扶正抗癌方联合吉非替尼治疗晚期肺腺癌疗效观察

目的:观察扶正抗癌方联合吉非替尼治疗晚期肺腺癌的临床效果。方法:选取90例晚期肺腺癌患者作为研究对象,按随机数字表法分为对照组和试验组,每组45例。对照组采用吉非替尼治疗;试验组在对照组基础上加用扶正抗癌方治疗,观察治疗后两组患者临床疗效、T淋巴细胞水平、生存质量和不良反应。结果:治疗后对照组有效率为64.44%,试验组有效率为80.00%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后试验组患者CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+水平高于对照组,CD_4~+/CD_8~+水平低于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);生存质量方面,两组患者角色功能、社会功能、情绪功能、躯体功能比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者白细胞减少、皮疹瘙痒、肝肾功能损害、恶心呕吐、腹泻不良发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正抗癌方联合吉非替尼治疗晚期肺腺癌患者临床效果显著,可改善患者T淋巴细胞水平及生存质量,减少不良反应。     

明胶海绵微粒- TACE治疗15例大肝癌术后外周血Treg细胞的变化及意义

【摘要】 目的 初步探讨应用明胶海绵微粒（GSMs）行TACE治疗大肝癌术后外周血中调节性T淋巴细胞（Treg）变化及意义。方法 应用流式细胞技术检测健康组和大肝癌患者GSMs- TACE术前与术后第10天、第22天外周血Treg细胞的含量。结果 选择健康人7名，符合入组标准的肝癌患者共计15例。外周血中Treg细胞含量:健康对照组为（8.64±1.94）%；肝癌患者术前为（11.52±3.78）%，术后第10天为（9.07±1.94）%，与术前相比显著下降（P=0.039），术后第22天为（9.96±1.48）%，与术前比较差异有统计学意义（P=0.028）。结论 GSMs- TACE治疗大肝癌能够显著降低外周血Treg细胞的含量，表明该方法对机体免疫功能有正向调节作用。
     

不同工艺仙人掌提取物对绿壳蛋鸡生产性能及免疫指标的影响

为研究不同工艺仙人掌提取物对绿壳蛋鸡生产性能的影响,选取40周龄绿壳蛋鸡7 260只,随机分为3组(处理Ⅰ组、处理Ⅱ组和对照组)。对照组饲喂基础饲粮,处理Ⅰ组在基础饲粮中添加乙醇提取配合乙醚萃取的仙人掌提取物400 mg·kg-1,处理Ⅱ组在基础饲粮中添加超临界萃取的仙人掌提取物400 mg·kg-1,结果表明,添加不同工艺仙人掌提取物的处理组在产蛋率、平均蛋重、破壳率和绿壳蛋鸡外周血T淋巴细胞转化率与对照组相比均得到显著改善(P<0.05),处理Ⅰ组和处理Ⅱ组的料蛋比与对照组相比差异不显著(P>0.05);处理Ⅰ组和处理Ⅱ组在产蛋率、平均蛋重、破壳蛋和绿壳蛋鸡外周血T淋巴细胞转化率上差异不显著(P>0.05)。同时发现,不同工艺仙人掌提取物饲喂绿壳蛋鸡能够改善蛋品质。     

重组人淋巴细胞活化基因-3蛋白胞外段的真核表达及鉴定

目的真核表达重组人淋巴细胞活化基因-3(lymphocyte activation gene-3,LAG-3)蛋白胞外段,并进行鉴定。方法用植物血球凝集素(phytohaemagg lutinin,PHA)刺激Jurkat细胞,流式细胞术检测Jurkat细胞中LAG-3蛋白的表达;提取Jurkat细胞总mRNA,RT-PCR法扩增人LAG-3蛋白胞外段基因片段,同时在蛋白C-末端引入His标签,将其克隆入载体pcDNA3. 1+,构建重组质粒,转染Expi293F真核细胞,当细胞活率低于50%时收获细胞上清,经镍柱亲合层析纯化。纯化产物进行4%~20%SDS-PAGE、HPLC及Western blot分析,BCA法测定浓度。结果经菌液PCR、双酶切及测序鉴定,表明质粒构建正确。重组表达蛋白的相对分子质量约60 000,纯化后纯度达95%以上,与鼠抗LAG-3单克隆抗体可发生特异性结合,浓度为2. 4 mg/mL。结论成功构建了重组真核表达质粒LAG-3/pcDNA3. 1+,并于Expi293F细胞中表达,纯化获得了纯度较高的LAG-3蛋白,为后期LAG-3蛋白的相关研究及其单抗的制备奠定了基础。     

不同来源乳铁蛋白及乳铁蛋白素对小鼠脾淋巴细胞增殖影响的比较

以牛乳清乳铁蛋白(bovine whey lactoferrin,LFW)、牛初乳乳铁蛋白(bovine colostrum lactoferrin,LFC)、人乳铁蛋白(human lactoferrin,LFH)、牛乳铁蛋白素(bovine lactoferricin,Lfcin B)和人乳铁蛋白素(human lactoferricin,Lfcin H)为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响并比较不同来源乳铁蛋白(lactoferrin,LF)及乳铁蛋白素(lactoferricin,Lfcin)作用效果的差异性。采用CCK-8法检测不同来源的LF与Lfcin作用小鼠脾淋巴细胞24、48、72 h后,及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果显示:LF与Lfcin均在48 h时对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进效果最好,且在一定质量浓度范围内促进效果随质量浓度升高而加强;LF与Lfcin均在一定质量浓度范围内提高刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖和脂多糖诱导的B淋巴细胞的增殖。结果表明:两种牛乳铁蛋白(bovine lactoferrin,LFB)及Lfcin B可替代LFH应用于婴幼儿配方产品中以提高婴幼儿免疫能力,LFB推荐添加质量浓度为0.50~2.00 mg/m L,Lfcin推荐添加质量浓度为75~125μg/m L。     

