基于RPA-LFD法的多黏菌素耐药基因mcr-1可视化快速检测方法建立与应用

目的：建立一种快速、高效、可视化的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1检测方法，为其基层检测的展开提供依据和便利。方法：利用重组酶聚合酶扩增结合胶体金侧向流试纸条技术(Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick,RPA-LFD)，辅以手持式胶体金读数仪；根据mcr-1基因保守序列设计合成一对特异性RPA引物，通过对反应条件和体系的优化，以及特异性试验、灵敏度试验、模拟食样试验和实际样品试验，成功建立了可视化定量检测细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD方法。结果：在引物浓度400 nmol/L，引物比例1:1时，该方法最佳反应条件为Mg²⁺浓度14.0 mmol/L，反应温度37℃，反应时间20 min；灵敏度好，标准曲线方程为y=0.117x+0.051，定量限为10¹～10⁸ copies/μL，检出限为10¹ copies/μL，比PCR法低一个数量级且模拟样品检出结果与PCR法一致。利...     

基于建筑信息化的素混凝土有限元模型关键参数设置浅析

基于建筑信息化的素混凝土有限元模型关键参数设置对建筑有限元分析是非常重要的。本文从基本参数的设置、混凝土材料参数的设置等方面,对常规素混凝土有限元模型关键参数如何设置进行了研究,为相关的工程技术人员提供一定的参考。     

苏木素的制备及其对黏胶织物的染色性能

利用提取的苏木素对黏胶织物进行染色，探讨苏木素对黏胶织物染色的可行性。测试表明，最佳染色工艺为：染液质量分数4%,染液pH值=5,染色温度80℃,染色时间60 min。染色后，织物的力学性能略有下降，折皱回复性能略有上升，织物的服用性能未受影响，且耐洗色牢度良好。认为：利用苏木素对黏胶织物进行染色具有较强的可行性。     

响应面法优化白芷中欧前胡素的提取工艺

采用高效液相色谱法测定欧前胡素的含量，以水提液中欧前胡素提取率为实验指标，在单因素试验的基础之上，以提取温度、提取时间、液料比为考察因素，利用Box-Behnken Design响应面法进行三因素三水平试验设计。响应面法优选出白芷中欧前胡素的最佳提取工艺为提取温度72℃、液料比8倍、提取时间1.5 h,在该条件下欧前胡素提取率为0.97%。本研究优化的白芷中欧前胡素的提取工艺方便、稳定。     

大豆低聚肽对自发性高血压大鼠血压及血浆血管紧张素的影响

目的:探究大豆低聚肽对于大鼠血压及血浆血管紧张素的影响。方法:采用酶法制备大豆低聚肽,随后进行体外血管紧张素Ⅰ转换酶(angiotensin Ⅰ converting enzyme,ACE)活性抑制实验及体内实验,实验设正常对照组(正常血压大鼠(WKY大鼠)饲喂高剂量大豆低聚肽)、阴性对照组(自发性高血压大鼠(SHR大鼠))、阳性对照组(SHR大鼠饲喂卡托普利)和低、中、高剂量组(SHR大鼠饲喂0.90、1.80、4.50 g/kg大豆低聚肽),喂养30d后,观察大鼠血压、心率、尿蛋白质量、血管紧张素Ⅱ质量浓度等指标的变化。结果:大豆蛋白最佳酶解条件为:碱性蛋白酶和中性蛋白酶质量分数各0.1%、50℃酶解4 h,此条件下10 mg/mL大豆低聚肽ACE活性抑制率达到71.2%。经饲喂不同剂量大豆低聚肽30 d后,WKY大鼠血压变化不显著(P0.05),SHR大鼠血压有下降趋势;饲喂高剂量大豆低聚肽在第4周时可以显著降低SHR大鼠血压和血管紧张素Ⅱ质量浓度(P0.05),但对于大鼠心率和尿蛋白质量无显著影响(P0.05)。结论:体外实验证明,与大豆蛋白相比,大豆低聚肽对于ACE活性的抑制效果更好;体内实验证明大豆低聚肽可以降低SHR大鼠的血压和血管紧张素Ⅱ质量浓度,且对正常大鼠血压无明显影响,推测大豆低聚肽通过抑制ACE活性的方式发挥降压功效。     

高效液相色谱-串联质谱法测定能力验证肉粉中四环素类抗生素残留量

目的优化肉粉样品中四环素类药物的高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法采用80%乙腈-水溶液提取肉粉样品中的四环素类药物,Prime HLB固相萃取小柱净化,洗脱液用氮气吹至近干,用10%乙腈水溶液(含0.2%甲酸)溶解,采用多反应监测正离子模式(multiple reaction monitoring, MRM)进行高效液相色谱-串联质谱仪测定。结果与国标方法GB/T 21317-2007(HLB固相小柱萃取法)相比,4种药物的线性范围均在5～200μg/L时线性良好(r 0.99),回收率差异不显著(P0.05)。实验室方法测得的含量分别为:四环素113.93μg/kg,金霉素68.16μg/kg,多西环素155.73μg/kg,土霉素未检出;回收率为四环素94.5%,金霉素95.2%,多西环素104.7%,土霉素97.8%。测得四环素、金霉素、多西环素、土霉素线性相关系数r分别为:0.9995、0.9998、0.9989、0.9997。结论本实验室方法简单快速,回收率高,重现性好,适用于熟肉制品中四环素类药物的多残留检测。     

