| 基于gyrB基因的克罗诺杆菌属菌株PCR快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 曲春波.基于gyrB基因的克罗诺杆菌属菌株PCR快速检测方法的建立[J].河南工业大学学报(自然科学版),2013(5):73-78. |
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| 作者姓名： | 曲春波 |
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| 作者单位： | 上海工会管理职业学院 |
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| 基金项目： | 上海高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金(shghg10002) |
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| 摘 要： | 43株克罗诺杆菌属菌株和5株肠杆菌属菌株的gyrB基因被克隆并测序,根据已测序的结果设计了一对特异性引物.经优化后的PCR反应体系只能扩增到43株克罗诺杆菌属菌株的目的片段(438 bp),而无法扩增出其他30株非克罗诺杆菌属菌株.通过系统生物学试验评价得出:该PCR方法的基因组DNA检测灵敏度是1.41 pg/PCR.将56 cfu阪崎克罗诺杆菌菌株ATCC 29544人工污染到3种不同的婴幼儿配方粉中,经人工增菌培养(37℃)6 h后即可扩增到目的片段.将该方法应用于25份实际样品的检测中,结果有3份样品扩增到目的片段.但是经传统的国家标准方法进行检测,只有2份样品检测到克罗诺杆菌属菌株.该方法的建立为快速准确鉴定食品中克罗诺杆菌属菌株提供了一种非常有用的技术手段.
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| 关 键 词： | 克罗诺杆菌属 gyrB基因 PCR 快速检测 |
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