骨髓增生异常综合症的超微结构观察

本文报告9例骨髓增生异常综合症(MDS)患者骨髓标本的电镜观察结果。患者男性8例,女性1例,年龄24～61岁。病程10多天至2年,既往无化疗或放疗史。按FAB标准诊断及分型,包括难治性贫血(RA)4例,原始细胞过多性难治性贫血(RAEB)5例。标本经常规方法制成超薄切片。 RA和RAEB患者骨髓病变基本一致,三个血细胞系都有部分细胞受累,表现为病态造血。幼红细胞常出现核浆发育不平衡,以及核的各种异常,如外形不整、分叶;核裂、核泡;双核、芽生现象;染色质限局性消失。凝聚及溶解;最终核固缩、破碎或全部溶解。胞浆经常含较多膜性细胞器,如成群的小泡、次级溶酶体或来源不明的膜结构等(图1～2)。本组中7例见到巨核细胞,其     

Evaluation of apatite-coated chitosan microspheres for bone regeneration

The apatite-coated chitosan microspheres were fabricated by incubating chitosan in five times simulated body fluid. The apatite deposited on the microspheres was similar to natural bone mineral, as demonstrated by scanning electron microscopy, X-ray diffraction spectra and Fourier transformed-infrared spectroscopy analyses. Rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells （BMSCs） were seeded on apatite- coated microspheres to investigate the effect of this scaffold on cell proliferation and differentiation. BMSCs seeded on uncoated microspheres were served as a control. In vivo experiment was evaluated by transplanting the microspheres loaded with or without BMSCs in 5-mm cranial defects of Wistar rats. Bone regeneration was investigated via micro-CT and histological analysis. It was found that apatite-coated chitosan microspheres could significantly promote the proliferation and alkaline phosphatase activity of BMSCs compared with uncoated microspheres. Histological slices and Micro-CT images at 8 weeks revealed much better regeneration of bone in the apatite-coated microspheres loaded with BMSCs than the control. In addition, the defect filled with pure microspheres induced little new bone formation. Our findings suggest that the apatite-coated chitosan microspheres scaffold is a promising carrier of stem cells for cranial bone tissue engineering.     

骨髓成骨细胞在碱热处理的磷灰石涂层钛表面的分化增殖研究

为了研究骨髓基质细胞转化的成骨细胞在碱热处理的涂层磷灰石钛表面的分化增殖，将钛片经过碱热处理后，浸泡于与类似体液的环境进行表面磷灰石涂层。应用骨髓成骨细胞作为实验工具，观察体外细胞在处理的涂层钛片上的生长，碱性磷酸酶以及降钙素的分泌。在早期，有磷灰石涂层的钛片成骨细胞黏附高于对照组；在晚期，两组之间没有明显差异；成骨细胞分化的标志——碱性磷酸酶活性和降钙素的表达，磷灰石涂层组都明显高于对照组。研究表明：碱热处理的磷灰石涂层钛能够促进成骨细胞黏附，有利于细胞向成骨分化。     

bFGF促增殖后骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元样细胞的分化

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)体外作用于骨髓间充质干细胞(Mesen-chymal stem cells,MSCs)后,诱导其向神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞定向分化的情况。方法从鼠骨髓中获得MSCs,培养传代,用MTT法检测bFGF对骨髓MSCs生长的影响。10 ng/ml bFGF作用2 d后,通过IBMX、细胞因子bFGF、GDNFI、L-1β、中脑神经胶质细胞条件培养基和中脑神经细胞膜碎片等分组联合诱导骨髓MSCs向神经元样细胞、多巴胺能神经元样细胞分化,免疫细胞化学方法鉴定特异标志NSE、MAP-2a,b和TH的表达。结果在一定范围内,bFGF对骨髓MSCs具有明显的促增殖作用。分化的神经元样细胞表达NSE、MAP-2a,b和TH,联合应用GDNFI、L-1β、中脑条件培养基和中脑神经细胞膜碎片诱导7 d后,NSE阳性率为(27.774±2.747)%,MAP-2a,b为(28.006±3.080)%,TH为(3.098±0.352)%。结论体外骨髓MSCs被诱导分化成神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞,为帕金森等中枢神经系统疾病的细胞移植治疗奠定了基础。     

