| 共表达抗氧化酶促进脂肪氧合酶在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 邱芳芳,刘松,堵国成,陈坚.共表达抗氧化酶促进脂肪氧合酶在大肠杆菌中的表达[J].食品与生物技术学报,2019,38(10):23-29. |
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| 作者姓名： | 邱芳芳 刘松 堵国成 陈坚 |
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| 作者单位： | 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122 |
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| 摘 要： | 基于脂肪氧合酶(LOX)活性对宿主菌潜在的危害,分别共表达了超氧化物歧化酶和过氧化氢酶,以期提高铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa BBE来源的LOX在大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3)中的表达。将P. aeruginosa BBE超氧化物歧化酶基因sodB和sodM及E. coli过氧化氢酶基因katE克隆至pRSFDuet-1,分别得到表达质粒pRSF-sodB,p RSF-sodM和p RSF-katE,将上述表达质粒转化至表达LOX的重组大肠杆菌N6,得到菌株N6-B,N6-M和N6-K。在20℃和1 mmol/mL异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)条件下诱导70 h,N6-B、N6-M和N6-K胞内外LOX总酶活分别为21.6、28.1和7.1 U/mL,其中N6-B和N6-M较对照菌株N6(11.8 U/mL)提高了83%和138%。通过正交实验确定LOX较优的诱导表达条件为:IPTG浓度2 mmol/mL,诱导菌体浓度(OD600)2.5,诱导温度20℃。研究结果表明:共表达超氧化物歧化酶能有效促进LOX在大肠杆菌中的表达,为该酶高效异源表达研究提供了新思路。
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| 关 键 词： | 脂肪氧合酶 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 大肠杆菌 共表达 正交试验 |
Enhanced Expression of Lipoxygenase in Escherichia coli by Co-Expressing Antioxidases |
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| QIU Fangfang,LIU Song,DU Guocheng and CHEN Jian.Enhanced Expression of Lipoxygenase in Escherichia coli by Co-Expressing Antioxidases[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2019,38(10):23-29. |
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| Authors: | QIU Fangfang LIU Song DU Guocheng and CHEN Jian |
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