天山茶茎黄酮苷元提取工艺优化及其生物活性

为了优化天山茶藨茎5种黄酮苷元（木犀草素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、芹菜素）的酸水解提取工艺,评价其体外抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,本文利用UPLC-MS/MS法测定天山茶藨茎5种黄酮苷元的提取率,通过单因素实验和正交试验优化天山茶藨茎黄酮苷元酸水解提取工艺。利用DPPH、ABTS自由基清除实验测定天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元的抗氧化活性,并测定了其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,5种黄酮苷元的检出限、定量限分别在0.8~1.6、2.9~5.4 μg/L,在3.2~207.0 μg/L范围内具有良好的线性关系（R2≥ 0.9962）,方法的稳定性、精密度和重复性良好（RSD≤4.4%）。确定最佳酸水解提取工艺为:90%甲醇溶液（含5%盐酸）、提取温度:70℃、提取时间:100 min,该条件下,总黄酮苷元提取率为4.06 mg/g,RSD<5%,表明正交试验优化的提取条件稳定可行。天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元均具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性,其中甲醇盐酸提取物与5种黄酮苷元的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照阿卡波糖（IC₅₀:53.84±2.41 mg/L）,槲皮素对DPPH自由基的清除活性最好（IC₅₀:（2.94±0.18） mg/L）,木犀草素、山奈酚对ABTS自由基清除活性较好（IC₅₀分别为（5.34±0.10）、（5.55±0.17） mg/L）,它们的抗氧化活性高于阳性对照V_C。本研究建立的UPLC-MS/MS方法灵敏、精确、高效,可以对天山茶藨茎5种黄酮苷元化合物同时进行定量分析。优化的酸水解提取工艺能有效提高天山茶藨茎黄酮苷元的提取率。