| 大规模纯化脊髓灰质炎病毒的蔗糖垫层离心法的建立 |
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| 引用本文： | 赵冰心,戴素萍,潘小霞,夏文跃,文喻玲,廖国阳,陈元鼎.大规模纯化脊髓灰质炎病毒的蔗糖垫层离心法的建立[J].粉末涂料与涂装,2015(3):310-313,316. |
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| 作者姓名： | 赵冰心 戴素萍 潘小霞 夏文跃 文喻玲 廖国阳 陈元鼎 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所;云南民族大学 |
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| 基金项目： | 云南省自然科学基金项目(2013FZ130,2012FD039) |
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| 摘 要： | 目的建立可大规模纯化脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)的蔗糖垫层离心法。方法病毒大量增殖后,收集病毒液,经PEG浓缩、三氟三氯乙烷抽提后,采用蔗糖垫层或Cs Cl密度梯度离心法纯化PV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型),电镜下观察病毒形态,进行核酸及感染性滴度的检测。将纯化的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型PV免疫豚鼠,心脏采血,分离血清,微量中和试验法检测血清中和抗体滴度。结果蔗糖垫层离心法纯化的各型PV,病毒颗粒形态典型,背景清晰,除完整的光滑型病毒颗粒外,还可见大量空心病毒颗粒样品,纯化效果较好;Cs Cl密度梯度离心法纯化的PV样品,病毒形态也较典型,但完整的病毒颗粒较多。两种纯化方法获得的病毒基因组核酸特征显著,背景清晰,无明显差异。蔗糖垫层离心法纯化的各型PV的感染性滴度及免疫后豚鼠血清中和抗体滴度均高于Cs Cl密度梯度离心法。结论蔗糖垫层离心法纯化的PV纯度高,免疫原性好,可用于大规模纯化PV或其他病毒。
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| 关 键 词： | 脊髓灰质炎病毒 蔗糖垫层 纯化 |
Development of sucrose cushion centrifugation method for large-scale purification of poliovirus |
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| Affiliation: | ZHAO Bing-xin;DAI Su-ping;PAN Xiao-xia;XIA Wen-yue;WEN Yu-ling;LIAO Guo-yang;CEHN Yuan-ding;Institute of Medical Biology, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College; |
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