可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在E.coil中的表达、纯化及其生物学活性

目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。     

腔磁力系统中的诱导透明和快慢光传播

为了在腔磁力系统中实现可控的磁子诱导透明、磁力诱导透明以及快慢光传播,建立了一个混合腔磁力系统.该系统由一个含有YIG球的微波腔和在z方向对球施加一个均匀的偏置磁场组成,并用强泵浦场驱动磁子和弱探测场驱动微波腔.研究表明,通过调节腔与磁子之间的相互作用强度和微波腔与磁子的耗散比,可以增加磁子诱导透明(MIT)、磁力诱导透明(MMIT)的效果和提高快慢光传播的速度.该研究结果可为磁力诱导放大、量子光学操纵和量子信息存储以及灵敏光开关的研究提供参考.     

赤红球菌组氨酸激酶的融合表达和功能分析

对赤红球菌的组氨酸激酶基因进行密码子优化，将优化后的组氨酸激酶基因（rhks）构建重组表达质粒pGEX-4T-2-rhks。将此质粒导入到大肠杆菌BL21（DE3）中进行异源表达。在25 ℃和1 mmol/L异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导条件下，组氨酸激酶融合蛋白（GST-RHK）获得成功表达，并具有催化活性。经谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化，获得电泳纯的GST-RHK，其中纯化倍数为3.1，得率为19.5%。该蛋白大小约为72.75 kDa，Km、Vmax和Kcat值分别为20.92 μmol/L、0.17 μmol/（L·min）和1.4 min－1。野生型赤红球菌、组氨酸激酶基因增强株sdrhkE和组氨酸激酶基因敲减株sdrhkD在分别含有苯酚、甲苯、氯苯、异辛烷4 种有机溶剂的培养基中培养，菌株sdrhkD的生长情况都优于野生型赤红球菌，菌株sdrhkE的生长情况都低于野生型赤红球菌。本研究为进一步揭示赤红球菌SD3中组氨酸激酶涉及的信号转导途径与赤红球菌有机溶剂耐受性的关联机制提供一定参考依据。     

流动注射-化学发光法在BSA构象变化研究中的应用

建立了一种基于鲁米诺(luminol)化学发光的流动注射-化学发光系统,考察了蠕动泵流速、luminol浓度等对系统发光强度的影响,确定了最佳实验参数,并采用该系统对BSA的构象变化活性进行研究。结果表明,BSA在碱性环境中可显著增强luminol的发光强度,华法林对于BSA/luminol体系发光强度的抑制作用在一定浓度范围内(0.1～1600μmol·L~(-1))呈现良好的线性关系。该方法稳定性高,结果可靠且易于操作,可为其他功能蛋白质构象变化活性表征提供方法学的借鉴。     

血清miR-141在糖尿病肾损伤患者中的表达及与远期预后的关系

目的:分析血清miR-141在糖尿病肾损伤患者中的表达及与远期预后的关系。方法:选取2017年1月-2019年6月于本院就诊的72例糖尿病肾损伤患者作为观察组,选取同期于本院进行健康体检的48例健康体检者作为对照组,比较两组血清miR-141表达水平在不同临床病理参数情况下的表达水平,并分析观察组不同肾脏损伤程度与血清miR-141表达水平的相关性,对观察组血清miR-141表达水平与远期预后情况进行评价。结果:观察组收缩压、舒张压、血肌酐表达水平以及血清miR-141表达水平均明显高于对照组,血红蛋白与白蛋白表达水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。糖尿病病史≥10年、尿蛋白≥3.0 g/L、血肌酐表达水平≥150μmol/L以及血尿素氮表达水平≥7.5 mmol/L的患者血清miR-141表达水平均明显高于未超过其标准的患者,eGFR≥60 mL/(min·1.73 m~2)患者血清miR-141表达水平明显低于未超过其标准患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组不同肾小球分级、IFTA分数以及间质炎症分数血清miR-141表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肾小球分级Ⅳ级、IFTA 3分以及间质炎症2分高表达占比均明显高于低表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组27例患者在随访期间出现终末期肾病,其中血清miR-141低表达水平中占6例,血清miR-141高表达水平中占21例,血清miR-141高表达水平随访期间出现终末期肾病的风险比低表达高3.5倍。结论:糖尿病肾损伤患者血清miR-141表达水平明显高于正常人,且其表达水平与糖尿病肾损伤患者的肾损伤水平以及预后具有相关性;血清miR-141表达水平越高,糖尿病肾损伤患者肾损伤程度越严重,其预后程度越差,在临床上具有一定预后价值。     

诱导水解法制备微细高分散金红石型二氧化钛

采用加热TiCl4稀溶液的方式,制备晶种,将其导入一定浓度的TiCl4溶液中进行诱导水解。所得的偏钛酸经干燥、煅烧后得到分散性好,D50为1 mm以下,金红石含量为≥95%的高纯TiO2,可用于生产PTC热敏电阻等铁电陶瓷。     

低温送风系统末端装置诱导器的研究及性能评价

研究了在低温送风系统中诱导器(IDU)的结构特点、工作原理、送风方式,分析了诱导器送风口射流速度的特性,得出了诱导器空调系统的优缺点。