甘草苷的合成及抗氧化活性研究

以间苯二酚、冰醋酸、对烷氧基苯甲醛为原料,经酰化、羟醛缩合、关环反应合成了甘草苷(Ⅲ),通过~1HNMR、FTIR、MS对其结构进行了表征,并通过测定其对DPPH自由基的清除率来评价其抗氧化活性。结果表明:甘草苷具有较强的抗氧化活性,当浓度为2.00 mg·mL~(-1)时,甘草素、甘草甲苷(Ⅲa)、甘草乙苷(Ⅲb)对DPPH自由基的平均清除率分别为51.56%、44.85%、34.53%,其抗氧化活性大小为:甘草素甘草甲苷(Ⅲa)甘草乙苷(Ⅲb);甘草素的2个酚羟基为其抗氧化活性有效部位。     

我国大陆地区食品中柄曲霉素和黄曲霉毒素B1的污染调查

为了解我国食品中黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）和柄曲霉素（Sterigmatocystin，STC）污染情况，采集自我国大陆地区1137份的食品样品以及室温储存1-2年的米份样品315份，采用高效液相色谱-串联质谱方法分析其中AFB1和STC的含量。检测结果显示食品中AFB1检出率范围为0%-40%，谷物类和谷物基加工品检出率分别为0.2%和7.8%；坚果检出率为8.7%，其中有两份样品中AFB1含量超标，啤酒中AFB1的检出率为0%。STC检出率为12.9%，平均含量为0.39 μg/kg，谷物类、谷物基加工品、坚果和啤酒中检出率分别为2.6%，28.3%，4.3%和0%。相比于所采集的超市和农贸市场样品，室温储存1-2年的米粉样品中AFB1和STC的阳性率均较高，分别为4.4%和84.8%，平均含量为0.84和2.38 μg/kg。     

组合酶对复合骨素酶解液呈味物质的影响

为探究组合酶对牛骨素和鸡骨素的复合骨素酶解液呈味物质的影响,选取四种组合酶(木瓜蛋白酶+风味蛋白酶、菠萝蛋白酶+风味蛋白酶、碱性蛋白酶+风味蛋白酶、复合蛋白酶+风味蛋白酶)制备复合骨素酶解液,测定四种复合骨素酶解液的水解度、游离氨基酸、呈味核苷酸、味精当量(Equivalent umami concentration,EUC)、肽分子量分布等呈味物质指标,并进行对比分析。结果表明:碱性蛋白酶+风味蛋白酶(Alkaline proteinase+Flavourzyme,A+F)和复合蛋白酶+风味蛋白酶(Protamex+Flavourzyme,P+F)酶解液的水解度最大,分别为10.67%和11.27%;对呈味游离氨基酸组成分析发现,A+F酶解液鲜味氨基酸、苦味氨基酸、无味氨基酸含量最高,A+F和P+F酶解液总游离氨基酸含量最高;四种酶解液中肌苷酸较另两种核苷酸含量高,A+F酶解液总核苷酸含量最高;比较四种酶解液味精当量,A+F酶解液EUC值最大;A+F和P+F酶解液中分子量<1000 Da肽段含量最高,制备复合骨素酶解液的呈味效果更好;主成分分析表明A+F组合酶综合得分最高,A+F组合酶为美拉德反应提供丰富反应底物。     

大葱提取物葱辣素的体外抗菌和抗病毒作用研究

大葱挥发油的主要活性成份是葱辣素,本项目拟针对大葱提取物葱辣素开展抗菌和抗病毒作用系列研究。采用试管稀释法及抑菌环试验,测定葱辣素对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);以细胞病变抑制法和中性红染色法,用Reed-muench法计算其50%细胞毒性浓度(TC50),最大无毒浓度(TC0),50%抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI),判断其抗呼吸道合胞病毒作用。结果显示,葱辣素体外有一定的抗G+菌和G-菌作用。葱辣素对HEp-2细胞的半数中毒浓度(TC50)为6.3μg/mL,最大无毒浓度(TC0)为3.6μg/mL,对病毒的50%抑制浓度(IC50)为1.7μg/mL,TI为3.71;葱辣素可呈剂量依赖性地改善呼吸道合胞病毒感染所致的细胞病变,抑制病毒增殖。这将为葱辣素的进一步开发与临床应用研究提供坚实的科学依据。