鼠伤寒沙门氏菌PCR快速检测试剂盒的研制 |
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引用本文: | 侯宛宛,李可,张艺沛,方莹,陈晴,柳雅馨,刘斌,岳田利.鼠伤寒沙门氏菌PCR快速检测试剂盒的研制[J].食品科技,2019(7). |
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作者姓名: | 侯宛宛 李可 张艺沛 方莹 陈晴 柳雅馨 刘斌 岳田利 |
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作者单位: | 西北农林科技大学食品科学与工程学院;西北农林科技大学富平现代农业综合试验示范站;浙江省检验检疫科学技术研究院 |
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摘 要: | 为了能快速、准确、灵敏地检测鼠伤寒沙门氏菌,而研制一种基于PCR技术的检测试剂盒。该试剂盒采用了一对特异引物,该引物是以鼠伤寒沙门氏菌的基因STM4495中一段特异序列为检测靶点设计的,可使试剂盒具有良好的特异性。特异性评价试验结果显示,可从22株沙门氏菌(12种血清型)和20株非沙门氏菌(12个常见属)中,准确地检测出鼠伤寒沙门氏菌。此外,从5种PCR增强剂中筛选到了3种,并添加到试剂盒中,以避免PCR反应受到引物二聚体和食品中PCR抑制剂的干扰,使试剂盒具备良好的灵敏性。经评价试验表明,试剂盒检测鼠伤寒沙门氏菌的检测限可以达到37.5 fg/PCR,即使贮存于—20℃放置30 d,仍然能够达到原有检测限;而将该试剂盒反复冻融60次后,也可达375 fg/PCR。对食品样品进行检测,经过增菌24 h后,可以从0~1 CFU/10 g乳粉中检测出鼠伤寒沙门氏菌。从以上结果可知,研制的PCR试剂盒能够准确地检测出鼠伤寒沙门氏菌,具有较高的灵敏性和稳定性,可以用于食品中鼠伤寒沙门氏菌的快速筛检。
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