| 腰果主要过敏原Ana o 3的重组表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 闫娟娟,佘钿田,张嘉懿,边颖,李会强.腰果主要过敏原Ana o 3的重组表达与鉴定[J].中国食品卫生杂志,2017,29(1):37-41. |
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| 作者姓名： | 闫娟娟 佘钿田 张嘉懿 边颖 李会强 |
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| 作者单位： | 天津医科大学医学检验学院,天津 300203,天津医科大学医学检验学院,天津 300203,天津市儿童医院检验科,天津 300074,天津医科大学医学检验学院,天津 300203,天津医科大学医学检验学院,天津 300203 |
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| 基金项目： | 天津医科大学校基金面上项目(2014KYM08) |
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| 摘 要： | 目的克隆获得腰果主要过敏原Ana o 3基因,并利用pCold-SUMO原核表达载体重组表达Ana o 3并鉴定免疫活性。方法提取腰果总RNA,逆转录至c DNA,设计特异性引物,通过巢式PCR技术克隆腰果Ana o 3基因,将其插入pCold-SUMO vector,鉴定并测序;将测序正确的阳性质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),低温15℃诱导表达。摸索诱导表达条件,经镍柱纯化,并通过Western blot鉴定免疫活性。结果测序结果表明,克隆腰果Ana o 3基因片段全长为417 bp,与GenBank上Ana o 3基因CDS序列基本一致;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,目的蛋白分子量为27 kD左右,大小与理论值相符;Western blot结果表明,与腰果过敏阳性血清具有良好的反应性。结论从腰果中成功克隆了Ana o 3基因,并于原核系统表达了Ana o 3蛋白,证实了此蛋白与腰果过敏血清具有良好的反应性。
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| 关 键 词： | 腰果 Ana o 3 基因克隆 重组 表达 过敏原 免疫印迹 食品安全 |
| 收稿时间： | 2016/11/6 0:00:00 |
Prokaryotic expression and identification of recombinant cashew nut allergen Ana o 3 |
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| YAN Juan-juan,SHE Tian-tian,ZHANG Jia-yi,BIAN Ying and LI Hui-qiang.Prokaryotic expression and identification of recombinant cashew nut allergen Ana o 3[J].Chinese Journal of Food Hygiene,2017,29(1):37-41. |
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| Authors: | YAN Juan-juan SHE Tian-tian ZHANG Jia-yi BIAN Ying and LI Hui-qiang |
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| Affiliation: | College of Medical Laboratory,Tianjin Medical University,Tianjin 300203,China,College of Medical Laboratory,Tianjin Medical University,Tianjin 300203,China,Department of Medical Laboratory, Tianjin Children''s Hospital, Tianjin 300074, China,College of Medical Laboratory,Tianjin Medical University,Tianjin 300203,China and College of Medical Laboratory,Tianjin Medical University,Tianjin 300203,China |
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