植物细胞凋亡研究进展

介绍了细胞凋亡不仅在存在于动物细胞中,也发生于植物个体发育中,并起着重要作用。植物细胞凋亡与动物细胞凋亡有相似的形态学和生化特征;植物细胞凋亡中存在着核酸科的激活;也可能有Ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶的参与。对一些与植物细胞凋亡有关的基因等问题进行了综述。     

转兔防御素基因小球藻生物反应器异养培养工艺研究

根据5L生物反应器中转兔防御素(NP1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、pH和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中。转NP1基因小球藻在15L反应器中培养133h的细胞密度可达34.2g/L,平均生长速率为0.257g/(L·h),比5L生物反应器中培养131h的细胞密度27.8g/L和平均生长速率0.21g/(L·h)分别提高了23%和22%。研究结果证实了转NP1基因小球藻放大培养的可行性,为实现高密度、高表达的大规模培养奠定了基础。     

在大肠杆菌中表达蜘蛛拖丝融合蛋白

蜘蛛丝凭借其优良的理化性质倍受人们青睐,但是蜘蛛本身难以高密度养殖给应用造成巨大的障碍。由此利用基因工程的手段来开发利用蜘蛛拖丝蛋白目前成为各国研究的热点。以往的研究表明,不同的编码蛛丝蛋白的cDNA片段在表达中的稳定性各不相同。在应用中存在适宜片段的筛选问题。本文从该角度出发,首次建立了Araneus diadematu克隆的拖丝蛋白基因ADF3与GSF融合产物的稳定原核表达系统。为今后进一步开发利用蜘蛛拖丝蛋白的研究奠定了基础。     

植物病程相关蛋白的基因表达调控

植物病程相关蛋白（PR）的表面在植物抗病反应中具有重要意义，最近年来植物抗病研究领域的一个热点，综述了最近在PR蛋白基因表达调控的分子机制等方面的重要进展。     

靛蓝色素酶基因表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

将来源于Ralstonia eutropha磁中的靛蓝色素酶基因IDG与从棉花基因组DNA中克隆到的棉纤维特异启动子PTL12相连构建了真核表达载体。该表达载体中包含靛蓝色素酶基因的原核启动子，它能在大肠杆菌中启动靛蓝色素酶基因的表达。     

天麻抗真菌蛋白(GAFP)的N端序列测定及cDNA基因克隆

从新鲜天麻次生块茎中将天麻抗真菌蛋白（ＧＡＦＰ）提纯,然后测得其Ｎ端的３０个氨基酸,根据氨基酸序列设计了一段３０ｂｐ的核酸探针,从ｃＤＮＡ文库中筛选到了编码该蛋白的基因,为这一新型蛋白在抗真菌基因工程中的应用奠定了基础。     

生物素-亲合素系统及其应用

概述了生物素－亲合素系统在生物学领域中的应用及其研究进展。生物素－亲合素系统的应用日益广泛,不但在免疫组织化学领域中占有了重要的位置,而且在标记核酸探针,细胞和物质分离方面显示了明显的优越性,特别是与生物磁珠技术相合后,更是产生了诱人的发展前景。     

GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达

利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达，研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响，并比较了CaMV35S,Ubil,Ubil-Ω5种启动子的转化效率。结果表明，培养5d的盐藻在6kV的脉冲电压，0．05s的脉冲持续时间和210的脉冲次数下电激可获得较高的转化率，为转化最佳条件。5种启动子中，Ubil-Ω启动子的转化效率最高，适合作为外源基因在盐藻细胞中高效表达的启动子。     

以小球藻为载体生产兔防御素的研究

本研究以单细胞的真核藻类小球藻（Chlorella ellipsoiden）作为受体,将兔防御素素（NP－1）的基因转入后,经抗生素筛选和分子及活性检测,获得了稳定表达NP－1的转基因藻株。进行了转基因小球扩繁的研究,并从扩繁的转基因小球藻中提取纯化了具有正常的生活活性NP－1。本文是通过基因工程的途径生产防御素的首例报道,为新型抗生素－－兔防御素的产业化奠定了基础。     

氮源对转基因小球藻异养生长及兔防御素表达的影响

在250 ml摇瓶中研究了氮源对转兔防御素(NP-1)基因小球藻的异养生长和NP-1表达的影响，结果表明，转NP-1基因小球藻异养培养的最适氮源为硝酸钾和酵母粉，二者的最佳浓度分别为0.9和9 g/L，藻细胞密度达5.11 g/L，是不添加硝酸钾时细胞密度的1.55倍，而NP-1表达量基本不变. 5 L生物反应器分批培养结果表明，转NP-1基因小球藻在含有硝酸钾和酵母粉两种混合氮源的培养基中培养时，硝酸钾被快速消耗而有机氮源充足，藻细胞内的叶绿素和蛋白质含量下降，但NP-1表达量基本不变.