酶催化荧光猝灭法测定痕量葡萄糖

在pH 7.0的磷酸盐缓冲液中,葡萄糖氧化酶(GOx)催化葡萄糖与氧反应生成H_2O_2,在H_2SO_4介质中H_2O_2与I^-发生氧化还原反应生成I_2,过量的I-发生氧化还原反应生成I_2,过量的I^-与I_2生成I_3-与I_2生成I_3^-,I_3-,I_3^-使阳离子荧光剂罗丹明6G位于553 nm波长处的荧光发生猝灭,猝灭程度与葡萄糖浓度相关,据此建立检测葡萄糖的新方法。方法线性范围为2.0×10-使阳离子荧光剂罗丹明6G位于553 nm波长处的荧光发生猝灭,猝灭程度与葡萄糖浓度相关,据此建立检测葡萄糖的新方法。方法线性范围为2.0×10^(-7)(-7)¹.4×101.4×10^(-5)mol/L,检出限为6.77×10(-5)mol/L,检出限为6.77×10^(-8)mol/L。将该方法用于血糖样品测定,加标回收率为85.0%(-8)mol/L。将该方法用于血糖样品测定,加标回收率为85.0%¹02.5%,操作简便、结果准确可靠。     

葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能的影响分析

对于仔猪来说,断奶过程是一个非常关键的时期,不仅需要对营养和环境进行集中管理,也要对环境中潜在病原进行分析,并对葡萄糖氧化酶的作用进行分析,如何缓解断奶过程对于养殖业的影响,需要相关人员在实践中认真思索。本文以480头仔猪为基本参数,对葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能进行简要的分析,也集中阐释了葡萄糖氧化酶对断奶仔猪生长性能的结果分析,旨在为相关研究人员提供有价值的试验建议,以供参考。     

葡萄糖氧化酶在动物生产中的应用

葡萄糖氧化酶具有抑菌、促生长作用,且无毒、无抗药性,是一种可替代抗生素的新型添加剂,具有广阔的应用前景。文章从葡萄糖氧化酶的催化反应机理、在动物生产中的应用以及对饲料中黄曲霉毒素的作用作以综述。     

响应面法优化黑曲霉产葡萄糖氧化酶条件

运用响应面法对黑曲霉(Aspergillus niger)产葡萄糖氧化酶以及发酵条件进行了优化.根据单因素实验结果,利用Plackett-Burman设计对影响其产酶相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素:葡萄糖,玉米浆和碳酸钙.用最陡爬坡试验逼近以上3个因子的最大响应区域后,采用Box-Behnken设计以及响应面分析法,确定其优化后发酵条件为(g/L):葡萄糖172.11、玉米浆11.05、碳酸钙52.29、牛肉蛋白胨3.5、(NH4)H2PO4O05、KCl0.15、MgSO4·7H2O 0.125、FeSO4·7H2O 0.125,220r/min,30℃培养48h.优化后的葡萄糖氧化酶酶活达786.3 U/g,比在种子培养基中酶活350.5 U/g提高了2倍左右.     

Effect of puerarin on the P13K pathway for glucose transportation and insulin signal transduction in adipocytes

To explore the effect of puerarin on insulin receptor (IR), insulin receptor substrate-1 (IRS-1) and protein expression of protein kinase B(PKB) in the P13K pathway of the glucose consumption, transportation and insulin signal transduction in 3T3-L1 adipocytes with insulin resistance. The insulin resistance 3T3-L1 adipocytes model was established by free fatty acid induction. The model cells were managed with puerarin in different concentrations. Glucose consumption was detected with glucose oxidase method, glucose transportation rate was determined by 2-deoxy-3H glucose ingesting method, and the IR, IRS-1 and PKB expression were determined by Western blot. Glucose consumption and transportation were significantly decreased in the model adipocytes, but increased after treated with puerarin (P<0.01). Moreover, the level of tyrosine phosphorylation of IR subunit β was higher in the puerarin treated groups, and that of IRS-1 was higher in the group treated with low dose puerarin than that in the model group. The 3T3-L1 adipocytes of insulin resistance model could be induced by free fatty acid successfully, puerarin could promote the glucose utilization in them to alleviate the insulin resistance, which may be related with the action in advancing the tyrosine phosphorylation of IR and IRS-1.     

