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1.
2.
Dongming Lan Qian Wang Jinxin Xu Pengfei Zhou Bo Yang Yonghua Wang 《International journal of molecular sciences》2015,16(4):7273-7288
Thermostability and substrate specificity are important characteristics of enzymes for industrial application, which can be improved by protein engineering. SMG1 lipase from Malassezia globosa is a mono- and diacylglycerol lipase (MDL) that shows activity toward mono- and diacylglycerols, but no activity toward triacylglycerols. SMG1 lipase is considered a potential biocatalyst applied in oil/fat modification and its crystal structure revealed that an interesting residue-Asn277 may contribute to stabilize loop 273–278 and the 3104 helix which are important to enzyme characterization. In this study, to explore its role in affecting the stability and catalytic activity, mutagenesis of N277 with Asp (D), Val (V), Leu (L) and Phe (F) was conducted. Circular dichroism (CD) spectral analysis and half-life measurement showed that the N277D mutant has better thermostability. The melting temperature and half-life of the N277D mutant were 56.6 °C and 187 min, respectively, while that was 54.6 °C and 121 min for SMG1 wild type (WT). Biochemical characterization of SMG1 mutants were carried out to test whether catalytic properties were affected by mutagenesis. N277D had similar enzymatic properties as SMG1 WT, but N277F showed a different substrate selectivity profile as compared to other SMG1 mutants. Analysis of the SMG1 3D model suggested that N277D formed a salt bridge via its negative charged carboxyl group with a positively charged guanidino group of R227, which might contribute to confer N277D higher temperature stability. These findings not only provide some clues to understand the molecular basis of the lipase structure/function relationship but also lay the framework for engineering suitable MDL lipases for industrial applications. 相似文献
3.
单宁酸能使食物中的蛋白质变成不易消化的凝固物质,影响人体对蛋白质的吸收利用,为了阐明二者之间的作用方式,实验利用差热-热重分析、傅里叶红外光谱和荧光光谱研究了单宁酸(Tannic acid,T)对酪蛋白酸钠(Sodium Caseinate,SC)结构的影响。红外光谱表明,酪蛋白酸钠和单宁酸相互作用后,其二级结构发生了改变,β-折叠和β-转角含量相应地减少,α-螺旋、无规则卷曲结构增多;荧光光谱说明,T的加入可以使SC的荧光发生静态猝灭,由荧光强度变化速率和单宁酸的浓度的双对数回归曲线得出了T和SC的结合常数KΛ=1.30×103 L/mol,结合位点数n=1.20;热重和差热分析表明,单宁酸-酪蛋白酸钠复合物(T-SC)的玻璃化温度升高了20℃,变性温度升高了86℃。分析实验结果:单宁酸的存在使酪蛋白酸钠分子链之间的作用力增大,链段移动受阻,形成更大的立体网状结构,稳定性增加。 相似文献
4.
Behnam Mohammadi Robert Raudner Mohsin Shafiq Edgar Ahn Hermann C. Altmeppen Markus Glatzel 《European Journal of Lipid Science and Technology》2020,122(9)
Prion‐reduction in standard biodiesel processes is caused by acidic and alkaline conditions. In the alternative RepCat biodiesel process, efficient prion‐reduction can be achieved by high‐temperature/pressure. However, a possible increase in thermostability of prions in the presence of methanol during these conditions has not previously been investigated, and is verified in this work. Samples are spiked with prions, treated with methanol, and incubated at 220 °C at 80 bar for 30 min. No traces of protease‐resistant prion protein (as proxy for prions) are detected in tallow or glycerine (as the final by‐product) after treatment. Serial dilutions of spiked prions show at least 6 log10 prion reduction. More importantly, similar effects are detected using milder conditions of 200 °C at 70 bar for 15 min, representing the worst‐case conditions of the process. In conclusion, this study shows that methanol does not increase the thermostability of prions and the RepCat process can efficiently eliminate prions and is therefore safe for the usage of category 1 tallow. Practical Applications: The study further supports the applicability of RepCat process in reducing prion‐contamination in the presence of methanol. Furthermore, the conditions leads to a considerable reduction of prions in glycerine obtained as by‐product. 相似文献
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结合缩聚方法和封端修饰方法合成苯酚封端的聚苯砜(PPSU)树脂,利用离子色谱方法对PPSU树脂的氯端基含量进行定量测试,并采用毛细管流变仪和高温注塑等方法对比评估了不同氯端基含量PPSU树脂的热稳定性和颜色。结果表明,通过苯酚封端,PPSU树脂的氯端基含量可由3000 mg/kg以上降至700 mg/kg以下,氯端基含量取代比例可达80.6%,同时PPSU树脂的力学性能未发生明显变化,拉伸强度、屈服点伸长率、弯曲强度和缺口冲击强度分别保持在73 MPa,89%,114 MPa和50 kJ/m2左右,并且PPSU树脂的热稳定性得到一定程度提高,颜色等级有所改善。 相似文献
6.
针对目前固井使用的缓凝剂存在的热稳定性能不好、异常胶凝现象(结块)、水泥石抗压强度减弱、水泥浆综合性能欠佳等问题,通过水溶液自由基聚合,研制了一种新型高温缓凝剂GWR-1,并对其热稳定性能进行了评价,同时,对加入4种缓凝剂GWR-1、GWH-1、HX-400、DRH-200L的水泥浆异常胶凝现象和综合性能做了比较。微观结构分析表明:各单体参与了反应,分子量分布较为均一,分子结构高温下稳定,GWR-1的热稳定性可达350℃。GWR-1在硅酸盐水泥基复合材料中应用性能测试结果表明:加入GWR-1水泥浆的稠化温度可达160℃,高温时加量不敏感,高温抗盐性能较好,加入GWR-1的水泥浆在150℃不会发生异常胶凝现象,且其硅酸盐水泥石的强度发展良好,低密度和高密度的水泥浆的综合性能优于加入其他3种缓凝剂的水泥浆。 相似文献
7.
8.
木聚糖酶具有重要的工业应用价值,在食品、饲料、造纸等领域有着良好的发展前景。不同应用领域对木聚糖酶的酶学性质具有不同要求,耐热性是木聚糖酶在实际生产过程中最有应用价值的性质之一;因此,许多研究者致力于木聚糖酶耐热性机制的研究。研究发现GH11家族木聚糖酶的热稳定性与其N末端区域密切相关,可以通过N末端改造的策略有效提升GH11家族木聚糖酶的热稳定性。本文主要综述了影响GH11家族木聚糖酶热稳定性的因素、N末端改造提升木聚糖酶热稳定性的技术和方法,并对耐热木聚糖酶的应用前景进行展望,以期为GH11家族木聚糖酶的耐热性研究提供一定的参考。 相似文献
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10.
提出一种多功能聚炔的制备新方法——点击化学制备法。有效地实现了多功能基团取代聚炔的制备,使用红外光谱(FT-IR)、核磁共振(1H-NMR)以及热重分析(TGA)对制得的高分子结构和热性能进行了详细表征,研究结果发现,该方法不仅制备条件温和,操作简单,而且产率高;同时芳基口恶唑基团的引入,有效地将电子传输和非线性吸收功能基团有效构筑于同一聚炔高分子中,实现多功能性,而且合成的高分子呈现高的热稳定性,热分解温度高达372.9℃。 相似文献