一种从富含次生代谢产物茶树嫩叶中高效提取基因组DNA的方法 |
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作者单位: | ;1.茶叶标准与检测技术四川省重点实验室;2.中国测试技术研究院 |
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摘 要: | 建立一种从富含次生代谢产物的茶树嫩叶中高效提取基因组DNA的方法。提出使用冷冻研磨机来破碎细胞,在确保低温环境保护下,快速、均匀地破碎茶树细胞,解决细胞破碎后易氧化、褐变的关键难点;同时在提取液中加入β-巯基乙醇等抗氧化剂进一步防止多酚类化合物的氧化;经过多次纯化有效去除多酚、多糖、蛋白质等杂质;所提取的基因组DNA经验证完整性好、纯度高,完全能进行酶切和聚合酶链式反应(PCR)。此外,进行系统性的方法学考察,结果表明该提取方法稳定、可靠、重现性好。该研究为茶树基因组DNA提取标准方法的建立奠定基础。
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关 键 词: | DNA提取 茶树 方法论 稳定性分析 |
Efficient method for isolation of genomic DNA from tender tea leaves rich in secondary metabolites |
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