| 表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用 |
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| 引用本文： | 周杨,朱建国,唐小春,闫森,宋娜,张明军,李莉,欧阳红生,逄大欣.表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用[J].Canadian Metallurgical Quarterly,2011,37(2). |
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| 作者姓名： | 周杨 朱建国 唐小春 闫森 宋娜 张明军 李莉 欧阳红生 逄大欣 |
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| 作者单位： | 吉林大学畜牧兽医学院,动物胚胎工程吉林省重点实验室,吉林,长春,130062 |
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| 摘 要： | 目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据.方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况.结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达.而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达.结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段.
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| 关 键 词： | Cre-pCEP4 Cre/loxP重组系统 猪胚胎成纤维细胞 MCF-7细胞系 |
Construction of Cre recombinase expression vector Cre-pCEP4 and its application in Cre/loxP system |
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| ZHOU Yang,ZHU Jian-guo,TANG Xiao-chun,YAN Sen,SONG Na,ZHANG Ming-jun,LI Li,OU-YANG Hong-sheng,PANG Da-xin.Construction of Cre recombinase expression vector Cre-pCEP4 and its application in Cre/loxP system[J].Canadian Metallurgical Quarterly,2011,37(2). |
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| Authors: | ZHOU Yang ZHU Jian-guo TANG Xiao-chun YAN Sen SONG Na ZHANG Ming-jun LI Li OU-YANG Hong-sheng PANG Da-xin |
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