盐析法与低温乙醇法制备抗人T细胞猪免疫球蛋白工艺的对比

目的两种常用抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin)制备工艺的对比。方法以人T淋巴细胞免疫的健康猪血浆为原料,采用硫酸铵-Sephadex A-50和Cohn低温乙醇法,经醛化人健康红细胞、醛化人胎盘渣及混合人血浆吸收后,制备抗人T细胞猪免疫球蛋白,参考《中国药典》三部(2010版)相关附录,进行中间品及成品检定。结果用硫酸铵盐析法与低温乙醇法连续分别制备了3批产品,每批投浆量约5 000 ml;3批中间品鉴别试验及3批成品检定结果均符合《中国药典》三部(2010版)相关要求,两种工艺方法均适用于制备抗人T细胞猪免疫球蛋白,但在质量和收获率上,低温乙醇法更具优势。结论低温乙醇法制备抗人T细胞猪免疫球蛋白更适用于生产。     

淋巴细胞功能相关抗原-1基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠引流淋巴结T细胞活性的影响

目的探讨淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function-associated antigen-1,LFA-1)基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型小鼠引流淋巴结T细胞活性的影响。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)35-55多肽诱导LFA-1a链CD11a基因敲除的C57BL/6小鼠及野生型C57BL/6小鼠,建立EAE小鼠模型,取MOG诱导后21 d EAE模型小鼠脊髓颈段切片,HE染色和LuxolFastBlue染色,观察小鼠脊髓组织学变化;于MOG诱导后7、14、21d处死小鼠,收集腹股沟引流淋巴结CD4+T淋巴细胞,加入终浓度为1μg/ml的MOG35-55多肽刺激48 h后,应用BrdU试剂盒检测细胞增殖情况;于MOG诱导后4、7、10、14、21 d处死小鼠,收集腹股沟引流淋巴结细胞,加入终浓度为1μg/ml的MOG35-55多肽刺激48 h后,进行细胞内细胞因子染色,观察分泌IFNγ和IL-17的T细胞比例。结果 MOG诱导的野生型小鼠脊髓出现明显淋巴细胞浸润及广泛的脱髓鞘变化,而LFA-1基因敲除小鼠无明显变化;在EAE疾病早期(7 d),LFA-1基因敲除可减少淋巴细胞向引流淋巴结聚集,降低MOG体外刺激T细胞增殖能力,分泌IFNγ及IL-17的T细胞比例也较野生型C57BL/6小鼠明显降低(P0.05);而在EAE疾病缓解期(21 d),LFA-1基因敲除小鼠淋巴细胞聚集及T细胞增殖能力与野生型C57BL/6小鼠相比无明显差异(P0.05),分泌IFNγ及IL-17的T细胞比例高于野生型C57BL/6小鼠(P0.05)。结论在EAE疾病发生早期,LFA-1可能起到了关键性的作用,LFA-1有可能成为自身免疫性疾病治疗的重要分子靶点。     

雌激素与免疫在绝经后骨质疏松发病机理中的研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OPS)是一种以单位体积内骨量低于正常为特征的骨骼疾患,是骨质有机成分生成不足、继发性钙盐减少及骨组织微细结构破坏为主要表现的一类疾病。绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMO)属于原发性OPS,其与绝经后雌激素的减少有着密不可分的关系。近年来,许多研究表明骨骼疾病如类风湿性关节炎、骨转移、牙周炎和OPS等的发生与免疫系统有着密切的关系,从而新生了骨免疫学这一交叉学科。PMO的发生不仅与雌激素能影响破骨细胞和成骨细胞的功能有关,还与其能影响绝经后免疫系统及多种细胞因子等功能有关。本文就PMO与绝经后免疫系统之间的关系展开简要论述。     

白细胞滤板中T淋巴细胞的分离培养及其免疫原性

目的从成份血浆除白细胞过滤板中分离T淋巴细胞,并检测其免疫原性。方法以白细胞过滤板为原料,从白细胞滤板中分离培养T淋巴细胞,计数单核细胞数量,并检测细胞活力。去除细胞中的红细胞和血小板,纯化后,对T淋巴细胞进行诱导、分化和培养,并检测其对猪的免疫原性。结果从每个白细胞滤板中平均可分离3.94×107个单核细胞,细胞平均存活率达93.18%。纯化后T淋巴细胞在体外增殖培养8~10 d处于增殖高峰期,14 d后达平衡期;增殖倍数最高可达100倍,平均为38.5倍。用分离的淋巴细胞免疫猪后,具有较强的免疫反应,致1头猪死亡;E玫瑰花抑制试验显示,有1头猪合格;淋巴细胞毒试验结果显示,有1头猪合格。结论成份血浆除白细胞过滤板中能分离培养T淋巴细胞,初步分离培养的淋巴细胞可产生免疫原性,但结果并不理想,其免疫条件和检测方法有待进一步优化。本研究为今后用分离培养的淋巴细胞制备猪抗人淋巴细胞免疫血浆提供了参考。