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为了探索木瓜蛋白酶在有机溶剂中的催化机理和活力变化,为其工业应用打下基础,研究了在4种不同有机溶剂极性系数的醇类单相共溶体系中,木瓜蛋白酶水解酪蛋白的催化活性及木瓜蛋白酶构象的变化。结果表明:木瓜蛋白酶在体积分数15%丙二醇和体积分数8%正丙醇的溶液中水解酪蛋白的活性分别上升20.1%和17.8%,在乙二醇和丙三醇体系中则酶活力显著下降。动力学测定表明,木瓜蛋白酶在4种有机介质中水解酪蛋白的米氏常数Km与Vmax均明显下降。差示光谱和荧光发射光谱表明,体积分数40%丙三醇可使木瓜蛋白酶含有Trp残基区域的空间结构趋向更紧密,而在体积分数15%丙二醇和体积分数10%乙二醇体系中,无规则卷曲或者β-折叠增加的区域很少包含Trp残基。 相似文献
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1,4-环氧六环对α-淀粉酶催化活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
1,4-环氧六环对α-淀粉酶活性具有抑制作用,这种抑制作用随着1,4-环氧六环溶液浓度的增大而增强.动力学分析表明,1,4-环氧六环的抑制类型为非竞争性抑制作用,紫外吸收光谱和荧光发射光谱分析显示,酶的二级结构在1,4-环氧六环作用下发生了变化,导致了酶活性的丧失. 相似文献
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蛋白变性剂对多聚半乳糖醛酸酶及其化学修饰酶催化活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探索几种蛋白质变性剂对多聚半乳糖醛酸酶的作用效果,以水溶性低分子量壳寡糖(COS,分子量约5000)作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶(PG)进行化学修饰,得到纯化的化学修饰酶(COS-PG),然后,测定不同蛋白变性剂(尿素、盐酸胍、SDS和苯酚)对纯化的PG和COS-PG催化活性的影响。结果表明,修饰后COS-PG的比活性是340.10 U(mg protein)1,比修饰前的PG提高了153%,COS-PG的糖含量比PG提高了43.11%,COS-PG的氨基修饰率为32.85%。SDS(十二烷基硫酸钠)、苯酚对PG和COS-PG活性有抑制作用,1 mmol L 1的SDS分别抑制了PG和COS-PG活性的80.99%和91.14%。10 mmol L 1的苯酚分别抑制了PG和COS-PG活性的34.08%和32.70%。低浓度的尿素和盐酸胍对PG有激活作用,5 mmol L 1的尿素使PG活性提高157.79%,3 mmol L 1的尿素使COS-PG的活性提高67.32%。2 mmol L 1的盐酸胍使PG活性提高57.64%,1 mmol L 1的盐酸胍使COS-PG的活性提高5.76%。 相似文献
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异丙醇对猪胰脂肪酶催化动力学和分子光谱的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
为了研究异丙醇对猪胰脂肪酶催化橄榄油水解反应的作用机理,在体系中加入不同体积分数的异丙醇,测定了脂肪酶的活性、动力学和光谱变化.活性测定结果表明,低体积分数的异丙醇对该酶有一定的激活作用,体积分数为20%的异丙醇使酶活性提高了229%.光谱分析结果显示,经异丙醇处理后猪胰脂肪酶的紫外吸收光谱和荧光发射光谱发生了变化,紫外差示光谱则出现了明显的负峰.动力学研究结果表明,异丙醇处理后,猪胰脂肪酶的vmax基本不变,而Km值则明显减小. 相似文献