RT-PCR快速检测婴幼儿奶粉中的克罗诺杆菌活菌研究

目的建立反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)快速检测克罗诺杆菌的方法,解决常见方法中以DNA作为模板带来的假阳性问题。方法根据克罗诺杆菌的α-葡萄糖苷酶基因序列设计特异性引物和探针,检测克罗诺杆菌,做了特异性和灵敏度研究。结果建立的RT-PCR法能有效扩增克罗诺杆菌的特异性片段,在纯培养物中,灵敏度可达10 CFU/m L,在人工污染奶粉培养7 h后的检测限为1×10 CFU/m L。结论本方法能够快速检测奶粉中克罗诺杆菌活菌。