壳聚糖-聚丙烯酸葡萄糖敏感微胶囊的制备及性能表征

以液体石蜡作为油相,壳聚糖溶液为水相,采用反相乳液聚合法制备壳聚糖-聚丙烯酸微胶囊。然后采用一种碳化二亚胺方法将GOD酶固定到PAAC接枝壳聚糖微胶囊。利用红外光谱、扫描电子显微镜、紫外分光光度计对微胶囊的性能进行分析;以罗丹明B作为模型物来验证微胶囊的缓释性能。结果表明:壳聚糖-聚丙烯酸微胶囊圆整、表面粗糙,而且在葡萄糖浓度达到0.2mol/L时,罗丹明B从微胶囊释放的速率显著升高。     

葡萄糖氧化酶基因在黑曲霉中的分泌表达

通过PCR扩增从一株葡萄糖氧化酶生产菌黑曲霉中克隆得到1818bp葡萄糖氧化酶基因GOD,将GOD基因与糖化酶基因的5’同源臂、3’同源臂进行重叠延伸,构建葡萄糖氧化酶基因的表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-GOD。将载体pSZH-GOD通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得8株重组菌株。对8株重组菌株的发酵液上清液进行酶活测定,结果表明葡萄糖氧化酶基因在高产糖化酶的黑曲霉中得到了分泌表达,静置培养6d后其分泌表达的葡萄糖氧化酶酶活最高可达1.166U/mL,而在出发菌株中检测不到葡萄糖氧化酶的分泌表达。同时,重组菌株胞内表达的葡萄糖氧化酶最高酶活可达11.45U/mL,是出发菌株的266倍。此研究结果为简化葡萄糖氧化酶发酵生产工艺、提高酶产量提供了新的途径。     

面粉工业的发展与酶制剂的应用前景

分析了我国面粉工业的现状，指出在生产能力严重过剩的情况一，必须进行战略结构的调整，逐步形成合理的面粉工业区域布局，并提出了建立“面粉工业协会”的建议；讨论了入民对我国面粉工业的影响及TCK小麦的问题；指出面粉工业的发展要坚持科技 创新，大力发展专用粉，而原料小麦的质量，工艺设备的先进性及面粉后处理和合理使用改良剂是开发专用粉的3个基本条件，并阐述了合理使用面粉改良剂的重要性和有关技术措施；介绍了葡萄糖氧化酶等酶制剂对面粉品质改良的机理和使用方法，指出酶制剂在面粉工业中的应用前景；讨论了在面粉中应用酶制剂应该注意的一些问题。     

葡萄糖氧化酶在面包中作用机理的初探

葡萄糖氧化酶是应用于面包中的一种新型酶制剂，由其产生的Ｈ２Ｏ２是在面包中起作用的活性物质。本研究旨在确定由葡萄糖氧化酶产生的Ｈ２Ｏ２是作用于面筋蛋白还是面筋蛋白还是面粉的水溶性部分。通过实验证实葡萄糖氧化酶是作用于溶性部分，在葡萄糖氧化酶存在的条件下，面粉或面团水溶性部分的ＳＨ含量明显下降，而且葡萄糖氧化酶氧化面粉水溶性部分使其形成凝胶，改善了面包品质。     

葡萄糖氧化酶面包中作用机理的初探

葡萄糖氧化酶是应用于面包中的一种新型酶制剂，由其产生的Ｈ２烛在面包中起作用的活性物质。研究旨在确定由葡萄糖氧化酶产生的Ｈ２Ｏ２是作用于面筋蛋白还是面粉的水溶性部分。通过实验证实，芪春产是作用于面粉的水溶性部分，在葡萄糖氧化酶存在的条件下，面粉或面团水溶性部分的ＳＨ含量明显下降，经酶氧化的面粉水溶性部分形成凝胶，从而改善限面包品质。