全细胞杂交在三种赤潮微藻检测中的应用

从核糖体DNA的转录间隔区ITS和18SrRNA的基因序列中设计特异性荧光核酸分子探针,采用全细胞杂交方法（即荧光原位杂交法）对锥状斯氏藻（Scrippsiella trochoidea（Stein）Loeblich Ⅲ）、赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo（Hada）Hada）和球状棕囊藻（Phaeocystis globosa Scherffel）三种单胞微藻进行了分子鉴定,用荧光显徽镜和流式细胞仪对杂交结果进行了观察。结果表明,实验所设计的特异性分子探针结合全细胞杂交方法和流式细胞仪检测手段能够有效地实现对上述三种赤潮微藻的检测。由于该三种藻细胞的细胞外被物存在差别,荧光显微镜检测效果存在差异,即在荧光显微镜下,赤潮异弯藻和球状棕囊藻的杂交细胞的荧光强度比锥状斯式藻杂交细胞的荧光强度弱,在一定程度上影响了观察效果。同时,用该方法还成功地从模拟自然海区混合样品中检测出球状棕囊藻。因此,该研究方法适用于对实验室和自然海区样品的赤湖微藻的检测。