本文采用了８０３１单片机应用系统．通过编程使电机端电压跟踪负载电流．而转速基本不变．从而使电机在轻载和空载时达到节能的目的．     

基于ARM的电磁继电器参数检测仪

针对目前市场上存在的一些电磁继电器参数检测仪器的缺点,为了能够精确采集电磁继电器的吸合电压等主要参数,采用ARM技术和上、下位机方法,设计了一款基于ARMCortex—M3芯片sTM32F103ZET6单片机控制的电磁继电器综合参数检测仪。该仪器可完成对动断、动合、转换型直流继电器的线圈电阻、触点接触电阻、最小吸合电压、最大释放电压、吸合时间、释放时间等参数的测试。     

恒压供水系统的自动控制

介绍了用ＰＬＣ控制的变频调速恒压供水系统,阐述了系统的构成,用ＰＬＣ和变频器实现了对多台泵、阀的逻辑控制及变频泵的速度控制,并给出了ＰＬＣ控制的程序流程图．本系统经实际运行证明：可靠性高,抗干扰能力强．     

Y3MgAl3SiO12:Dy 3+,Eu 3+荧光粉的能量传递与暖白光实现

采用高温固相法合成了Dy ³⁺、Eu ³⁺共掺杂Y₃MgAl₃SiO₁₂石榴石型荧光粉。采用XRD、荧光光谱仪等仪器对样品的结构以及光谱特性进行表征,探究了Dy ³⁺/Eu ³⁺在Y₃MgAl₃SiO₁₂基质结构中的光谱特征以及离子间的能量传递机制。在367 nm近紫外光激发下,Y₃MgAl₃SiO₁₂:Dy ³⁺,Eu ³⁺的发射光谱包含Dy ³⁺的6F9/2到6H15/2和6H13/2的电子跃迁特征发射(487 nm蓝光和592 nm黄光)和Eu ³⁺的5D0 7F2 and 5D0 7F4特征发射峰(616 nm和710 nm红光)。在400~500 nm范围内Dy ³⁺发射谱与Eu ³⁺激发谱重叠,表明Dy ³⁺与Eu ³⁺之间存在着能量传递,能量传递的机理为电四极-电四极相互作用。该荧光粉通过调整Dy ³⁺和Eu ³⁺的掺杂浓度比封装近紫外LED芯片,可以实现单基质暖白光LED照明。     

PLC内定时器、计数器、数据寄存器数据的外部设定与显示

介绍了一种对定时器、计数器、数据寄存器的数据进行外部设定并显示的电路,并给出了相应的梯形图程序。该方法简单、实用,适于现场人员操作。     

我国战斗机应用复合材料的情况简介

我国将玻璃钢复合材料应用于战斗机上始于六十年代。当时,在战斗机上应用复合材料是由飞机某些部位的特殊要求决定的,如飞机上凡是有天线的地方,都有透波性要求,玻璃钢复合材料透波性非常好,于是,飞机的护尾器罩、罗盘天线口盖、信标天线口盖、机翼翼尖包皮,雷达蒙皮,垂尾翼尖前部蒙皮、机翼前缘30～     

夏县麦田节节麦发生规律与防治对策

通过对节节麦识别,了解其生物学特性和传播途径,采取针对性措施,达到有效防除草害的目的。