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果胶甲酯酶抑制剂的异源表达及其在果酒降甲醇中的应用
作者姓名:闫统帅  周浩洋  王泽翔  何娇娇  梁思宇  周世水
作者单位:(1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510640);(2.华南农业大学食品学院,广东广州 510642);(3.石湾酒厂集团股份有限公司,广东佛山 528031)
基金项目:国家自然科学基金项目(51878291)
摘    要:该文从猕猴桃中克隆出果胶甲酯酶抑制剂(Pectin Methylesterase Inhibitor,PMEI)基因,经EcoRⅠ/XbaI双酶切后连接到表达载体pPICzαA上,电转化到毕赤酵母GS115筛选出阳性菌株GS115/pPICzαA-PMEI,并将重组酵母表达的PMEI浓缩纯化后应用于果酒发酵。研究结果表明:重组毕赤酵母表达菌株GS115/pPICzαA-PMEI成功构建,PMEI的发酵表达量为35.38 mg/L。将PMEI应用到果酒发酵中,桔子酒甲醇降低47.54%,含量由189.75 mg/L降低到99.55 mg/L;苹果酒甲醇降低21.52%,含量由118.15 mg/L降低到91.20 mg/L;葡萄酒甲醇变化不显著,含量均低于20.00 mg/L,表明PMEI对果胶丰富且内源性果胶酶强的桔子具有明显的降甲醇效果。桔子酒发酵工艺优化的PMEI最低抑制质量浓度8.84 mg/L,最适温度18 ℃,此时桔子酒中的甲醇降低66.40%到89.10 mg/L。这为低甲醇果酒的发酵提供了新的技术路线。

关 键 词:果胶甲酯酶抑制剂  毕赤酵母  甲醇  果酒
收稿时间:2022-12-12
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