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影响根癌农杆菌的电击转化条件
引用本文:匡小婴,饶志明,沈微,方惠英,诸葛健.影响根癌农杆菌的电击转化条件[J].食品与生物技术学报,2005,24(4):13-16.
作者姓名:匡小婴  饶志明  沈微  方惠英  诸葛健
作者单位:江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036
基金项目:国家自然科学基金项目(30300027)资助课题.
摘    要:采用电击转化方法将双元载体质粒pCAM3300导入根癌农杆菌LBA4404,研究了不同实验条件对转化率的影响.结果表明:当电场强度为11 kV/cm时,转化率最高,每微克DNA得到9.8×103CFU;在细胞OD600为1.0时进行电转化,转化率最高,每微克DNA得到9.54×103CFU;在一定的细胞浓度范围内,电击转化率与细菌浓度密切相关,转化率随着细菌浓度的上升而上升;质粒大小与电击转化率之间没有明确的关系.将含pCAMBIA3300的根癌农杆菌与粗糙脉胞菌共培养转化,在含有膦化麦黄桐(PPT)(405 mg/L)的平板上筛选到转化子.PCR扩增转化子的染色体,初步证明Bar基因整合进粗糙脉胞菌的染色体中.

关 键 词:根癌农杆菌  电击转化法  PPT抗性
文章编号:1673-1689(2005)04-0013-04
修稿时间:2004年9月20日

Studies on Electroporation Transformation of Agrobacterium tumefaciens
KUANG Xiao-ying,RAO Zhi-ming.Studies on Electroporation Transformation of Agrobacterium tumefaciens[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2005,24(4):13-16.
Authors:KUANG Xiao-ying  RAO Zhi-ming~
Affiliation:KUANG Xiao-ying,RAO Zhi-ming~
Abstract:
Keywords:Agrobacterium tumefaciens  eletroporation  PPT resistance
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