辐射对小鼠骨髓基质细胞分泌血管内皮生长因子的影响

摘要为研究γ射线对小鼠骨髓基质细胞中血管内皮细胞生长因子（Vascular endothclia growth factor，VEGF）的影响，使用不同剂量（0、2．5、5、10Gy）的γ射线全身照射C57BL／6J小鼠。分别用逆转录多聚酶链反应（Reverse transfer polymcrasc chain reaction，RT-PCR）和酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbcnt assay，ELISA）法研究了照射后体外培养3、6、10d的骨髓基质细胞中mRNA和培养上清中的VEGF水平。结果发现，对非照射组，随着骨髓基质细胞体外培养时间的延长，其VEGF在基因和蛋白水平都显著升高。受到5Gy或10Gy射线照射后，VEGF随时间变化的总趋势与非照射组相同。在各时间点照射组的VEGF基因表达均高于同时点的非照射组。照射组培养6d上清液中VEGF含量高于同时点的非照射组；而在第10d时，却显著低于同时点的非照射组。分析其原因是因为受到照射后培养10d的骨髓基质细胞数已显著低于非照射同时点的细胞数，其培养上清中VEGF的减少与分泌VEGF的总细胞数减少有关。结果说明，5Gy或10Gy射线会引起骨髓基质细胞VEGF的表达增强。这一现象提示VEGF的表达升高可能是机体的一种代偿性反应，有利于机体造血的重建。辐射后，小鼠骨髓中VEGF的改变与骨髓基质的损伤、造血恢复的关系值得进一步研究。     

维生素D保护γ射线引起的骨髓基质细胞凋亡

本实验利用骨髓基质细胞（Bone marrow stromal cell，BMSC）克隆形成法、流式细胞仪分析BMSC凋亡、Western—blot分析BMSC内caspase，3蛋白表达研究维生素D对γ射线引起的BMSC损伤的保护作用。小鼠在6Gy的γ射线照射前48h每天皮下注射0．06251ag的1，25二羟基维生素D。结果发现，照射引起小鼠骨髓成纤维细胞集落形成单位（CFU—F）数显著减少。维生素D处理使照射后小鼠的CFU-F与对照组在同一水平。照射使BMSC凋亡率及其caspase-3蛋白的表达显著上升，而维生素D处理可以显著改善这种效果。这些资料说明维生素D具有保护照射引起的BMSC凋亡的作用。     

人体骨髓基质干细胞冷冻干燥的探索性实验

人体骨髓基质干细胞已成为组织工程、细胞移植和基因治疗等领域的重要研究对象,目前对它已有低温保存的研究,而通过冷冻干燥的方法对其进行保存国内外未见报导.实验尝试用冻干的方法来保存骨髓基质干细胞.文中选取海藻糖、PVP、HES等作保护剂,应用差示扫描量热仪(DSC)测量其结晶温度和玻璃化转变温度;随后对加入保护剂的细胞溶液进行冻干实验,并应用流式细胞仪对冻干样品复水后的细胞活性进行了测定,其中30%PVP 20%海藻糖对细胞的保护效果较好,细胞成活率达到16.40%.     

自体骨髓干细胞移植研究进展

细胞移植作为一种新的治疗方法备受医学界关注，但细胞供应短缺和免疫排斥是阻碍这一疗法临床推广的主要难题。自体骨髓干细胞移植在一定程度上可缓解此矛盾。文章综述了自体骨髓干细胞移植治疗脑、肝、心等重要器官疾病的基础和临床研究现状，以及骨髓动员剂在骨髓干细胞移植中的作用。     

The Experimental Study of Constructing Tissue Engineered Bone by Compounding Zinc-sintered Bovine Cancellous Bone with Marrow Stromal Cells

1　IntroductionBonetissueengineeringinvolvesconstructingtissueengineeredbonetorepairbonedefectsbyusingscaffoldswhicharecompoundedwithseededcells .Itisimportanttochooseandmanufactureidealscaffoldsinthisarea .Wehavealreadyusedbothzinc sinteredbovinecancello…     

不同调强技术在宫颈癌骨髓保护根治性放疗中的应用

目的:分析比较固定野调强技术和不同弧数的旋转容积调强在宫颈癌骨髓保护根治性全盆腔放射治疗的剂量学特点,寻找更优的治疗方案。方法:选取在汕头大学医学院附属肿瘤医院接受根治性放疗的ⅡA~ⅢB期宫颈癌患者9例,针对每例患者分别设计九野固定野调强(FF-IMRT)计划、双弧、三弧和四弧旋转容积调强(2A-VMAT、3A-VMAT、4VMAT)计划,比较四者靶区、骨盆骨髓,其他危及器官的剂量学差异和加速器跳数和照射时间。结果:IMRT、2A-VMAT、3A-VMAT和4A-VMAT四组计划均具有良好的靶区覆盖率,靶区适形度和均匀性以及骨盆骨髓受照剂量和受照体积(V10,V20,V40)无差异。三组VMAT计划在危及器官的保护上无差异。VMAT计划的小肠均略低于FF-IMRT计划(P<0.008),在直肠的保护上,FFIMRT计划略优于3弧VMAT计划(P<0.008)。IMRT、2A-VMAT、3A-VMAT和4A-VMAT计划的加速器跳数分别为(1850.3±227.8)MU、(848.4±58.8)MU、(835.0±76.2)MU和(910.8±43.3)MU,照射时间分别为(353.2±25.1)s、(136.2±3.6)s、(211.2±3.5)s和(286.2±3.4)s。各组的加速器跳数和照射时间比较差异有统计学意义,调强计划的跳数和照射时间最多,两弧VMAT最少。结论:综合考虑各种物理和生物因素,在宫颈癌骨髓保护根治性放疗计划中,双弧VMAT技术照射为最优选择。