多重实时聚合酶链式反应熔解曲线法同步鉴别蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭

为实现鱼类及其制品掺假的快速鉴别,以蓝鳍金枪鱼（Thunnus thynnus）线粒体DNA的D-loop区、裸盖鱼（Anoplopoma fimbria）线粒体DNA的16S rRNA基因及异鳞蛇鲭（Lepidocybium flavobrunneum）线粒体DNA的ND4L基因为靶位点,设计扩增产物熔解温度（Tm）具有显著性差异的特异性引物,建立一种快速鉴别鱼类及其制品中蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭源性成分的3 重实时聚合酶链式反应熔解曲线分析法,通过引物特异性、灵敏度及市售样品的检测,对该方法进行检验和评价。结果表明：构建优化的方法具有良好的特异性及灵敏度,单物种DNA检出限为0.001 ng,多物种混合DNA检出限均为0.1 ng,蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭源性成分的相对检出限分别为0.5%、1%、0.5%,通过对市售样品的检测表明,该方法可用于实际样品掺假的快速鉴别。