人用疫苗及生产用细胞中猪圆环病毒PCR检测方法的建立及验证

目的建立人用疫苗及生产用细胞中猪圆环病毒1型(porcine circovirus 1,PCV1)和2型(PCV2)PCR检测方法,并进行验证。方法参照Gen Bank中登录的PCV1(KC447455)和PCV2(AY578327)序列,全基因组合成PCV1和PCV2基因序列,以合成的PCV1和PCV2全基因组序列DNA为模板,进行PCR扩增,对PCR反应中的退火温度进行优化。对优化后的PCR方法进行灵敏度和特异性验证,并用该方法检测疫苗生产用细胞KMB_(17)、Vero工作种子批、脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral poliomyelitis vaccine,OPV)收获液、冻干甲型肝炎减毒活疫苗(freeze-dried hepatitis A vaccine,f HAV)成品、肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗收获液及成品、Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine prepared with Sabin strain,SIPV)收获液及成品的PCV1和PCV2。结果优化后的退火温度为63℃,建立的PCR方法最低可检测出10~(-1)fg/μL的目的基因,仅对PCV基因组DNA能扩增出特异性条带。用该方法检测生产用细胞KMB_(17)及Vero工作种子批、OPV收获液、f HAV成品、EV71灭活疫苗收获液及成品、SIPV收获液及成品,均未检出PCV1和PCV2。结论成功建立了生产用细胞种子、疫苗收获液及成品中PCV的PCR检测方法,该方法具有较高的灵敏度和较强的特异性,能够用于本所生物制品生产用细胞种子、疫苗收获液及成品中PCV污染的检测,从而提高生物制品的安全性。     

TNJ300型拖挂式泥浆净化系统研制

根据车载钻机快速移运的要求,研制出TNJ300型拖挂式泥浆净化系统。该系统泥浆罐体采用拖撬形式由拖车直接拖行,可不使用大型吊车及运输设备;能够保证3 000m钻井过程中泥浆配制、加重、筛分、循环等顺利进行;能满足快速移运要求,具有良好的通过性和转弯能力,缩短了搬家时间,降低了使用成本。     

人用疫苗生产用人二倍体细胞株KMB17的鉴定

目的鉴定本所自主建立的人用疫苗生产用人二倍体细胞株KMB17的正确性。方法用染色体核型检查法和短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因分型法对本所疫苗生产用人二倍体细胞株KMB17进行鉴定。将疫苗生产用KMB17细胞经秋水仙素处理,积累中期相染色体后,低渗条件下释放出染色体,吉姆萨染料染色制片,镜检,观察染色体结构,精确计数100个细胞的染色体数目;选取人源细胞的20个STR位点对KMB17细胞进行DNA分型,并将获得的STR图谱与ATCC和DSMZ数据库进行比对分析。结果高倍镜下观察可见,样品细胞染色体组结构正常,无缺失和突变;精确计数100个细胞中,染色体数为46的细胞数有84个,无染色单体和染色体断裂细胞,无结构异常细胞,亚二倍体细胞14个,超二倍体细胞数2个。STR基因分型获得的特征性图谱清晰,未出现三单位基因,在ATCC和DSMZ数据库中均未找到与其细胞分型完全匹配的细胞株。结论本所自主建立的疫苗生产用人二倍体细胞株KMB17的细胞染色体结构和数目均正常,不存在污染和交叉污染,为正确细胞株。     

单沟泥石流危险性评价

以典型的舟曲罗家峪沟为研究对象,通过运用系统理论的思维,建立了一套针对单沟泥石流的危险性评估体系,采用(AHP)对影响因子进行综合分析,确定影响因子的影响程度,并计算出各个因子的权重,优化各个因子分级标准,建立一套完整的单沟型泥石流危险度评价方法。经实例分析表明,该方法的结果与现实相符合。研究结果实现了泥石流危险性的定量评价,为提升我国泥石流灾害危险性评估的可靠性、准确性和客观性提供科学支撑。     

碎麦秸垫膜覆盖对民勤绿洲食葵产量及土壤酶活性的影响

为解决民勤绿洲灌区水资源短缺、土壤耕层状况恶化、食葵产量不佳等问题,在民勤灌区设置无覆盖(CK)、秸秆覆盖(S)(秸秆量为4 500 kg/hm²)、地膜覆盖(F)、碎麦秸垫膜覆盖(SF₁)(秸秆量为4 000 kg/hm²)、碎麦秸垫膜覆盖(SF₂)(秸秆量为4 500 kg/hm²)5个处理,采用当地农户普遍的灌溉水平(750 m³/hm²),研究了食葵生长状况及土壤酶活性的变化。结果表明：碎麦秸垫膜覆盖(SF₁)处理下土壤温度显著高于其他处理,并且有着更高的保水效果,保证了食葵的正常生长发育;碎麦秸垫膜覆盖(SF₁)条件下平均出苗率较CK处理提高了12.1%(P<0.05),较S处理的出苗率提高了9.7%(P<0.05);碎麦秸垫膜覆盖(SF₁)条件下食葵产量达到4 780.95 kg/hm²,较SF₂、F、...     

室内设计中装饰艺术品的搭配技巧

家居设计与装饰艺术品的搭配是一个传统的话题,搭配巧妙则相得益彰,搭配不好则画蛇添足。本文将理论联系实际,将二者搭配的规律简单总结,希望能给新入行的设计师们一点参考。     

人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒PCR检测方法的建立及验证

目的建立人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据Gen Bank中登录的TTSu V1(JN688927)及TTSu V2(AY823991)的序列,合成TTSu V1及TTSu V2基因组部分DNA序列,连接于PUC57质粒上,制备重组质粒,以重组阳性质粒DNA为模板,PCR扩增316 bp的TTSu V1片段及252 bp的TTSu V2片段,同时验证方法的灵敏度和特异性。并采用该方法对2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗[3批Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strain,SIPV)收获液、1批SIPV成品、1批冻干甲型肝炎减毒活疫苗[hepatitis A(live)vaccine,freezedried,f HAV]成品、1批肠道病毒71型(enterovivus type 71,EV71)灭活疫苗成品]进行检测。结果建立的PCR法最低分别可检出10 fg/μL TTSu V1和0.01 fg/μL TTSu V2的目的基因;该方法可特异性扩增出TTSu V1和TTSu V2的目的基因条带。2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗均未检出TTSu V1及TTSu V2。结论成功建立了疫苗生产用原材料、细胞、疫苗收获液及成品中TTSu V的PCR检测方法,且该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于本所疫苗生产中对TTSu V的检测。     

NJ200型低温钻井液净化系统的研制

针对目前俄罗斯、加拿大等国对极地钻机的需求,在吸收国外低温钻机及配套设备经验的基础上,为4 000 m低温车装钻机配套而研制了NJ200型低温钻井液净化系统。该钻井液净化系统采用5级净化装置,能在-45℃低温环境下完成对钻井液的各项处理工作。试验和应用表明,该系统能够有效降低钻井液中的固相含量,保证钻井液的钻井性能,提高钻井速度,满足低温环境下钻井过程中各个环节的要求。