| 氟喹诺酮药物格林沙星抗体制备及其icELISA方法建立 |
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| 引用本文： | 吕书为,雷红涛,唐秋实,周丽君,王睿娇,卢蓝蓝,王弘,沈玉栋,孙远明.氟喹诺酮药物格林沙星抗体制备及其icELISA方法建立[J].中国食品学报,2014(6). |
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| 作者姓名： | 吕书为 雷红涛 唐秋实 周丽君 王睿娇 卢蓝蓝 王弘 沈玉栋 孙远明 |
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| 作者单位： | 农业部农产品贮藏质量安全风险评估实验室(广州)/广东省食品质量安全重点实验室;中国人民解放军海军总医院; |
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| 基金项目： | 农业部行业公益(农业)项目资助(20100300808);国家自然科学基金(30700663,20877029);高等学校博士点基金优先发展领域项目(20114404130002);广州市科技计划项目(12C12101663) |
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| 摘 要： | 目的:制备格林沙星多克隆抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附分析方法(icELISA)。方法:采用碳二亚胺法将格林沙星偶联于牛血清白蛋白(BSA)作为免疫原,免疫新西兰大白兔获多克隆抗体;采用活泼脂法分别将格林沙星、克林沙星、加替沙星、培氟沙星和沙拉沙星偶联于卵清白蛋白(OVA),制备5种包被抗原并做性能比较;建立icELISA方法并对其灵敏度和特异性进行评价。结果:成功制备了免疫原和包被抗原及抗体,抗体效价最高达64 000倍。以克林沙星-OVA作异源包被,建立的icELISA方法灵敏度最高,半抑制药物浓度(IC50)为9.14 ng/mL,检测限(IC10)为0.9 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.3~36.4 ng/mL,与其他喹诺酮类药物无明显交叉反应。结论:首次制备出格林沙星抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附检测方法,该法灵敏度高、特异性强,为分析生物样品中格林沙星含量的测定提供了1种新的方法。
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| 关 键 词： | 格林沙星 多克隆抗体 酶联免疫吸附分析方法 异源包被 |
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