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PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌的研究
引用本文:胡惠秩,满朝新,董鑫悦,刘珊珊,薛玉清,杨士芹,谢鲲昊,刘颖,卢雁,姜毓君. PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌的研究[J]. 食品工业科技, 2012, 33(21): 300-304,308
作者姓名:胡惠秩  满朝新  董鑫悦  刘珊珊  薛玉清  杨士芹  谢鲲昊  刘颖  卢雁  姜毓君
作者单位:1. 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨,150030
2. 东北农业大学国家乳业工程技术研究中心,黑龙江哈尔滨,150030
3. 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨150030/东北农业大学国家乳业工程技术研究中心,黑龙江哈尔滨150030
摘    要:近年来,金黄色葡萄球菌引起的食品安全事件频发,这就需要建立一种快速准确地检测食品中金黄色葡萄球菌的方法。传统方法检测食品中金黄色葡萄球菌活菌存在很多缺点。由于细胞死亡后其DNA依然能够存活许久,所以传统方法不能有效区分DNA来自死菌还是活菌。通过荧光染料PMA与快速检测技术LAMP相结合的方法快速、灵敏的检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌,并对死/活菌进行区分。根据金黄色葡萄球菌nuc基因设计引物,并对LAMP反应体系及PMA-LAMP方法进行优化,同时优化了灭菌乳中提取DNA的方法。在纯培养的金黄色葡萄球菌中,PMA-LAMP方法检测灵敏度为3.2CFU/mL,PMA-PCR方法的检测灵敏度为3.2×102CFU/mL;对人工污染灭菌乳中的金黄色葡萄球,PMA-LAMP方法检测灵敏度为5×101CFU/mL,而PMA-PCR方法检测灵敏度为5×103CFU/mL。整个反应需要大约6h,说明PMA-LAMP方法检测灭菌乳中金黄色葡萄球菌特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为快速检测金黄色葡萄球菌活菌的新方法。

关 键 词:PMA-LAMP  金黄色葡萄球菌    检测

Detecting of viable Staphylococcus aureus by loop-mediated isothermal amplification coupling with propidium monoazide in dairy products
HU Hui-zhi,MAN Chao-xin,DONG Xin-yue,LIU Shan-shan,XUE Yu-qing,YANG Shi-qin,XIE Kun-hao,LIU Ying,LU Yan,JIANG Yu-jun. Detecting of viable Staphylococcus aureus by loop-mediated isothermal amplification coupling with propidium monoazide in dairy products[J]. Science and Technology of Food Industry, 2012, 33(21): 300-304,308
Authors:HU Hui-zhi  MAN Chao-xin  DONG Xin-yue  LIU Shan-shan  XUE Yu-qing  YANG Shi-qin  XIE Kun-hao  LIU Ying  LU Yan  JIANG Yu-jun
Affiliation:1,2, (1. Key Lab of Dairy Science,Ministry of Education,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China; 2. National Dairy Engineering Research Center,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)
Abstract:
Keywords:PMA- LAMP  Staphylococcus aureu  dairy  detection
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