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嵌合蛋白sTNFRⅡ-IgG Fc纯化与生物学活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法 嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果 该嵌合蛋白的纯度大于 95 % ,在体外能够二聚化 ,保留了sTNFRⅡ对hTNFα的结合特性 ,同单体sTNFRⅡ相比 ,对hTNFα的拮抗活性明显提高。结论 为进一步研究奠定了基础 相似文献
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用乳酸菌表达有药用价值的生物学活性多肽,是当前国际上的研究热点之,对开发新的功能性食品具有广阔的前景.本文应用PCR方法将人干扰素IFN-α-2b基因与IgG Fc基因连接,并引入一段柔性连接肽,构建了融合蛋白基因IFN-IgG Fc,将融合蛋白基因克隆到原核表达载体pSC111 AE中,转化乳酸乳杆菌ATCC393进行诱导表达及鉴定,并研究了融合蛋白的生物学活性.结果表明,通过Western-Blot方法在表达上清液检测出干扰素融合蛋白,ELISA测定表明两段多肽能够保持各自的构象,基因工程乳酸菌表达的上清液可以诱导WISH细胞产生明显的抗VSV病毒的活性,其活性为1.71×103IU/ml.本文首次构建并在大肠杆菌和乳酸菌表达了IFN-IgG Fc融合蛋白,获得了能产生人干扰素的乳酸菌株,为基因工程乳酸菌及相关药物的开发研究奠定了基础. 相似文献
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目的将铜绿假单胞菌外毒素A(Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)基因突变为无毒性的ntPE基因,并在大肠埃希菌中进行表达。方法利用Primer Premier 5.0软件设计PEA基因引物及PEA基因第553位氨基酸缺失的突变引物,以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)基因组DNA为模板,PCR扩增PEA基因,插入pGEM-T载体中,构建重组克隆质粒pGEM-PEA,以其为模板,利用突变引物,扩增ntPE基因(无毒性PEA),插入pET-30a载体中,构建原核表达质粒pET-ntPE,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析。结果测序结果证明已成功获得突变基因;原核表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约69 000,主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%,可被小鼠抗PEA单克隆抗体特异性识别,具有较好的抗原性。结论已成功获得无毒性的PEA突变基因,为构建以PEA为蛋白佐剂的融合蛋白疫苗奠定了基础。 相似文献
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报道了新型手性衍生化试剂2-甲氧基-2-三氟甲基-2-苯基乙胺的合成及拆分方法,以溴苯和三氯乙酸为主要原料通过3步反应合成了外消旋的MTPEA,合成总收率为53.3%,以光学活性酒石酸为拆分剂在甲醇中通过拆分得到光学纯度分别为95.1%和95.8%的S-(+)-MTPEA和R-(-)-MTPEA,拆分总收率为24.4%,并进一步研究了MTPEA分子中碳和氟原子间的偶合作用,归属了分属了各碳原子的化 相似文献
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大学生科研创新实践项目的管理探索 总被引:4,自引:0,他引:4
近年来,大学生科研创新能力和实践动手能力的培养得到很大的重视,高校都在开展多种多样的大学生创新实践项目。本文从管理和辅导角度探讨如何更好地开展大学生科研与创新实践项目,内容包括创新项目选题,创新能力培养的基本原则,以及创新实践过程的心理辅导,最后介绍了我校在管理和辅导大学生科研创新实践项目过程中的一些心得与体会。 相似文献
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我公司Φ3郾2m×52m、600t/d五级悬浮预热器窑,以前,在投料初期均采取低窑速、少投料,后逐渐增加窑速、增大喂料量的操作方式,这种操作方式使窑达到正常生产需要时间长,产量低、能耗高,且不稳定的火焰易损伤窑皮,甚至耐火砖。通过采取高窑速投料的操作方式,缩短了回转窑达到稳定状态的时间,降耗、增产,取得了较好的效果。1投料前的准备及要求1)设备现状及要求该窑主电动机工作电压为440V,对应窑速为3郾16r/min,比设计窑速2郾5r/min高0郾66r/min,为进一步提高窑速提供了可能。另外在投料前高温风机应尽量迟开,一般投料前15min左右开启,开得… 相似文献
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