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酿酒酵母中PiggyBac转座子筛选系统的构建
作者姓名:周林希  柳艺石  赵神保  张慧杰  高晓冬  藤田盛久
作者单位:江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122
摘    要:PiggyBac(PB)是来源于粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)的TTAA型转座子。PB转座子系统可作为一种插入型突变工具,应用于多种真核细胞中。本研究在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中构建了一个基于PB转座子的筛选系统。系统由插入ADE2基因编码框的PB转座子及由半乳糖启动子调控表达的PB转座酶(PBase)两部分组成。在PBase诱导下,PB转座子可以从原始位点无痕移除并随机插入新的基因位点。PB转座子在转座过程中保持单一拷贝数,在每个突变细胞中只有一个插入位点,并可快速检测突变基因。实验结果表明:所构建的PB转座子筛选系统可应用于酿酒酵母中的基因筛选。

关 键 词:酿酒酵母  PiggyBac转座子  基因筛选
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